शुक्राणु के मात्रात्मक और गुणात्मक विशेषताओं की परिभाषा
शुक्राणु गतिशीलता का निर्धारण
शुक्राणु गतिशीलता का दृढ़ संकल्प एक आवश्यक पैरामीटर है, बोल पड़ना की गुणवत्ता निस्र्पक. शुक्राणु, fertilisation के लिए सक्षम, गतिशीलता है -कमिट सीधा गति के साथ गति 50 µm/s. बोल पड़ना में पाया जा सकता है शुक्राणु गतिशीलता बिगड़ा diskinospermiej oscillating के रूप में, dressage और यातायात के अन्य प्रकार, कि आम तौर पर नहीं.
बोल पड़ना की देशी उत्पाद में शुक्राणु गतिशीलता दृष्टि के एक सीमित क्षेत्र के साथ (विंडो Fonio का उपयोग), ऐपिस और लेंस 7 x 40 x का उपयोग कर, जब poluopuŝennom संघनित्र. गिनती 100 सेल, नोट: जंगम के उन के बीच की संख्या, गतिहीन और स्थिर शुक्राणु. 80-90 तक ठीक शुक्राणु सक्रिय रूप से आगे बढ़ कर %, 10-12 आसीन है, अभी भी — 6 — 10 %. केवल उन सक्रिय रूप से चलती है और गतिहीन शुक्राणु ध्यान में लेता है, जो translational मोशन प्रतिबद्ध.
आप अधिक विस्तृत बिंदु रेटिंग स्केल मूल्यांकन का उपयोग कर सकते हैं:
- «4» एक उत्कृष्ट गतिशीलता है (सभी शुक्राणुजन महत्वपूर्ण गति के साथ एक सीधे आगे गतिशीलता है);
- «3» एक अच्छा गतिशीलता है (कई कम);
- "2" एक औसत कारोबार गतिशीलता है (शुक्राणु का एक बहुत अभी भी, लेकिन साथ हिल पूंछ);
- "1"-बुरा गतिशीलता (गति की कमी, केवल शुक्राणु पूंछ की गतिशीलता);
- '0' शुक्राणु का कोई आंदोलन याद आ रही है.
बोल पड़ना की प्रजनन क्षमता शुक्राणु गतिशीलता की अवधि पर निर्भर करता है, इसलिए यह शुक्राणु गतिशीलता Dynamics में निर्धारित करने के लिए आवश्यक है (गतिशील kinezisgramma).
ड्रॉप बोल पड़ना एक coverslip पर डाल दिया, यह फ्लिप और बूँदें तो फांसी के लिए lunočkoj के साथ एक स्लाइड पर डाल, उस ड्रॉप एक मजबूत बनाने के केंद्र में था. किनारे कवर ग्लास गंदा तरल पैराफिन के साथ और माइक्रोस्कोप के अंतर्गत निर्धारित प्रतिशत सक्रिय रूप से हिलाने की, गतिहीन और स्थिर शुक्राणुजन के माध्यम से 1, 3, 6, 12 और 24 स्खलन के बाद घंटे. कमरे के तापमान पर शोध किया गया है. आम तौर पर, हर 2-3 एच सक्रिय रूप से गतिशील शुक्राणु की संख्या घट जाती है 20 % ,
- ध्यान दें. बोल पड़ना की सूक्ष्म परीक्षा एक प्रयोगशाला में एक व्यक्ति द्वारा बाहर किया जाना चाहिए, जो प्रयोगशाला निदान के क्षेत्र में पर्याप्त अनुभव था, विभिन्न शोधकर्ताओं द्वारा शुक्राणु गतिशीलता के परिणाम के रूप में अलग-अलग ± 40 % और काफी हद तक èâkulâtom के साथ अनुभव पर निर्भर.
"शुक्राणु के नमूने पर पुनः सशक्त"
"शुक्राणु के नमूने पर पुनः सशक्त" अभी भी गतिशीलता की रिकवरी पर आधारित, लेकिन जीवित शुक्राणु प्रोत्साहन समाधान का उपयोग कर:
1) समाधान बेकर (ग्लूकोज- 3 जी, पर2HPO4 - 0,6 जी, NaCl- 0,2 जी, के. एच.2पीओ4 -0.01 जी, आसुत जल के लिए 100 मिलीलीटर; पीएच- 7,8);
2) 0,1 % कैफीन का समाधान (न केवल में सील!) - 10 % बोल पड़ना की मात्रा का;
3) 0,1 Arginine के M समाधान.
