Anemia, associata a carenza di acido folico

Qualunque sia la ragione carenza di acido folico anemia è caratterizzata dalla comparsa nelle megaloblasti midollo osseo, distruzione endomidollare erythrokaryocytes, patsitopeniey, macrocitosi e ipercromie globuli rossi e talvolta - disturbi mentali.

Folico (pteroilglutaminovaya) acido (vitamina B₉) È costituita da tre componenti:

• anello pteridina;
• Acido p-aminobenzoico (insieme costituiscono l'acido pteroievuyu);
• acido glutammico.

Il peso molecolare di acido folico - 441. L'acido folico è attivo sotto forma di derivati ​​dell'acido tetraidrofolico. Contenuto di acido folico in diverse forme nel corpo umano è di circa 5-10 mg. Azioni in violazione delle sue entrate nel corpo possono essere scariche sopra 4 del mese.

Il fabbisogno giornaliero di acido folico è 100-200 microgrammi, Gravidanza, anemia emolitica, aumenta molte volte.

La quantità totale di acido folico nella dieta con tutta la potenza di 500-600 microgrammi al giorno. Folato - folati contenute in quantità apprezzabili nel fegato, lievito, spinello, carne. Di Più 50 % acido folico, negli alimenti, Si può abbattere con la cottura.

L'acido folico è assorbito nell'intestino tenue superiore. La capacità dell'intestino di assorbire l'acido folico è molto maggiore del fabbisogno giornaliero.

L'acido folico partecipa nella sintesi di pirimidine e purina basi,, insieme con metilcobalamina - la sintesi di timidinm nofosfata uridinmonofosfata. Coenzimi folati Più coinvolto in un certo numero di reazioni. In particolare, tetraidrofolato partecipa alla sintesi di istidina acido glutammico.

L'eziologia e la patogenesi di anemia durante carenza di acido folico

La carenza di acido folico, nonché deficit di cobalamina, Si porta allo sviluppo di anemia megaloblastica.

Malassorbimento di folati osservata in soggetti, resezione del piccolo intestino, soprattutto digiuno, così come nel lungo termine tenendo anticonvulsivanti come difenilidantoina (difenina) e fenobarbital (luminale). L'assorbimento di acido folico è rotto quando la malattia celiaca e materozza. La carenza di acido folico, nonché deficit di cobalamina, osservato Sindrome dell'ansa cieca. Descritto rari casi di disturbi ereditari di trasporto acido folico attraverso la parete intestinale e nel liquido cerebrospinale. L'assorbimento di altre sostanze senza subire.

La carenza di acido folico nei neonati osservato in prematurità, violazione dell'assorbimento intestinale, latte di capra fed, contenente una piccola quantità di acido folico.

Un malassorbimento significativa di acido folico può verificarsi in pazienti, alcolisti.

Aumento del consumo di acido folico durante la gravidanza può portare ad una carenza di acido folico, Tuttavia, nei paesi sviluppati oggi è raro. La carenza di acido folico nelle donne in gravidanza si verificano quando una cattiva nutrizione, la presenza di anemia emolitica, utilizzare una grande quantità di alcool pre-gravidanza.

Le manifestazioni cliniche della carenza di folati

La carenza di acido folico in bambini e giovani donne. Allo stesso tempo, i pazienti lamentano di debolezza generale, vertigini. A differenza di carenza di cobalamina mal di lingua osserva raramente. Parestesie, e altri segni di funicolare mielosi mancanti. Sclera spesso ikterichnost.

In contrasto con il deficit di carenza di cobalamina di acido folico è gistaminoupornaya raramente osservata Akhil, gastratrophia, sebbene la diminuzione della secrezione gastrica è spesso.

Per carenza di folati, nonché per la carenza di cobalamina, caratterizzata dalla comparsa nel sangue periferico macrocytosis, megalociti e megaloblasti, la presenza di anemia hyperchromic, riduzione del numero di reticolociti, piastrine e leucopenia con spostamento neutrofila a sinistra ea destra. Nel midollo osseo - megaloblasti.

I cambiamenti nel sistema nervoso sono diverse dalle manifestazioni a B₁₂-anemia da carenza.

Dimostrato, che le persone con epilessia, Carenza di acido folico porta a frequenti attacchi, alla loro maggiore gravità. Ciò è particolarmente importante per il fatto, che l'assunzione di farmaci anticonvulsivanti può causare malassorbimento di folati. Secondo la letteratura, in soggetti con carenza di acido folico schizofrenia provoca esacerbazioni, più gravi sintomi e trattamento meno efficace.

La diagnosi differenziale di deficit di cobalamina e di acido folico

Per la diagnosi differenziale di deficit di cobalamina e di acido folico è usata metodo radioimmunologico per la determinazione di acido folico nel siero e in particolare negli eritrociti. Il contenuto di cobalamina viene determinato con il metodo microbiologico. Come un organismo di prova utilizzato come Streptococcus faecalis e Lactobacillis casei. Normalmente, il contenuto di acido folico nelle gamme di siero di sangue, Secondo gli autori, utilizzando diversi metodi di ricerca, da 3 a 25 ng / ml, e eritrociti - da 100 a 425 ng / ml.

