Anemia, terkait dengan kekurangan asam folat

Apapun alasan folat anemia defisiensi asam ditandai dengan penampilan di megaloblas sumsum tulang, kehancuran intramedulla erythrokaryocytes, patsitopeniey, makrositosis dan hyperchromia sel darah merah dan kadang-kadang - gangguan mental.

Folievaya (pteroilglutaminovaya) AC id (vitamin B₉) Ini terdiri dari tiga komponen:

• cincin pteridin;
• Asam P-aminobenzoic (bersama-sama merupakan asam pteroievuyu);
• glutamat.

Berat molekul asam folat - 441. Asam folat aktif dalam bentuk turunan asam tetrahydrofolic. Kandungan asam folat dalam bentuk yang berbeda dalam tubuh manusia adalah sekitar 5-10 mg. Saham melanggar masuk ke dalam tubuh dapat habis lebih 4 bulan.

Kebutuhan harian asam folat adalah 100-200 mikrogram, Kehamilan, anemia hemolitik, meningkatkan berkali-kali.

Jumlah total asam folat dalam diet dengan kekuatan penuh 500-600 mikrogram per hari. Folat - folat terkandung dalam jumlah yang cukup di hati, ragi, bayam, daging. Lebih 50 % asam folat, dalam makanan, Hal ini dapat hancur saat dimasak.

Asam folat diserap dalam usus kecil bagian atas. Kemampuan usus untuk menyerap asam folat jauh lebih tinggi dari kebutuhan sehari-hari.

Asam folat berpartisipasi dalam sintesis pirimidin dan purin basa, bersama dengan methylcobalamin - sintesis uridinmonofosfata timidinm nofosfata. Koenzim folat Lebih terlibat dalam sejumlah reaksi. Khususnya, tetrahydrofolate berpartisipasi dalam sintesis histidin asam glutamat.

Etiologi dan patogenesis anemia defisiensi asam folat selama

Kekurangan asam folat, serta defisit cobalamin, Ini mengarah pada pengembangan anemia megaloblastik.

Malabsorpsi folat diamati pada individu, reseksi usus kecil, terutama jejunum, serta dalam jangka panjang mengambil antikonvulsan seperti diphenylhydantoin (difenina) dan fenobarbital (luminal). Asupan asam folat yang rusak ketika penyakit sariawan dan celiac. Kekurangan asam folat, serta defisit cobalamin, diamati pada sindrom blind loop. Dijelaskan kasus yang jarang terjadi gangguan herediter transportasi asam folat di dinding usus dan masuk ke cairan cerebrospinal. Penyerapan zat lain tanpa menderita.

Kekurangan asam folat pada bayi baru lahir diamati pada prematuritas, pelanggaran penyerapan usus, susu makan kambing, mengandung sejumlah kecil asam folat.

Sebuah malabsorpsi signifikan asam folat dapat terjadi pada pasien, pecandu alkohol.

Peningkatan konsumsi asam folat selama kehamilan Hal ini dapat menyebabkan kekurangan asam folat, Namun, di negara-negara maju saat ini sangat jarang. Kekurangan asam folat pada wanita hamil ditemukan dalam daya rendah, kehadiran anemia hemolitik, gunakan sebelum kehamilan sejumlah besar minuman beralkohol.

Manifestasi klinis dari defisiensi folat

Kekurangan asam folat pada anak-anak dan wanita muda. Pada saat yang sama, pasien mengeluh kelemahan umum, pusing. Tidak seperti defisiensi cobalamin lidah sakit jarang diamati. Parestesia, dan tanda-tanda lain dari funicular myelosis hilang. Sclera sering ikterichnost.

Berbeda dengan defisit defisiensi cobalamin asam folat adalah gistaminoupornaya jarang diamati Akhil, gastratrophia, meskipun penurunan sekresi lambung sering.

