Diagnózis immunológiailag okozott meddőség

Egy hosszú házas élet használata nélkül a fogamzásgátlók, és jelenlétében a mikro-régió a nyálkahártyák, a nemi szervek is előfordulhat fokozatosan helyszínen immunizálás antigének spermiumok. A fizikális vizsgálat a házastársak, amely egy kietlen házasság, nem tudja meghatározni a meddőség oka 10-15 % esetek. Ez az a csoport, terméketlen házastársak alkalmazása során különös vizsgálati módszerek titkos méhnyakcsatorna, sperma plazma és szérum sperma antitestek gyakran észlelt (ASAT), Használja minőségi és mennyiségi vizsgálatok az immunológiai kutatás.

Postkoytalnыy teszt (FCT)

Postkoytalnыy teszt (FCT) Arra utal, hogy minőségi immunoassay. A negatív vizsgálati eredmény azt jelzi hiányában a sperma a méhnyak csatorna titkos, de nem tudja azonosítani az oka a hiányuk.

Módszer. Száma mozgékony spermiumok a méhnyakon titok, után kapott coitus, mértékének megállapítását azok megsértik a áthatoló képessége a meddőség vagy a mentesség nekik váladék a méhnyakon.

FCT szükséges elvégezni a következő feltételek: A tanulmányt kell végezni az időszak a peteérés, amely feltárta colpocytologic vagy más eljárás, folytatott előzetes absztinencia házastársak 2-3 napon belül.

A módszer a. A szokásos coitus egy nő 30 perc feküdjön a hátára, hajlító térded. Douching és tisztítása tilos, kell csak egészségügyi betét, amely során eltávolított elfogása a tanulmány a váladék a méhnyakon. 2-4 óra után, megengedett és után 6-10 óra (idő, Az összecsapás előtt a tanulmány, megadni az analitikai) közösülés után méhnyak kitéve egy tükör segítségével Cuzco és endocervikális váladék szívó vagy tuberkulin fecskendő (tű nélkül), pipettával egy gumi izzó, vagy polietilén katétert.

Ha a tisztításhoz a készülék nem használható fertőtlenítőszerek, mivel az befolyásolhatja a spermiumok mozgékonyságát. Egy csepp a kapott nyálka a nyaki csatorna átvisszük egy melegítjük tárgylemezre, bevonatos fedőlemezes, Terület kenni folyékony paraffin szivárogni. Megfogalmazás azonnal mikroskopiruyut (szemlencse 7X, 40x objektív), meghatározására száma és jellege a spermiumok mozgékonyságát. A gyógyszer lehet kimutatni aktív sperma progresszív motilitás, oszciilálómozgás (A jelenség a swing) és rögzített.

Elfogadott nyújt ötféle következtetéseket FCT.

• Kiváló (vonatkozó normák): öt látómezőben akár 15-20 aktív spermiumok progresszív mobilitás és több. Spermiumot a jelenség a oszcilláció kevesebb, mint 25 %.
• Kielégítő: öt látómezőben fel 10 aktív spermiumok progresszív mobilitás és kevesebb 25 % spermiumot a jelenség a swing.
• Szegény: Kevésbé 5 ondósejtek öt látómezőben.
• Mínusz: hiányában spermium.
• Kétes: Öt területen részletek 5 aktív mozgékony spermiumok és több 25 % A jelenség a swing.

Amikor az ötödik típusú FCT Gyakran megfigyelhető immunrendszer közötti összeférhetetlenség házastársak, Ezért meg kell határozni az ACAT. Azonosítani ACAT titkos endocervikális, plazma, sperma vagy vérszérum és megjeleníti őket (agglutináció vagy rögzített) Ez előírja, hogy kinevezését mennyiségi immunesszék.

A negatív PBC tanulmányokat kezdeni meghatározását benyúlni (áthatolás) képes-e a spermiumok keresztül behatoló teszt (Pén) és fogékonyság spermium váladék a méhnyakon egy vizsgálati kapcsolati sperma és méhnyaknyák (TKSTSS).

Penetracionnyj teszt (TP)

A vékony kapilláris hossza 10 Lásd gépelt ovuláció alatt váladék a méhnyakon. Az egyik nyitott vége a kapilláris bezárul agyag, és a második kerül egy kémcsőbe egy teszt friss ejakulátum (nem több 3 óra után ejakuláció). Agyaggal a kapilláris csatlakozik a függőleges cső. A mintát inkubáljuk egy termosztát hőmérsékleten 37 ° C. 1 nem. A minősége a ejakulátum bírálják el a behatolási mélységét sperma a nyálka a nyaki csatorna. Három típusa van az üvegházhatást okozó gázok.

