Gemoliticheskaya anemia Nasledstvennaya, karena aktivitas defisiensi kinase piruvat sel darah merah

Gemoliticheskaya anemia Nasledstvennaya, Terkait kekurangan eritrosit piruvat kinase - bentuk yang relatif jarang anemia hemolitik, yang diwariskan secara resesif autosomal, Ini memberi Manifestasi klinis pada homozigot, hasil dengan tanda-tanda hemolisis intraseluler, makrositosis eritrosit, kandungan rendah kalium. Ada lebih dari 200 kasus pembawa homozigot aktivitas defisit piruvatkinaznoy.

Patogenesis

Piruvat kinase adalah salah satu enzim, menyimpulkan glikolisis. Ini glikolisis Link dan ATP dibentuk nikotinamiddinukleotid. Sebagian besar pasien dengan defisiensi aktivitas kinase piruvat berkurang dalam isi sel darah merah dari dua metabolit ini, Dalam beberapa kasus, isi ATP adalah normal, tapi terganggu stabilitas ATP selama inkubasi. Tingkat normal ATP ditemukan di retikulositosis signifikan. Hal ini disebabkan adanya retikulosit dan kemungkinan mitokondria ATP tidak hanya melalui glikolisis, tetapi juga karena fosforilasi oksidatif.

Konsekuensi dari kekurangan kinase piruvat Itu juga merupakan akumulasi dari produk glikolisis, terbentuk pada tahap sebelumnya - fosfofenolpiruvata, 3-phosphoglycerate, dan khususnya 2,3-difosfogliserat. Konten piruvatanlaktata penurunan sel darah merah.

Kurangnya ATP dalam eritrosit defisiensi kinase piruvat Hal ini menyebabkan gangguan fungsi pompa ATP-aznogo sel darah merah dan hilangnya ion kalium, dimana konsentrasi natrium ion dalam eritrosit non-meningkat. Hal ini menyebabkan penurunan kadar ion monovalen dalam eritrosit, dehidrasi sel dan penyusutan. Fenomena ini disebut dessikotsitoz. Penurunan sel darah merah air mempersulit proses oksigenasi dan oksigen rilis oleh hemoglobin. Dalam hal ini, peran kompensasi tertentu yang dimainkan oleh akumulasi yang signifikan dalam eritrosit 2,3-asam difosfoglitserinovoy.

Afinitas hemoglobin terhadap oksigen dikurangi dengan interaksinya dengan 2,3-difosfogliserat. Karenanya, pada konsentrasi yang lebih tinggi untuk 2,3-difosfogliserat mengembalikan oksigen ke jaringan difasilitasi.

Manifestasi klinis dari aktivitas defisiensi kinase piruvat

Manifestasi klinis dari aktivitas kinase defisiensi piruvat tergantung pada derajat hemolisis. Dalam beberapa kasus, meningkat hemolisis diwujudkan saat lahir dan disertai dengan terjadinya krisis hemolitik parah, menyebabkan kebutuhan untuk transfusi darah untuk mempertahankan hemoglobin di tingkat sub-biasa. Dalam kasus lain, penyakit ini dapat terjadi hampir tanpa gejala dengan tanda-tanda pertama dari peningkatan hemolisis (sclera subikterichnost dan kulit) berusia 17-30.

Umumnya; dibandingkan dengan microspherocytosis, Kekurangan kinase piruvat memiliki lebih parah.

Hampir semua pasien dengan limpa teraba. Sedikit peningkatan yang diungkapkan beberapa anomali operator heterozigot, meskipun mereka memiliki anemia, biasanya, hilang. Sejumlah pasien mungkin splenomegali. Sebuah peningkatan yang signifikan dalam hati jarang ditemukan. Pada pasien yang terisolasi dengan ulkus kaki diidentifikasi.

Indikator Laboratorium aktivitas defisiensi kinase piruvat

Sebagian besar pasien dengan defisiensi aktivitas kinase piruvat diamati anemia sedang (4,34- 6,21 mmol/l, atau 70-100 g / l), Namun, selama krisis hemoglobin dapat dikurangi menjadi 3,1 3,72 mmol/l (50-60 g/l). Konten eritrotsitov- 2,5-3,0 T 1 l. Krisis hemolitik dapat disebabkan oleh infeksi. Ada kasus gain hemolisis saat menstruasi.

Sel-sel darah merah penderita defisiensi piruvat kinase ditandai dengan makrositosis dengan normohromiey, sedikit anisocytosis dan poikilocytosis. Ada polychromatophilia adil. Kadang-kadang ditemukan sel darah merah mishenevidnye dan sel darah merah dengan bergigi tepi atau dalam bentuk murbei, sering diidentifikasi basophilic eritrosit punktatsiya, Jolly corpuscles. Beberapa pasien dalam darah perifer mengungkapkan sejumlah besar erythrokaryocytes, selama krisis, dapat ditingkatkan hingga 60-70 %. ESR, jumlah sel darah putih, leukogram, jumlah trombosit dalam kisaran normal. Seperti bentuk-bentuk lain dari anemia hemolitik, dalam sumsum tulang mengungkapkan iritasi tajam kuman merah hematopoiesis.

Tingkat bilirubin, biasanya, meningkat karena tidak langsung.

Hemoglobin plasma gratis normal, tetapi dapat dikurangi kadar haptoglobin. Hemosiderin dalam urine tidak ada. Isi hemoglobin janin dan hemoglobin A₂ dalam kisaran normal.

