Nasledstvennaya gemoliticheskaya एनीमिया, कारण लाल रक्त कोशिकाओं के पाइरूवेट काइनेज कमी की गतिविधि के लिए

Nasledstvennaya gemoliticheskaya एनीमिया, संबंधित एरिथ्रोसाइट पाइरूवेट काइनेज कमी - एनीमिया की एक अपेक्षाकृत दुर्लभ रूप, एक autosomal पीछे हटने ढंग से विरासत में मिली है, जो, यह देता है समयुग्मज में नैदानिक ​​अभिव्यक्तियाँ, इंट्रासेल्युलर रक्तापघटन के संकेत के साथ आय, एरिथ्रोसाइट्स की macrocytosis, पोटेशियम की कम सामग्री. इससे ज़्यादा हैं 200 घाटे piruvatkinaznoy गतिविधि का समयुग्मक वाहकों के मामलों.

रोगजनन

पाइरूवेट काइनेज एंजाइमों में से एक है, समापन ग्लाइकोलाइसिस. इस कड़ी ग्लाइकोलाइसिस और एटीपी nikotinamiddinukleotid का गठन. पाइरूवेट काइनेज गतिविधि की कमी के साथ रोगियों के बहुमत इन दो चयापचयों की लाल रक्त कोशिकाओं की सामग्री में कम हो जाता है, कुछ मामलों में, एटीपी की सामग्री सामान्य है, लेकिन गर्मी के दौरान एटीपी की स्थिरता परेशान. महत्वपूर्ण reticulocytosis में पाया एटीपी के सामान्य स्तर. इस reticulocytes की उपस्थिति और न केवल ग्लाइकोलाइसिस के माध्यम से माइटोकॉन्ड्रियल एटीपी की संभावना की वजह से है, लेकिन यह भी ऑक्सीडेटिव फास्फोरिलीकरण की वजह.

पाइरूवेट काइनेज की कमी का परिणाम यह भी ग्लाइकोलाइसिस के उत्पादों का संचय है, पिछले चरणों में गठित - fosfofenolpiruvata, 3-phosphoglycerate, और विशेष रूप से 2,3-diphosphoglycerate. सामग्री की piruvatanlaktata लाल रक्त कोशिकाओं में कम हो जाती है.

एरिथ्रोसाइट्स पाइरूवेट काइनेज की कमी में एटीपी की कमी यह एटीपी aznogo पंप लाल रक्त कोशिकाओं के समारोह के विघटन के लिए और पोटेशियम आयनों के नुकसान की ओर जाता है, सोडियम की एकाग्रता की एरिथ्रोसाइट्स में आयनों जिसमें गैर बढ़ रही है. इस एरिथ्रोसाइट्स में monovalent आयनों की सामग्री में कमी का कारण बनता है, सेल और उसके दबाव के निर्जलीकरण. इस घटना को कहा जाता है dessikotsitoz. पानी की लाल रक्त कोशिकाओं में कमी हीमोग्लोबिन द्वारा oxygenation और ऑक्सीजन रिहाई की प्रक्रिया पेचीदा. इस संबंध में कुछ प्रतिपूरक भूमिका 2,3-एसिड difosfoglitserinovoy की एरिथ्रोसाइट्स में एक महत्वपूर्ण संचय द्वारा खेला.

ऑक्सीजन के लिए हीमोग्लोबिन की आत्मीयता 2,3-diphosphoglycerate के साथ अपनी बातचीत से कम है. अत, 2,3-diphosphoglycerate के लिए उच्च सांद्रता में ऊतकों को ऑक्सीजन की है रिटर्न.

पाइरूवेट काइनेज कमी की गतिविधि के नैदानिक ​​अभिव्यक्तियाँ

कमी पाइरूवेट काइनेज गतिविधि के नैदानिक ​​अभिव्यक्तियाँ haemolysis की डिग्री पर निर्भर. कुछ मामलों में एक बढ़ी हुई hemolysis जन्म से स्पष्ट है और अक्सर गंभीर hemolytic संकट के साथ है, हीमोग्लोबिन subnormal'nom स्तर पर बनाए रखने के लिए रक्त के लिए की आवश्यकता के कारण. अन्य मामलों में, रोग एक बढ़ी हुई hemolysis का पहला लक्षण की उपस्थिति के साथ लगभग स्पर्शोन्मुख हो सकता (subikterichnosti scleras और त्वचा) 17 की उम्र-30 साल.