• Igenlő - A behatolási mélység (A legnagyobb távolság centiméterben, utazott legalább egyetlen spermiumot) felett 5 cm; A spermiumok számát a pont maximális behatolási több 5 a láthatáron, és a szám a motilis spermiumok a felső harmadában a kapilláris nagyobb, mint 50 %.
• Kétes - Egy behatolás mélysége legfeljebb 5 Kevesebb spermaszám 5, mobilitásuk felső harmadában a kapilláris folyásánál 50%.
• Mínusz - A behatolás mélysége a sperma eléri 1 cm.

Az a képesség, a sperma penetráció Ez attól függ, a fázis a menstruációs ciklus. Ő kezd kialakulni a 9. napon a menstruációs ciklus,, fokozatosan aktiválása, eléri a maximális expressziója az időszakban a peteérés, tartott ezen a szinten két napig, majd fokozatosan csökken.

Teszt kapcsolati sperma és méhnyaknyák (TKSTSS)

A dia kerül egy kis csepp váladék a méhnyakon, vett nők a peteérés, és számos azonos méretű csepp ejakulátum. Mindkét csepp borított fedél üveg, ami egy kicsit nyomva, csatlakozott egy csepp. A gyógyszer kerül egy nedves kamrába (Petri-csészébe, nedves vattapamaccsal) és inkubáljuk egy termosztát hőmérsékleten 37 ° C. 1 nem.

Ilyen körülmények között normális spermium behatol a titka a szokásos méhnyakcsatorna, Amint az látható a mikroszkóp alatt nagyításban 200X. Számoltatni a reakció közel a határ két média megszámolja, behatol a titka a méhnyakon spermium két szomszédos látómezőben.

A kiváló TKSTSS két látómezőben többet mutat 25 élénken mozgékony hímivarsejtek a jelenség a swing kevesebb 25 %. Ha kielégítő TKSTSS két látómezőben kiderült, több 15 élénken mozgékony hímivarsejtek, TKSTSS alacsony - kevesebb, mint 15. A negatív hiányzik penetráció TKSTSS, ha megkérdőjelezhető - egy jelenség oszcilláció meghaladja 25 %.

Ebben a tesztben, mint a PCT, A jelenség a swing, meghaladó 25 %, valószínű, Ez jelzi a jelenlétét ACAT és előírja a kinevezését mennyiségi immunesszék.

Spermát felhasználva és a méhnyak váladék csatorna terméketlen és termékeny férfiak különböző összegek felhasználásával TKSTSS azonosítani terméketlen férje.

• Példa 1. Hozott egy titkos csatorna a méhnyak a nők meddő pároknak és ellenőrzési ejakulátum egészséges férfi. Kiváló TKSTSS jelzi gyenge penetrációs képessége a sperma a férje, és a fogékonyság a normális váladék a méhnyakon.
• Példa 2. Teljes körűen titka a méhnyakon egészséges nő és férje ejakulátum, a meddő párok. Bad TKSTSS jelzi gyenge penetrációja spermium.
• Példa 3. Hozott titkos endocervikális nők meddő pároknak és ellenőrzési ejakulátum egészséges férfi. Bad TKSTSS jelzi kisebbrendűségi titkos méhnyakon, ami nyilvánvalóan nem hatolnak normális spermiumok.

Mennyiségi immunológiai vizsgálatok

Mikroagglyutinatsionny teszt Friberg

Mikroagglyutinatsionny teszt Friberg (TF) eléggé érzékeny, és rendelkezésre áll a klinikai diagnosztikai laboratóriumok. TF tudja határozni a jelenlétét az ACAT és agglutinációs titert mutat különböző anyagokat (plazma ejakulátum, kivonatok nyálka a méhnyakon és a szérum mindkét házastárs).

Reagensek:

1. Foszfát pufferolt sóoldat (FSB) 0,01 М pH 7,2-7,4.

2. Vazelinovoe olaj.

Berendezések: mikroszkóp, tuberkulin fecskendő, mikroagglyutinatsionnye pipettával 1 ml, mikropipettát kapacitás 0,1 ml.

Módszer. Vérvizsgálat szérum inaktiválja inkubációs egy inkubátorban 56 ° C. 30 m. Lövell, nyert maszturbáció, azonnal hígítjuk, hogy az FSB, koncentrációjának sperma 40 millió. -ban 1 ml.

