Definisi karakteristik kuantitatif dan kualitatif sperma

Penentuan motilitas sperma

Penentuan motilitas sperma merupakan parameter penting, mencirikan kualitas ejakulasi. Sperma, mampu pembuahan, memiliki mobilitas - membuat gerakan lurus ke depan pada kecepatan 50 m / s. ejakulasi dapat ditemukan sperma dengan gangguan mobilitas - diskinospermiey dalam bentuk getaran, Manege dan jenis-jenis gerak, yang biasanya tidak hadir.

Sperma motilitas dievaluasi dalam persiapan asli ejakulasi dengan bidang pandang terbatas (menggunakan window fonio), Menggunakan lensa okuler 7X dan 40X, dengan terkulai kondensor. perhitungan 100 sel, perhatikan jumlah mereka bergerak, spermatozoa bergerak dan tidak bergerak. Biasanya, spermatozoa aktif-motil yang 80-90 %, menetap - 10-12, tetap - 6- 10 %. Memperhatikan hanya mereka yang aktif bergerak dan bergerak lambat sperma, yang membuat kemajuan yang mantap.

Anda juga dapat menggunakan lima poin skala penilaian yang lebih rinci:

• "4" - mobilitas yang sangat baik (Semua spermatozoa memiliki mobilitas translasi bujursangkar pada kecepatan yang cukup);
• "3" - mobilitas yang baik (beberapa tetes);
• "2" - mobilitas biasa-biasa saja (Masih banyak sperma, tapi dengan bergetar ekor);
• "1" - mobilitas miskin (kurang gerak maju, Hanya mobilitas ekor sperma);
• "0" - pergerakan sperma hilang.

ejakulasi kesuburan Hal ini tergantung pada durasi motilitas sperma, sehingga Anda perlu menentukan motilitas sperma dalam dinamika (kinezisgramma dinamis).

Setetes air mani diterapkan pada kaca penutup, mengubahnya terbalik dan menempatkan pada slide kaca dengan sabit untuk drop menggantung sehingga, untuk menjatuhkan berada di pusat reses. Tepi kaca penutup dilumasi dengan parafin cair dan di bawah mikroskop, persentase aktif bergerak, spermatozoa bergerak dan tidak bergerak melalui 1, 3, 6, 12 dan 24 jam setelah ejakulasi. Penelitian yang dilakukan pada suhu kamar. Biasanya, jumlah spermatozoa aktif-motil berkurang setiap 2-3 jam 20 % ,

• Catatan. pemeriksaan mikroskopis ejakulasi harus dilakukan di laboratorium satu orang, memiliki pengalaman yang cukup di bidang ini diagnostik laboratorium, sebagai hasil penentuan motilitas sperma oleh para peneliti yang berbeda berkisar hingga ± 40 % dan sangat tergantung pada pengalaman dengan ejakulasi.

Sampel pada "kebangkitan" sperma

Sampel pada "kebangkitan" sperma Ini didasarkan pada pemulihan mobilitas normal tetap, tapi hidup sperma dengan cara merangsang solusi:

1) solusi Becker (glukosa - 3 g, Di₂HPO₄ - 0,6 g, NaCl - 0,2 g, KH₂SETELAH₄ -0,01 g, air suling untuk 100 ml; pH - 7,8);

2) 0,1 % solusi kafein (tidak hanya di ampul!) - 10 % volume ejakulasi;

3) 0,1 M hanya memerlukan arginin.

Metode. pipetter dimensi 1 ml nasasyvayut 0,1 ml ejakulasi (tercampur) dan pipet yang sama mendapatkan 0,9 merangsang solusi ml. Isi pipet ditiup pada kaca arloji, dicampur dengan baik oleh hisap berulang dan cairan meniup watchglass sebuah, dan kemudian produk jadi tergantung penurunan. melalui 5- 10 min tetap, tapi hidup sperma mulai bergerak.

Persentase spermatozoa motil menentukan segera ketika memulihkan mobilitas dan kemudian 3, 6, 12 dan 24 tidak. Untuk hasil yang lebih dapat diandalkan, dilakukan sejajar dengan sampel dengan dua solusi menantang. Hanya di bawah kondisi tidak mungkin untuk "menghidupkan kembali" sperma bergerak bisa bicara tentang nekrospermii.