आम तौर पर; mikrosferocitozom करने के लिए की तुलना में, Pyruvate की कमी के एक अधिक गंभीर है.

लगभग सभी मरीज़ों को तिल्ली palpated. इसके खुलासा कुछ विसंगतियों विषमयुग्मजी वाहकों में मामूली वृद्धि, वे एनीमिया है, हालांकि, आमतौर पर, लापता. रोगियों संभव तिल्ली का बढ़ना की संख्या. जिगर में एक उल्लेखनीय वृद्धि शायद ही कभी पाया. पृथक रोगियों में पैर अल्सर की पहचान के साथ.

पाइरूवेट काइनेज कमी की गतिविधि की प्रयोगशाला संकेतक

पाइरूवेट काइनेज गतिविधि की कमी के साथ रोगियों के बहुमत मध्यम एनीमिया मनाया (4,34- 6,21 mmol / L, या 70-100 ग्राम / एल), हालांकि, संकट हीमोग्लोबिन के दौरान 3,1 को कम किया जा सकता है 3,72 mmol / L (50-60 जी / एल). सामग्री की eritrotsitov- 2.5-3.0 टी 1 एल. Hemolytic संकट संक्रमण की वजह से किया जा सकता है. रक्तापघटन लाभ के मामलों मासिक धर्म के दौरान कर रहे हैं.

पाइरूवेट काइनेज की कमी के साथ रोगियों की लाल रक्त कोशिकाओं normohromiey साथ macrocytosis द्वारा विशेषता, मामूली anisocytosis और poikilocytosis. एक निष्पक्ष polychromatophilia हुई. कभी कभी स्कैलप्ड किनारों के साथ या शहतूत के रूप में mishenevidnye लाल रक्त कोशिकाओं और लाल रक्त कोशिकाओं में पाया गया, अक्सर पहचान basophilic एरिथ्रोसाइट punktatsiya, जॉली कणों. परिधीय रक्त में कुछ रोगियों erythrokaryocytes की एक महत्वपूर्ण संख्या का पता चला, संकट के दौरान, यह 60-70 तक बढ़ाया जा सकता है %. ईएसआर, श्वेत रुधिर कोशिका गणना, leukogram, सामान्य श्रेणी के भीतर प्लेटलेट गिनती. एनीमिया के अन्य रूपों के साथ के रूप में, अस्थि मज्जा में एक तेज जलन लाल रोगाणु hematopoiesis का पता चला.

बिलीरुबिन का स्तर, आमतौर पर, अप्रत्यक्ष की वजह से वृद्धि हुई.

मुक्त प्लाज्मा हीमोग्लोबिन साधारण, लेकिन यह haptoglobin के स्तर को कम किया जा सकता है. मूत्र में Hemosiderin अनुपस्थित है. भ्रूण हीमोग्लोबिन और हीमोग्लोबिन ए की सामग्री₂ सामान्य श्रेणी के भीतर.

ज्यादातर मामलों में सामान्य में एरिथ्रोसाइट्स पाइरूवेट काइनेज की कमी के आसमाटिक प्रतिरोध, कभी कभी दिन ऊष्मायन के बाद कम. Autogemoliz, आमतौर पर, डिग्री बदलती करने के लिए उन्नत. सामान्य autogemolizom साथ पाइरूवेट काइनेज की कमी के मामलों रहे हैं. पहले में पाइरूवेट काइनेज की कमी के मामलों प्रकार द्वितीय autogemoliza पंजीकृत किया गया है सूचना दी, एटीपी के अलावा ठीक हो जाती है, और सही करने या थोड़ा ग्लूकोज के अलावा को सही नहीं. बाद में, कई मामलों एंजाइम की कमी प्रकार से वर्णित किया गया है मैं autogemoliza या नहीं. इसलिए, यह हीमोलाइटिक एनीमिया की विभेदक निदान के लिए विधि autogemoliza लागू करने की सिफारिश नहीं है. पाइरूवेट काइनेज गतिविधि की कमी के साथ लाल रक्त कोशिकाओं की उम्र हमेशा छोटा है.

प्रकार उत्तराधिकार पाइरूवेट काइनेज गतिविधि पीछे हटने का ऑटोसोमल. व्यावहारिक रूप से स्वस्थ heterozygotes, विभिन्न शोधकर्ताओं के अनुसार, घाटे की गंभीरता से लेकर है 50 को 70 % मानदण्डों.