Mivel az anyag (plazma ejakulátum, kivonat a titka a méhnyakon vagy a szérum) készül egy sor hígítást 1:4 hogy 1:128 használ, mint egy folyékony hígító FSB. Wells paraffinolajjal mikroagglyutinatsionnyh planchette tuberkulin fecskendő tűt bevezetik (alatt vazelinovoe olaj) Kis csepp minden egyes hígítási a vizsgált anyag. Miután minden egyes mintát négyszer mostuk a fecskendő. Minden hígítást adunk a 5 szor kisebb csepp ejakulátum, és 4 órán át szobahőmérsékleten keverjük észlelt agglutinációk. Utolsó tenyésztés, miáltal a mikroszkóp alatt a 100X nagyítású észlelt 3 agglutinátum felül kell vizsgálni és tovább, agglutinációs titer megfelel ACAT.

Spermoimmobilizuyuschy teszt Izodzhima (SIT).

Titrálunk rögzítőszer ACAT szérum, plazma vagy sperma kivonat titkos méhnyakon van beállítva száma motilis spermiumok jelenlétében antigének (sperma).

Alkatrészek.

1. Lövell, amely előállított és hasonlóan állítjuk elő, TF segítségével FSB; mozgékonyságát haladja 70 %.

2. Komplementsoderzhaschaya szérum tengerimalacok.

3. Immun humán szérum (IChS), így a komplement jelenlétében keresztül 1 órás inkubáció immobilizáció 90 % sperma.

4. Normál humán szérum (NCHS), melegítve inaktiválódik hőmérsékleten 56 ° C. 30 m.

5. Teszt inaktivált szérum, plazma és sperma kivonat titkos méhnyakon.

Módszer. Értékelni komplement aktivitás befagyasztásával 1. csövet vezetünk 0,5 ml izotóniás nátrium-klorid-oldat, hogy meghatározzák a változások a sperma motilitás nélkül ASAT, a 2. kémcsőbe - 0,5 ml NHS, kontroll kivontak a harmadik cső - 0,5 ml ICHS és meghatározza az ACAT immobilizálását a 4. cső - 0,5 ml szérum, vagy plazma az ejakulátum, kivonat vagy kiválasztás endocervikális.

Ezután minden csövet által bevezetett 0,1 ml kiegészítője. Az utolsó dolog, hogy az összes csövet adunk 0,05 ml sperma szuszpenzió koncentrációja 40 millió. -ban 1 ml. Állvány csöveket inkubátorba helyezzük hőmérsékleten 37 ° C-on 1 nem. A csöveket kivesszük a kemencéből, és óvatosan rázzuk, hogy tükrözze az állandó agglutinált sperma.

Az eredmények értékelésére nagy nagyítás alatt a mikroszkóp (400x) számított százalékos motilis spermiumok egy csepp a kémcső, letétbe tárgylemezre és borított fedél. Hasonlóképpen, ez határozza meg a százalékos motilis spermiumok a cseppekben a kémcsövek az NHS és a ICHS. Az eredmény a reakció által figyelembe képletű

SIT = K / A

ahol K - száma motilis spermiumok a kontroll a ICHS és az NHS;

Mintegy - száma motilis spermiumok egy kémcsőben (szérum-teszt, vagy plazma az ejakulátum, vagy a titka a méhnyakon).

Átlagos SIT<2 a teszt negatív (számú motilis spermiumok a kontroll és a vizsgálati csövekbe körülbelül azonos), Ha az index CTI>2 - A teszt pozitív, t. ez. az anyagban (szérum, plazma vagy az ondó kivonat titkos méhnyakon) mozgásképtelen ACAT.

• Példa 1. Földi irányító a ICHS - 10 % mozgékony hímivarsejtek. A második ellenőrzés a NHS - 80% mozgékony hímivarsejtek. A két vezérlés együtt - 90 % mozgékony hímivarsejtek. A kémcsőben - 80 % mozgékony hímivarsejtek.

SIT = R / D = 90/80 = 1,1

A vizsgálat eredménye negatív, rögzített ACAT hiányzik.

• Példa 2. A kémcsőben - 40 % mozgékony hímivarsejtek, Azonban a kontroll, példa 1.

KN = 90/40 = 2,2

A teszt pozitív. Van immobilizált ellenanyagot (ASAT), amelyen keresztül a spermiumok mozgékonyságát jelentősen csökkent.