Kekurangan folat, serta untuk kekurangan cobalamin, ditandai dengan munculnya di makrositosis darah perifer, megalocitov dan megaloblas, adanya anemia hiperkromik, mengurangi jumlah retikulosit, trombosit dan leukopenia dengan pergeseran neutrophilic ke kiri dan kanan. Di sumsum tulang - megaloblas.

Perubahan sistem saraf yang berbeda dari manifestasi di B₁₂-anemia defisiensi.

Terbukti, bahwa orang-orang dengan epilepsi, Kekurangan asam folat menyebabkan serangan sering, untuk keparahan mereka yang lebih besar. Hal ini sangat penting karena fakta, bahwa mengambil antikonvulsan dapat menyebabkan malabsorpsi folat. Menurut literatur, pada individu dengan defisiensi skizofrenia asam folat menyebabkan memburuknya penyakit, gejala yang lebih parah dan pengobatan kurang efektif.

Diagnosis defisiensi cobalamin dan asam folat

Untuk diagnosis defisiensi cobalamin dan asam folat digunakan Metode radioimmunoassay untuk penentuan asam folat dalam serum dan khususnya di eritrosit. Isi cobalamin ditentukan dengan metode mikrobiologi. Sebagai organisme uji yang digunakan sebagai Streptococcus faecalis dan Lactobacillis casei. Biasanya, kandungan asam folat dalam rentang serum darah, Menurut penulis, menggunakan metode penelitian yang berbeda, dari 3 untuk 25 ng / ml, dan eritrosit - dari 100 untuk 425 ng / ml.

Defisiensi asam folat menurun sebagai tingkat serum, dan di eritrosit. Pada defisiensi kolabaminov konten asam folat dalam serum darah sering meningkat, dan eritrosit kadang-kadang dapat dikurangi, meskipun penurunan, biasanya, kecil.

Untuk diagnosis defisiensi asam folat juga digunakan Metode beban histidin (15 g), kemudian menentukan kandungan asam dalam urin formiminglutaminovoy. Biasanya, sebagian besar bentuk histidin asam glutamat. Dengan output urin 1-18 mg asam formiminglutaminovoy. Pada defisiensi asam folat untuk 8 jam setelah diperkenalkan ke dalam tubuh dilepaskan dari urin 20 untuk 1500 Asam formiminglutaminovoy mg. Sejumlah besar asam formiminglutaminovoy diekskresikan dalam urin setelah pemberian histidin pada orang, diobati dengan methotrexate. Pada defisiensi cobalamin, sirosis hati ekskresi asam meningkatkan formiminglutaminovoy, pada tingkat lebih rendah, daripada dengan defisit asam folat. Tingkat normal urin methylmalonic meningkat kandungan asam formiminglutaminovoy histidin asam setelah menerima bukti kekurangan asam folat, bukannya cobalamin.

Ini membantu untuk membedakan kedua negara dan studi radionuklida. Pada defisiensi cobalamin, terkait dengan pelanggaran sekresi faktor intrinsik, gangguan penyerapan berlabel sianokobalamin, kekurangan asam folat, diserap dengan baik.

Pada defisiensi asam folat, diperkenalkan ke dalam tubuh mengarah ke konten yang lebih tinggi dari retikulosit, sedangkan injeksi sianokobalamin (derivatif) tidak efektif. Folat defisiensi asam methylcobalamin meningkatkan tingkat retikulosit.

Mendefinisikan neutrofil Indeks segmentasi

Menghitung jumlah neutrofil, dengan 4 segmen dan lebih (Total 200 sel). Menentukan persentase sel, dengan 5 segmen dan lebih relatif terhadap jumlah sel, dengan 4 ruas. Indeks ditentukan oleh rumus:

IS =(KS (5 dan lagi))/KS(4);

di mana IC - segmentasi Indeks;

KS (5 dan lagi) - Jumlah neutrofil tersegmentasi (di 200 sel), di mana jumlah segmen sama dengan 5 atau lebih;

KS (4) - Jumlah neutrofil tersegmentasi, di mana jumlah segmen sama dengan 4.