Identifikasi sperma hidup di antara tetap

Prinsip metode ini didasarkan pada, enzim yang hidup sperma decolorized eosin. Digunakan sebagai reaktan 5 % berair kalium eosin dan 10 % larutan Nigrosine.

Metode. Pada kaca slide dilapisi setetes mani, ditempatkan di dekat dua kali drop 5 % solusi eosin dan penurunan kalium 10 % solusi Nigrosine, Hal ini juga tetes dua kali lebih besar kalium eosin. ejakulasi pertama dicampur dengan eosin kalium, menunggu beberapa detik, dan kemudian dicampur dengan setetes Nigrosine, lagi menunggu beberapa detik dan membuat noda tipis kaca geser dipoles.

Menggunakan sistem mikroskop perendaman, di pap dihitung tidak kurang dari 200 sperma, menyoroti hidup (Tanpa warna) dan mati (Eosin merah bernoda). Jumlah sel sperma hidup dan mati dinyatakan sebagai persentase. Dengan tidak adanya Nigrosine penurunan ejakulasi dicampur dengan setetes 5 % larutan kalium eosin, dan siap untuk smear tipis mikroskop. pewarna Nigrosine hanya latar belakang obat, di mana sperma dialokasikan lebih counterstained. Biasanya sperma hidup adalah 80-90 % dari jumlah total.

Menghitung sperma di 1 ml, dan seluruh volume ejakulasi

jumlah sperma di 1 ml dan sekitar ejakulasi dihitung dalam ruang penghitungan Goryaeva.

Jumlah spermatozoa ejakulasi ditentukan dengan mengalikan jumlah spermatozoa di 1 kuantitas ml ejakulasi (dalam mililiter).

• Catatan. Ruang penghitungan juga dapat menentukan jumlah sperma motil, apa yang ejakulasi hangat encer natrium hloridz larutan isotonik dan menghitung jumlah spermatozoa tetap, dan kemudian kurangi dari jumlah total.

Biasanya, dalam 1 ml ejakulasi mengandung 60-120.000.000. sperma, ketika giperspermii - lebih 120 juta., di oligo - dari 30 untuk 60 juta., apa, biasanya, tidak memungkinkan untuk pemupukan. Namun, kasus dijelaskan, Ketika terjadi pembuahan, dan pada pemeliharaan di 1 ml ejakulasi 5 untuk 30 juta. sperma.

Dalam kasus apapun, yang oligospermia deteksi diperlukan kontrol 2-3 3-4 minggu dari menghitung jumlah sperma dengan interval waktu untuk menentukan jumlah maksimum mereka. Pada jumlah sperma laki-laki yang sama tergantung pada fluktuasi yang cukup besar dalam fisiologis.

Biasanya sekitar ejakulasi mengandung lebih 150 juta. sperma.

menghitung spermiogram

Spermiogram - adalah persentase bentuk morfologi yang berbeda dari spermatogenesis dan sel sperma.

smear yang, diwarnai dengan hematoxylin-eosin atau Pappenheim, dihitung setidaknya 200 sperma, sementara jumlah bentuk normal dan patologis, dan sel-sel spermatogenik dinyatakan dalam persentase. Menghitung dilakukan dengan menggunakan sistem perendaman mikroskop dan mesin untuk menghitung leukogram pra mengubah kunci nama.

Dalam ejakulasi sperma yang normal bentuk yang normal terdiri 80-85 %, kadang-kadang 100 %, mereka termasuk variasi fisiologis, ditandai dengan tidak biasa atau leher, atau dikurangi, atau kepala membesar.

muda, atau nezrelye, Bentuk spermatozoa memiliki sekitar residu kepala dan leher sitoplasma ("Collar"), diamati dalam hubungan seksual sering dan tidak mampu pembuahan.

Bentuk-bentuk lama sperma (giperhromiya, ahromiya, kepala vacuolation) muncul di ejakulasi setelah pantang diperpanjang dan tidak cocok untuk pembuahan.

Dengan bentuk patologis termasuk sperma dengan kelainan bentuk kepala: megalospermatozoidы (gigantospermatozoidy), yg besarnya luar biasa, mikrospermatozoidy, tapered, sperma berkepala dua dengan leher dan ekor, tanpa leher dengan satu atau lebih ekor, tanpa ekor, ekor tanpa kepala, dll.