विधि. पिपेट क्षमता को मापना 1 एमएल nasasyvaût 0,1 बोल पड़ना की मिलीलीटर (अच्छा मिश्रित) और इस एक ही पिपेट पाने 0,9 एमएल उत्प्रेरक समाधान. पिपेट की सामग्री पुश घंटे कांच टिप, घंटे के कांच पर बार-बार उड़ाने और चूषण तरल पदार्थ द्वारा अच्छा मिश्रण, और उसके बाद फांसी बूँदें कुक दवाओं. 5-के माध्यम से 10 खान अभी भी, लेकिन जीवित शुक्राणु कोशिकाओं के ले जाने के लिए शुरू.
गतिशील शुक्राणु का प्रतिशत गतिशीलता तुरंत पुनर्स्थापित करते समय निर्धारित करें और बाद में 3, 6, 12 और 24 नहीं. अधिक सटीक परिणाम के लिए, दो उत्तेजक समाधान के साथ एक समानांतर परीक्षण का आयोजन. केवल जब "स्थिर शुक्राणु को पुनर्जीवित करने के लिए" अक्षमता nekrospermii के बारे में बात कर सकते हैं.
लाइव शुक्राणुजन निश्चित के बीच की पहचान
विधि के सिद्धांत पर आधारित है, क्या एंजाइमों के रहते शुक्राणुजन Blanch eosin. अभिकर्मकों के रूप में इस्तेमाल किया 5 % पोटेशियम के जलीय घोल eosin और 10 % nigrozina जलीय घोल.
विधि. स्लाइड पर एक छोटा सा थपका बोल पड़ना की डाल, अगला दो बार ड्रॉप डाल 5 % eosin समाधान पोटेशियम और ड्रॉप 10 % समाधान nigrozina, जो भी दो बार eosin है पोटेशियम की बूँदें. पहले बोल पड़ना पोटेशियम eosin के साथ मिश्रित है, कुछ सेकंड प्रतीक्षा करें, और उसके बाद पुआल nigrozina के साथ मिश्रित, फिर से, कुछ सेकंड रुको और पतली स्मीयरों सार्थक ग्लास ब्रश बनाने.
Immersionnuû माइक्रोस्कोप प्रणाली का उपयोग कर, स्मीयरों गिनती कम से कम नहीं 200 शुक्राणु, आवंटन के रहने वाले (बेरंग) और मृत (लाल रंग में eosin के साथ चित्रित). जीवित और मृत शुक्राणुजन, प्रतिशत में व्यक्त की संख्या. Nigrozina के अभाव में भूसे के साथ मिश्रित वीर्य की एक बूंद 5 % eosin समाधान पोटेशियम और पतली स्मीयरों माइक्रोस्कोपी के लिए तैयार. Nigrozin पृष्ठभूमि केवल दवा colorizes, जहां शुक्राणु अधिक कन्ट्रास्ट आवंटित किए जाते हैं. 80-90 तक सामान्य रहने वाले शुक्राणु बनाने % की कुल संख्या का.
शुक्राणुओं की संख्या 1 ML और भर में बोल पड़ना की मात्रा
में शुक्राणु की संख्या 1 ML और भर में बोल पड़ना लेखा चैम्बर Gorâeva में गणना की जाती है.
सभी बोल पड़ना में शुक्राणु की संख्या में शुक्राणु की संख्या multiplying द्वारा निर्धारित 1 एमएल बोल पड़ना की संख्या (मिलीलीटर में).
- ध्यान दें. गणनीय चैंबर भी गतिशील शुक्राणु की संख्या निर्धारित कर सकते हैं, क्यों बोल पड़ना चाहिए सोडियम hloridz के गर्म izotoniceski समाधान पतला और स्थिर शुक्राणु की संख्या की गणना, और फिर उन्हें की कुल संख्या से घटाना.