Resistensi osmotik eritrosit defisiensi piruvat kinase dalam banyak kasus yang normal, kadang-kadang berkurang setelah hari inkubasi. Autogemoliz, biasanya, upgrade ke berbagai derajat. Ada kasus defisiensi kinase piruvat dengan autogemolizom yang normal. Pada bagian pertama melaporkan kasus defisiensi piruvat kinase telah terdaftar tipe II autogemoliza, mengoreksi penambahan ATP, dan tidak mengoreksi atau sedikit mengoreksi penambahan glukosa. Selanjutnya, banyak kasus telah dijelaskan dengan jenis kekurangan enzim Saya autogemoliza atau tidak ada. Oleh karena itu, tidak dianjurkan untuk menerapkan metode autogemoliza untuk diagnosis diferensial dari anemia hemolitik. Umur sel darah merah dengan defisiensi aktivitas piruvat kinase selalu disingkat.

Jenis warisan aktivitas piruvat kinase autosomal resesif. Heterozigot praktis sehat, Menurut berbagai peneliti, keparahan defisit telah berkisar dari 50 untuk 70 % norma.

Kegiatan diagnostik defisiensi kinase piruvat

Diagnosis defisiensi kinase piruvat sel darah merah dapat diharapkan untuk memberikan dalam kasus anemia hemolitik, mengalir selama bertahun-tahun dengan peningkatan limpa, kurangnya perifer darah smear tanda microspherocytosis, elliptotsitoza dan stomatotsitoza.

Tes kualitatif untuk menentukan aktivitas kinase piruvat. Untuk tujuan ini, metode ini banyak digunakan noda neon, berdasarkan, bahwa dalam perjalanan reaksi, kataliziruemoy piruvatkinazoy, nikotinamiddinukleotid teroksidasi dan fluoresensi menghilang.

Kegiatan piruvat kinase pada orang sehat berkisar dari 4,0 untuk 7,7 mmol (min / 1010 eritrosit) atau 4,0 untuk 7,7 Kekuasaan. Mayoritas aktivitas enzim penyakit homozigot kurang 1 Kekuasaan. Namun, mungkin ada kasus sedikit penurunan aktivitas enzim. Diagnosis dari bentuk yang jarang dari anemia hemolitik sangat sulit, dan diagnosis dapat dibuat hanya dalam studi kinetika enzim.

Diagnosis anemia hemolitik, terkait dengan kekurangan kinase piruvat

Diagnosis anemia hemolitik, terkait dengan kekurangan kinase piruvat, diperlukan untuk melaksanakan bentuk-bentuk lain dari anemia hemolitik herediter.

Karena kebanyakan pasien kekurangan aktivitas kinase piruvat tidak seperti individu, menderita microspherocytosis, elliptotsitozom, stomatocitozom, anemia hemolitik, kereta AC hemoglobin stabil, dan penyakit thalassemia diturunkan secara autosomal resesif, bahwa patologi ini hanya ditemukan pada generasi yang sama dan hampir tidak pernah terlihat di antara orang tua.

Ketika anemia herediter, kereta AC hemoglobin stabil, terutama pada penyakit yang parah, kadang-kadang proband adalah pembawa pertama mutasi, dan kemudian penyakit ini ditularkan ke generasi berikutnya. Oleh karena itu, diagnosis banding harus dilakukan dengan hemoglobinopathies, kereta AC hemoglobin stabil, serta resesif diwariskan anemia hemolitik, disebabkan oleh aktivitas kekurangan enzim lainnya.

Hal ini memainkan peran pendukung stabilitas hemoglobin, yego elektroforesis. Untuk mengecualikan fermentopathia lainnya menyelidiki aktivitas enzim lain dari eritrosit, dan untuk mengecualikan anemia hemolitik autoimun dilakukan Coombs, agregatgemagglyutinatsionnaya.

Metode neon untuk menentukan aktivitas dengan piruvatkiiazy Beutler

Reagen.

1. Asam Fosfoenolpirovinogradnaya (garam tritsiklogeksilammoniynaya) 0,15 Solusi M dari, dinetralkan dengan pH 7,0-8,0 0,2 Solusi M NaOH (0,03 ml).
2. ADF 0,03 Solusi M dari, dinetralisir (0,1 ml).
3. NAD-N 0,015 Solusi M dari, dinetralisir (0,1 ml).
4. Magnesium sulfat 0,08 Solusi M dari (0,1 ml).
5. Larutan penyangga fosfat kalium 0,25 M, pH 11 7,4 (0,05 ml).
6. Air Distillirovannaya (0,62 ml). Campuran dapat disimpan di - 20 ° C tidak lebih dari seminggu.

Metode.

Untuk penggunaan darah penelitian, diambil dengan heparin atau natrium sitrat. Hal ini disentrifugasi, aspirated dan mempersiapkan plasma 20 % suspensi sel darah merah dengan menambahkan empat volume larutan natrium klorida isotonik.

Suspensi eritrosit dalam jumlah 0,02 ml dicampur dengan 0,2 ml reagen dan diinkubasi selama 30 menit pada 37 ° C. Sebuah tetesan ditempatkan pada kertas filter, dan browsing fluoroskop. Fluoresensi dasar terdeteksi segera setelah penambahan eritrosit untuk campuran sebelum inkubasi. Biasanya setelah 30 menit inkubasi menghilang, dan aktivitas defisiensi piruvat kinase sisa-sisa. Ini adalah, NADH yang berfluoresensi di bawah pengaruh radiasi UV di daerah, dekat dengan terlihat, sedangkan NAD tidak berpendar. Karena solusi atas tidak stabil dan mudah terdegradasi, membutuhkan pemantauan. Anda harus hati-hati memisahkan lapisan sel darah putih, karena aktivitas defisiensi kinase aktivitas enzim eritrosit piruvat di leukosit bisa normal.