Biasanya, rentang indeks ini 2,5 untuk 25 %. Dimana, ketika melebihi 30 % (osilasi 120%), Anda dapat berbicara tentang neutrofil hipersegmentasi. Ini diamati kekurangan asam folat, metilkoʙalamina, dan uremia.

Penentuan asam methylmalonic dalam urin oleh Giordio dan Plaud

Reagen.

1. Resin pertukaran ion Dowex-Zx4 (bentuk klorida, 200-400 Mesh). Resin dicuci dengan lima volume air suling 3 kali, diskors dalam dua volume air suling dan disimpan dalam sebuah piring gelap pada suhu 4 ° C.

2. Sebuah solusi dari para-nitroaniline 0,075 % dibuat dengan melarutkan 37,5 reagen mg 500 ml 0,2 Solusi M asam klorida. Simpan di panci gelap, Ini tetap stabil selama beberapa bulan pada suhu kamar.

3.Penyangga asetat (pH 4,3) terbuat dari 1 M natrium asetat dan 1 Solusi M asam asetat.

4.Diazoreaktiv: 4 ml 0,5 % larutan natrium nitrat dicampur dengan 15 ml para-nitroaniline. Campuran ditempatkan dalam lemari es pada suhu 4 ° C dan solusi didinginkan ditambahkan 4 ml 0,2 M natrium asetat. Stabil reagen pada suhu 4 ° C selama satu hari.

5.Normal 0,05 Solusi M asam methylmalonic: 295 asam methylmalonic mg dilarutkan dalam 50 ml air.

Metode

Urin dikumpulkan ke dalam botol kaca dan beku sampai penelitian. Untuk mempelajari bagian biaya urin (20- 25 ml), dicairkan, tsentrifugiruyut, dan supernatan dikumpulkan dengan menggunakan larutan lemah natrium hidroksida atau asam klorida untuk mengatur pH 6,5.

Kolom tinggi kromatografi 20 cm dan diameter 1 cm diisi dengan resin Dowex-Zx4. Lapisan resin harus dalam 3 cm. Dilewatkan melalui resin 5 ml urin, dicuci dengan air suling (2 × 50 ml pada tingkat tidak lebih dari 15 ml 1 dari). Asam methylmalonic dapat èlûirovana dari resin 20 ml 0,1 Solusi M asam klorida. Lebih lanjut 2 ml eluate dicampur dengan 3 ml 1 PH buffer M asetat 4,3 in vitro dengan tutupnya gesekan, (15×2cm). Untuk campuran Tambahkan 3 ml dingin-diazoreaktiva, Ketika pH naik ke 4,0. Campuran direfluk dalam penangas air pada suhu 94 ° C. 3 min dan menambahkan 2 ml 3 Larutan M caustic soda. Kemudian tabung dihapus dari mandi air, buta stopper dan campuran isi. Campuran didinginkan pada suhu kamar 10 ranjau dan fotometriruût ketika 620 NM dalam sumur dengan panjang jalan optik 1 cm.

Sebagai kontrol, campuran, yang terdiri dari 2 ml 0,1 Solusi M asam klorida, 3 ml dan diazoreaktiva 3 ml buffer asetat. Larutan standar asam methylmalonic terdiri dari komponen yang sama dan 0,02 ml 0,05 Solusi M asam methylmalonic. Absorbansi solusi ini diukur dalam kondisi yang sama.

Kadar asam methylmalonic (mg) per satuan volume urin (1 l) didefinisikan oleh rumus:

(AKU S_Contoh-AKU S_kontrol)/(AKU S_standar-AKU S_kontrol)*SEBUAH*((1000*T)/M)

di mana E - absorbansi berbagai sampel;

A - jumlah asam methylmalonic dalam tabung uji standar, ml;

1000 - Jumlah urin, diambil untuk penelitian, ml;

T - jumlah asam klorida, diambil untuk elusi, ml;

M - jumlah eluat yang, diambil untuk penelitian, ml.