In carenza di acido folico diminuisce il livello del siero, e negli eritrociti. Contenuto di acido folico Alla carenza kolabaminov nel siero del sangue aumenta spesso, ed eritrociti a volte può essere ridotto, anche se il calo, generalmente, un piccolo.

Per la diagnosi di carenza di acido folico è anche usato Metodo Load istidina (15 g), quindi definire il contenuto di acido nel formiminglutaminovoy urine. Normalmente, la maggior parte delle forme di istidina acido glutammico. Con la produzione di urina 1-18 mg di acido formiminglutaminovoy. Alla carenza di acido folico 8 ore dopo la sua introduzione nel corpo viene rilasciato dalle urine 20 a 1500 Acido formiminglutaminovoy mg. Un numero significativo di acido formiminglutaminovoy escreto nelle urine dopo somministrazione di istidina in persone, trattati con metotrexato. Alla carenza di cobalamina, cirrosi epatica l'escrezione urinaria di acido aumenta formiminglutaminovoy, in misura minore, che con un deficit di acido folico. Livelli normali di urinari methylmalonic contenuto acido aumenta formiminglutaminovoy istidina acido dopo aver ricevuto la prova di carenza di acido folico, invece di cobalamina.

Aiuta a differenziare questi due Stati e studio radionuclide. Alla carenza di cobalamina, Si tratta di una violazione della secrezione del fattore intrinseco, diminuito assorbimento di cianocobalamina etichettati, una carenza di acido folico, viene assorbito correttamente.

Alla carenza di acido folico, la sua introduzione nel corpo porta ad un maggiore contenuto di reticolociti, considerando che l'iniezione di cianocobalamina (derivati) inefficace. La carenza di acido folico metilcobalamina aumenta il livello di reticolociti.

Definizione di neutrofili segmentazione indice

Contare il numero di neutrofili, con 4 segmento e altro (Totale 200 cella). Determinare la percentuale di cellule, con 5 segmenti e più relativo alla quantità di cellule, con 4 segmento. L'indice è determinato dalla formula:

IS =(KS (5 e altro))/KS(4);

dove IC - segmentazione indice;

KS (5 e altro) - Il numero di neutrofili segmentati (su 200 cella), in cui il numero dei segmenti è uguale a 5 o più;

KS (4) - Il numero di neutrofili segmentati, in cui il numero dei segmenti è uguale a 4.

Normalmente, le gamme questo indice 2,5 a 25 %. Dove, quando supera 30 % (vibrazione 120%), Si può parlare di neutrofili ipersegmentazione. Si osserva la carenza di acido folico, metilkoʙalamina, e uremia.

Determinazione del acido metilmalonico nelle urine da Giordio e Plaud

Reagenti.

1. La resina a scambio ionico Dowex-ZX4 (modulo cloruro, 200-400 Mesh). La resina è stata lavata con cinque volumi di acqua distillata 3 volte, è stato sospeso in due volumi di acqua distillata e immagazzinata in un piatto buio a 4 ° C.

2. Una soluzione di para-nitroanilina 0,075 % preparata sciogliendo 37,5 mg reagente 500 ml 0,2 Soluzione M di acido cloridrico. Conservare in un vaso scuro, Essa è rimasta stabile per diversi mesi a temperatura ambiente.

3.Tampone acetato (pH 4,3) fatto di 1 M acetato di sodio e 1 Soluzione M di acido acetico.

4.Diazoreaktiv: 4 ml 0,5 % soluzione di nitrato di sodio è stata mescolata con 15 ml para-nitroanilina. La miscela è stata posta in frigorifero a 4 ° C ed è stata aggiunta la soluzione raffreddata 4 ml 0,2 M acetato di sodio. Stabile reagente a temperature 4 ° C per un giorno.

5.Standard 0,05 Soluzione M di acido metilmalonico: 295 acido metilmalonico mg sono sciolti in 50 ml di acqua.

Metodo

Urina è stato raccolto in una bottiglia di vetro e congelati fino studio. Per studiare la porzione carica di urina (20- 25 ml), scongelati, centrifugato, e il supernatante è stato raccolto usando una soluzione diluita di idrossido di sodio o acido cloridrico per aggiustare il pH 6,5.

Cromatografica altezza della colonna 20 cm e un diametro 1 cm è stato riempito di resina Dowex-ZX4. Lo strato di resina dovrebbe essere entro 3 cm. Viene fatta passare attraverso la resina 5 ml di urina, lavato con acqua distillata (2 × 50 ml ad un tasso non superiore 15 ml 1 da). Acido metilmalonico può essere eluito dalla resina 20 ml 0,1 Soluzione M di acido cloridrico. Ulteriore 2 ml di eluato sono stati mescolati con 3 ml 1 M tampone acetato, pH 4,3 in una provetta con un tappo di vetro (15×2cm). Per viene aggiunto alla miscela 3 ml diazoreaktiva freddo, in cui il pH è elevato a 4,0. La miscela è stata riscaldata in un bagno d'acqua a temperatura 94 ° C. 3 min e 2 ml 3 Soluzione di idrossido di sodio M. Il tubo è stato poi rimosso dal bagnomaria, tappati e il contenuto agitato. La miscela è stata raffreddata a temperatura ambiente per 10 min e ad una fotometrico 620 nm in una vaschetta con un cammino ottico 1 cm.