Pada pria sehat dalam ejakulasi sperma yang normal bentuk normal tidak umum ditemukan, tapi kadang-kadang jumlah mereka selama kapasitas pemupukan normal sperma bisa mencapai 20 %, dari mereka tentang 15 % Ini adalah patologi kepala, 3-5 % - tubuh, 2-5 % - ekor.

Dalam spermatogenesis patologis, bentuk sekretori infertilitas diidentifikasi dengan kepala sperma dan leher patologi. ekor patologi asal biasanya ekskretoris, Hal ini muncul dari bagian sperma jalur vas.

Dalam persiapan patri juga terlihat jelas di lokasi yang terpisah sel germinal pada berbagai tahap diferensiasi dan pematangan, yang sangat penting untuk diferensiasi dan aspermia azoospermia.

spermatogonium bulat, kadang-kadang oval, diameter 5-12 um. Inti menempati sekitar sepertiga dari sel-sel, gelap- atau cahaya berwarna, 1-2-3 Nucleo- lama, sering berada di dekat karyotheca (amplop nuklir), struktur halus kromatin. Sitoplasma sempit, basophilic, Homogen. Spermatogonium membagi mitotically beberapa kali. Ada sel-sel dengan tahapan yang didefinisikan dengan baik mitosis.

Beberapa sel, terbentuk sebagai hasil dari mitosis, berdiferensiasi menjadi spermatosit primer I, dan kemudian urutan II. Saya memesan spermatosit - bulat atau poligonal sel 17-19 um dengan diameter inti besar dan sitoplasma cerah putaran halus. persiapan patri adalah zona perinuklear jelas.

II spermatosit rangka terbentuk sebagai hasil dari meiosis. mereka lebih kecil, dari sekitar saya spermatosit (diameter 15 m), tapi hampir identik dalam morfologi. ejakulasi lebih umum, dari sekitar saya spermatosit, tapi lebih jarang, dari spermatid.

Spermatydы - kecil, bulat atau memanjang sel 12-15 um dengan diameter inti hiperkromatik melingkar, terletak di pusat atau eksentrik. Mungkin ada spermatid multi-core. Sitoplasma pucat, bazafilnaya, sering vakuolisasi terutama.

Spermatid diubah menjadi spermatozoa.

Sel spermatogenesis dalam spermiogram yang normal merupakan tidak lebih dari 2 %. Sejumlah besar dari mereka diamati pada sifat sekresi infertilitas.

Untuk fase kontras mikroskop ejakulasi diencerkan dengan larutan isotonik natrium klorida dengan jumlah kecil 1 % larutan Rivanol atau karbol untuk mengurangi motilitas sperma.

Dengan mikroskop fluoresen Hal ini diterapkan ke kaca geser setetes sperma, dan satu tetes acridine orange dalam pemuliaan yang 1:20000. Tetesan dicampur dan ditutupi dengan kaca penutup. Untuk mikroskopi menggunakan lensa okuler 7X dan 40X. Hidup sperma berwarna hijau, hilang - orange. bentuk sperma normal dan abnormal yang mudah untuk membedakan karena fitur morfologi mereka.

Aturan bekerja pada fase kontras dan mikroskop fluoresensi dijelaskan dalam instruksi untuk perangkat ini. Bila menggunakan fase kontras dan neon mikroskop spermiogram dihitung sesuai dengan aturan umum.

Berdasarkan pemeriksaan mikroskopis dari ejakulasi dapat mengungkapkan berbagai kondisi patologis.

• Aspermïya - tidak adanya sperma dalam ejakulasi dan kuman sel.
• azoospermia - tidak adanya sperma di hadapan sel germinal.
• Astenospermiya - penurunan jumlah sel motil dan peningkatan jumlah bentuk patologis pada umumnya jumlah sperma yang normal.
• oligoasthenospermia - penurunan jumlah sperma dan bentuk mobile mereka dan peningkatan jumlah bentuk patologis.
• Nekrospermiya - Fixed semua sperma dalam produk bahkan setelah "kebangkitan".
• Akinospermiya - negara, di mana, berbeda dengan sperma nekrospermii sebelumnya tetap setelah "kebangkitan" dari awal untuk bergerak.