आम तौर पर, में 1 बोल पड़ना की मिलीलीटर 60-120 मिलियन शामिल हैं. शुक्राणु, जब giperspermii अधिक है 120 दस लाख।, जब oligospermia — से 30 को 60 दस लाख।, क्या, आमतौर पर, निषेचन असंभव बना देता है. हालांकि, मामलों, जब निषेचन होता है और में 1 से बोल पड़ना की मिलीलीटर 5 को 30 दस लाख. शुक्राणु.
किसी भी मामले में, जब oligospermia पहचान 3-4 सप्ताह की अपनी अधिकतम संख्या की स्थापना के समय अंतराल में शुक्राणु की संख्या गिनती की 2-3 नियंत्रण की आवश्यकता है. एक ही पुरुष के शुक्राणुओं महत्वपूर्ण शारीरिक उतार-चढ़ाव के अधीन है.
ठीक है भर में बोल पड़ना और अधिक शामिल हैं 150 दस लाख. शुक्राणु.
Spermatogrammy की गिनती
शुक्राणुजन के विभिन्न मोर्फोलिजिकल रूपों और spermatogenesis की कोशिकाओं का प्रतिशत Spermatogramma है.
बायोप्सी में, hematoxylin या Pappengejmu के साथ रंग का, कम से कम मायने रखता है 200 शुक्राणु, के रोग और सामान्य रूपों की संख्या, spermatogenesis की कोशिकाओं और साथ ही एक प्रतिशत के रूप में व्यक्त किया है. गिनती है किया विसर्जन माइक्रोस्कोप प्रणालियों और मशीनों का उपयोग कर परिवर्तित नाम कुंजी के साथ leukogram की गिनती के लिए.
80-85 तक शुक्राणु की सामान्य प्रपत्र में एक सामान्य बोल पड़ना कर %, कभी कभी 100 %, ये शारीरिक वेरिएंट शामिल हैं, विशेषता द्वारा या असामान्य रूप से लोहे का दस्ताना, या कम, या बढ़ी हुई सिर.
युवा, या अपरिपक्व, शुक्राणु के रूप हैं सिर और गर्दन कोशिका द्रव के शेष के आसपास ("कॉलर"), लगातार संभोग कर रहे हैं और खाद के लिए सक्षम नहीं.
शुक्राणु के पुराने रूपों (giperhromiâ, ahromiâ, vakuolizaciâ सिर) में बोल पड़ना करने के बाद लंबे समय तक संयम और निषेचन के लिए उपयुक्त नहीं दिखाई देते हैं.
शुक्राणु के सिर की विकृति के साथ करने के लिए रोग रूपों में शामिल हैं: megalospermatozoidy (gigantospermatozoidy), मैक्रो-, mikrospermatozoidy, पतला, एक गर्दन और एक पूंछ के साथ दो-सिरों वाले शुक्राणु, एक या अधिक पूंछ के साथ गर्दन, एक पूंछ के बिना, एक पूंछ के साथ एक सिर आदि के बिना.
सामान्य बोल पड़ना शुक्राणु हैं नहीं आमतौर पर स्वस्थ पुरुषों में प्रपत्र रोग से मिलने., लेकिन कभी-कभी बोल पड़ना की सामान्य क्षमता fertilizing के दौरान उनकी संख्या तक पहुँच सकते हैं 20 %, इनमें से, लगभग 15 % सिर की विकृति है, 3-5 % -शरीर, 2-5 % -पूंछ.
रोग spermatogenesis, बंध्यता शुक्राणु का स्रावी रूप हैं सिर और गर्दन की विकृति के साथ की पहचान की. पूंछ की विकृति आम तौर पर èkskretornogo उत्पत्ति, तब होती है जब शुक्राणु semâvynosâŝim पथ पर गुजरता है.
दाग की तैयारी में, स्पष्ट रूप से दिखाई भी अलग-अलग germinativnye कोशिकाओं भेदभाव और परिपक्वता के विभिन्न चरणों में स्थित, कि भेदभाव और कम शुक्राणु गिनती और लाल किताब लाल किताब के लिए आवश्यक है.
Spermatogonii एक दौर है, कभी कभी एक अंडाकार आकार, उनके व्यास 5-12 सुक्ष्ममापी है. कर्नेल कक्षों की लगभग एक तिहाई लेता है, अंधेरा- या svetlookrašennoe, 1-2-3 के साथ Nucleo- लेमी, अक्सर kariolemmy के निकट स्थित (परमाणु लिफाफा), क्रोमेटिन संरचना melkozernystaya. कोशिका द्रव्य संकीर्ण है, basophilic, सजातीय. Spermatogonia डिवाइड mitotically कई बार. पिंजरे का बँटवारा की अच्छी तरह से परिभाषित चरणों के साथ सेल हैं.