Come controllo, una miscela di, consiste in 2 ml 0,1 Soluzione M di acido cloridrico, 3 ml e diazoreaktiva 3 tampone acetato ml. Soluzione standard di acido metilmalonico costituito dagli stessi componenti e 0,02 ml 0,05 Soluzione M di acido metilmalonico. L'assorbanza di queste soluzioni sono state misurate nelle stesse condizioni.

Contenuto di acido metilmalonico (mg) per unità di volume di urina (1 l) determinato dalla formula:

(E_Campione-E_controllo)/(E_standard-E_controllo)*A *((1000*T)/M)

dove E - assorbanza di vari campioni;

A - la quantità di acido metilmalonico in un tubo di prova standard, ml;

1000 - La quantità di urina, preso per la ricerca, ml;

T - la quantità di acido cloridrico, preso per eluizione, ml;

M - il numero dell'eluato, preso per la ricerca, ml.

Sotto le condizioni di cui sopra, la formula può essere semplificata come segue::

(E_Campione-E_controllo)/(E_standard-E_controllo)*236

Dove, quando la quantità di acido metilmalonico nelle urine è superiore 300 mg / l, dovrebbe essere ri-mescolato con acetato eluato tampone e diazoreaktivom, ma invece 2 ml di eluato è consigliabile prendere 4- 10 volte inferiore e portare il volume a 2 ml 0,1 Soluzione M di acido cloridrico. Nel calcolo della diluizione deve essere considerata.

Normalmente al giorno con la produzione di urina 0,6-4,7 mg di acido metilmalonico. Alla carenza di cobalamina escrezione giornaliera raggiunge acido metilmalonico 294 mg. Normalmente, la reception 10 g valina non aumenta clearance dell'acido metilmalonico, carenza di cobalamina aumenta l'escrezione di acido metilmalonico.

Determinazione del acido metilmalonico nelle urine da Green

Reagenti.

1. Etere.
2. Etanolo.
3. Una soluzione di acido cloridrico 0,1 M.
4. Solfato di ammonio.
5. Сильноосновная смола деацидит FF (200 maglia, modulo cloruro).
6. Una soluzione di nitrato di sodio 0,5 % (peso / volume).
7. Una soluzione di para-nitroanilina (750 disciolto in mg 1 l 0,2 Soluzione M di acido cloridrico).
8. Acetato di sodio 0,2 M.
9. Tampone acetato 1 M, pH 4,3: misto 1 Soluzione di acetato di sodio ed M 1 Soluzione M di acido acetico nel rapporto 16,35:33,9.
10. Una soluzione acquosa di idrossido di sodio 3 M.

La. Soluzione standard di acido metilmalonico: 100 disciolto in mg 100 ml di acqua, conservato in frigorifero.

B. Acido metilmalonico standard di lavoro: soluzione standard diluita in 20 tempo 0,1 Soluzione M di acido cloridrico (1 mL dello standard e 19 ml di acido cloridrico). Questa quantità di acido metilmalonico equivalente 100 acido metilmalonico mg 1 condizioni di prova l urine.

Per la preparazione di diazoreaktiva misto 4 ml 0,5 % soluzione di nitrato di sodio e 15 ml para-nitroanilina. La miscela è stata posta in un bagno di ghiaccio e aggiungere 4 ml 0,2 M acetato di sodio.

Metodo.

Urina è stato raccolto per un giorno, misurato il volume e 10 ml di acidificato 1 Soluzione di acido solforico M a pH 2,0 o leggermente sotto. Solfato di ammonio è stato aggiunto alla saturazione. La miscela è stata posta in un imbuto separatore ed estratta tre volte con etere ed etanolo in un rapporto 3:1. Per impedire la formazione della miscela di emulsione estratto a utilizzato in eccesso.

L'estratto è stato passato attraverso una piccola colonna cromatografica (1 – 1,5 Diametro cm), completato 5 resina ml. La colonna è stata lavata 50 acqua distillata ml. Acido metilmalonico eluita 0,1 Soluzione M di acido cloridrico. Dopo l'eluizione selezionato 2 ml eluato, W è aggiunto ml di tampone acetato e 3 ml diazoreaktiva.

Dopo la miscelazione, il tubo è stato posto in un bagno di acqua a temperatura 95 ° C 3 m. Poi ha aggiunto 2 ml 3 M di idrossido di sodio e una volta tubo chiuso tappo per ridurre al minimo il contatto con l'aria. Dopo raffreddamento, l'assorbanza è stata misurata alla lunghezza d'onda 620 li. Per il vuoto invece di utilizzare il eluato 2 ml 0,1 Soluzione M di acido cloridrico, e per la soluzione standard - 2 ml di standard di lavoro.