Berdasarkan kondisi di atas, formula dapat disederhanakan sebagai berikut::

(AKU S_Contoh-AKU S_kontrol)/(AKU S_standar-AKU S_kontrol)*236

Dimana, ketika jumlah asam methylmalonic dalam urin lebih besar dari 300 mg / l, harus kembali dicampur dengan buffer asetat eluat dan diazoreaktivom, melainkan 2 ml eluat adalah bijaksana untuk mengambil 4- 10 kali lebih rendah dan membawa volume untuk 2 ml 0,1 M larutan asam klorida. Perhitungan harus memperhitungkan dilusi.

Biasanya per hari dengan output urine 0,6-4,7 mg asam methylmalonic. Pada defisiensi cobalamin ekskresi harian mencapai asam methylmalonic 294 mg. Biasanya, penerimaan 10 g valin tidak meningkatkan clearance asam methylmalonic, defisiensi cobalamin meningkatkan ekskresi asam methylmalonic.

Penentuan asam methylmalonic dalam urin oleh Green

Reagen.

1. Eter.
2. Etanol.
3. Suatu larutan asam klorida 0,1 M.
4. Amonium sulfat.
5. Resin dasar yang kuat deatsidit FF (200 bertautan, bentuk klorida).
6. Suatu larutan natrium nitrat 0,5 % (Berat / volume).
7. Sebuah solusi dari para-nitroaniline (750 mg dilarutkan dalam 1 l 0,2 Solusi M asam klorida).
8. Natrium asetat 0,2 M.
9. Penyangga asetat 1 M, pH 4,3: campur 1 M larutan natrium asetat dan 1 Solusi M asam asetat dalam rasio 16,35:33,9.
10. Larutan natrium hidroksida 3 M.

SEBUAH. Larutan standar asam methylmalonic: 100 mg dilarutkan dalam 100 ml air, disimpan di lemari es.

B. Bekerja asam methylmalonic standar: larutan standar diencerkan dalam 20 waktu 0,1 M larutan asam klorida (1 mL standar dan 19 ml asam klorida). Jumlah ini setara asam methylmalonic 100 Asam methylmalonic mg 1 kondisi pengujian l urine.

Untuk persiapan campuran diazoreaktiva 4 ml 0,5 % nitrat dan natrium 15 ml para-nitroaniline. Campuran ditempatkan dalam penangas es dan tambahkan 4 ml 0,2 M natrium asetat.

Metode.

Urine dikumpulkan selama satu hari, diukur volume dan 10 ml podkislyayut 1 M larutan asam sulfat ke pH 2,0 atau sedikit di bawah. Amonium sulfat ditambahkan ke saturasi. Campuran ditempatkan dalam corong pemisah dan diekstraksi tiga kali dengan eter dan etanol dalam rasio 3:1. Untuk mencegah pembentukan campuran emulsi ekstraktan digunakan secara berlebihan.

Ekstrak dilewatkan melalui kromatografi kolom kecil (1 – 1,5 diameter cm), selesai 5 resin ml. Kolom dicuci 50 ml air suling. Asam methylmalonic dielusi 0,1 M larutan asam klorida. Setelah elusi yang dipilih 2 ml eluat, W ditambahkan ml buffer asetat, dan 3 ml diazoreaktiva.

Setelah pencampuran, tabung ditempatkan dalam bak air pada suhu 95 ° C 3 m. Kemudian ditambahkan 2 ml 3 M natrium hidroksida dan sekali tabung tertutup stopper untuk meminimalkan kontak dengan udara. Setelah pendinginan, absorbansi diukur pada panjang gelombang 620 mereka. Untuk kosong daripada menggunakan eluat yang 2 ml 0,1 Solusi M asam klorida, dan untuk solusi standar - 2 ml standar kerja.