कोशिकाओं में से कुछ, पिंजरे का बँटवारा के माध्यम से बनाई, дифференцируются в сперматоциты मैं, और फिर द्वितीय आदेश. Spermatocyte मैं आदेश - एक बड़े दौर नाभिक और कोशिका द्रव्य प्रकाश ठीक से 17-19 मिमी की एक व्यास के साथ गोल या बहुभुज कोशिकाओं. सना की तैयारी में एक स्पष्ट perinuclear क्षेत्र है.
आदेश के Spermatocytes द्वितीय अर्धसूत्रीविभाजन के परिणामस्वरूप का गठन. वे कम कर रहे हैं, मैं spermatotsity से आदेश (व्यास 15 एम), लेकिन लगभग समान आकारिकी. में बोल पड़ना आम हैं, मैं spermatotsity से आदेश, लेकिन बहुत कम, से spermatidy.
Spermatydы -छोटे, giperhromnymi नाभिक आकृति गोल या लम्बी कोशिकाओं की एक व्यास के साथ 12-15 माइक्रोन के साथ दौर, स्थित केन्द्र या बहकते हुए. यह बहु-कोर spermatids के लिए संभव है. सेल कोशिका द्रव पीला, bazafil′naâ, अक्सर vacuolated.
शुक्राणु में spermatidy बारी.
सामान्य spermatogramme में spermatogenesis की कोशिकाओं रहे हैं से अधिक नहीं 2 %. उनमें से एक बड़ी संख्या जब बांझपन की स्रावी प्रकृति का.
चरण विपरीत माइक्रोस्कोपी के लिए बोल पड़ना के अलावा की एक छोटी राशि के साथ समाधान isotonic सोडियम क्लोराइड के साथ पतला है 1 % rivanola या carbolic शुक्राणु गतिशीलता को कम करने के लिए एसिड की एक जलीय घोल.
प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी में स्लाइड में प्रजनन ऑरेंज akridinovogo की एक बूंद और बोल पड़ना की एक बूंद डाल दिया है 1:20000. बूँदें मिश्रित कर रहे हैं और कवर ग्लास के साथ कवर कर रहे हैं. ऐपिस और लेंस 40 x x 7 माइक्रोस्कोपी के लिए इस्तेमाल किया. ग्रीन रहते शुक्राणु कोशिकाओं दाग, मृत-ऑरेंज में. सामान्य और असामान्य शुक्राणु आकृति उनके मोर्फोलिजिकल विशेषताओं के कारण आसानी से अलग पहचाना.
इन उपकरणों के लिए दिए गए निर्देशों में चरण-कॉन् ट्रास् ट और प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी पर काम के नियम बताए गए. जब चरण-कॉन् ट्रास् ट और प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी spermatogramma का उपयोग कर सामान्य नियमों के अनुसार गणना की जाती है.
के आधार पर बोल पड़ना की सूक्ष्म परीक्षा विभिन्न रोग की स्थिति प्रकट कर सकते हैं.
- Aspermia -बोल पड़ना और अपरिपक्व रोगाणु कोशिकाओं में शुक्राणु की अनुपस्थिति.
- लाल किताब -शुक्राणुजन अपरिपक्व रोगाणु कोशिकाओं की उपस्थिति की अनुपस्थिति.
- Astenospermiâ -गतिशील कोशिकाओं और सामान्य शुक्राणु की कुल संख्या के साथ रोग रूपों की संख्या में वृद्धि की संख्या को कम करने.
- Oligoastenspermia -शुक्राणु और उनके मोबाइल प्रपत्र की संख्या को कम करने और रोग रूपों की संख्या में वृद्धि.
- Nekrospermiâ -"" पुनरोद्धार के बाद भी उत्पाद में सभी शुक्राणु की जकड़न.
- Akinospermiâ -राज्य के, जो शुक्राणु के बाद बच निकलना पहले स्थिर nekrospermii विपरीत सक्रिय रूप से ले जाने के लिए शुरू.