Pyruvate की गतिविधि की कमी का निदान

एरिथ्रोसाइट pyruvate की कमी का निदान माना जाता है कि hemolytic एनीमिया के मामले में डाल सकते हैं, बढ़ी हुई तिल्ली के साथ कई वर्षों के लिए बह, परिधीय रक्त की कमी के संकेत mikrosferocitoza स्मीयरों, jelliptocitoza और stomatocitoza.

गुणात्मक नमूने Pyruvate की गतिविधि निर्धारित. इस उद्देश्य के लिए, फ्लोरोसेंट दाग का एक व्यापक रूप से इस्तेमाल किया विधि, के आधार पर, कि प्रतिक्रिया के पाठ्यक्रम में, pyruvate kinase द्वारा catalyzed, nikotinamiddinukleotid ऑक्सीकरण और प्रतिदीप्ति गायब हो जाता है.

स्वस्थ व्यक्तियों में पाइरूवेट काइनेज की गतिविधि से लेकर 4,0 को 7,7 mmol (न्यूनतम / 1010 एरिथ्रोसाइट्स) या 4,0 को 7,7 शक्ति. समयुग्मक रोग एंजाइम गतिविधि के बहुमत कम 1 शक्ति. बहरहाल, मामले एंजाइम की गतिविधि में मामूली गिरावट हो सकती है कोई. एनीमिया की एक दुर्लभ रूप के निदान के लिए बहुत मुश्किल है, और एक निदान एंजाइम कैनेटीक्स के अध्ययन में ही बनाया जा सकता है.

एनीमिया की विभेदक निदान, पाइरूवेट काइनेज की कमी के साथ जुड़े

Hemolytic एनीमिया के विभेदकों निदान, पाइरूवेट काइनेज की कमी के साथ जुड़े, वंशानुगत hemolytic एनीमिया के अन्य रूपों के साथ किया जाना था.

व्यक्तियों के विपरीत Pyruvate गतिविधि की कमी के साथ अधिकांश रोगियों में के रूप में, mikrosferocitozom से ग्रस्त मरीजों, jelliptocitozom, stomatocitozom, hemolytic एनीमिया, अस्थिर हीमोग्लोबिन का संचय द्वारा के कारण होता, और थैलेसीमिया रोग वंशानुगत ऑटोसोमल रिसेसिव है, यह विकृति है और केवल एक ही पीढ़ी में पाया लगभग कभी नहीं माता पिता के बीच मनाया.

जब वंशानुगत एनीमिया, अस्थिर हीमोग्लोबिन का संचय द्वारा के कारण होता, विशेष रूप से गंभीर बीमारी में, कभी कभी proband उत्परिवर्तन के पहले वाहक है, और फिर बीमारी अगली पीढ़ी के लिए प्रसारित किया जाता है. इसलिए, विभेदक निदान hemoglobinopathies साथ बाहर किया जाना चाहिए, वातानुकूलित गाड़ी अस्थिर हीमोग्लोबिन, के रूप में अच्छी तरह से पीछे हटने का विरासत में मिला है एनीमिया, अन्य एंजाइमों की कमी गतिविधि के कारण.

यह एक सहायक की भूमिका हीमोग्लोबिन स्थिरता नाटकों, येगो वैद्युतकणसंचलन. अन्य fermentopathia बाहर करने के लिए एरिथ्रोसाइट्स के अन्य एंजाइमों की गतिविधि की जांच की, और Coombs किए स्व-प्रतिरक्षित एनीमिया बाहर करने के लिए, agregatgemagglyutinatsionnaya.

Piruvatkiiazy द्वारा गतिविधि का निर्धारण करने के लिए फ्लोरोसेंट विधि Beutler

अभिकर्मकों.

1. Fosfoenolpirovinogradnaya एसिड (tritsiklogeksilammoniynaya नमक) 0,15 के एम समाधान, पीएच 7.0-8.0 को निष्प्रभावी 0,2 NaOH के एम समाधान (0,03 मिलीलीटर).
2. एडीएफ 0,03 के एम समाधान, निष्प्रभावी (0,1 मिलीलीटर).
3. NAD-एन 0,015 के एम समाधान, निष्प्रभावी (0,1 मिलीलीटर).
4. मैग्नीशियम सल्फेट 0,08 के एम समाधान (0,1 मिलीलीटर).
5. पोटेशियम का फॉस्फेट बफर समाधान 0,25 एम, पीएच 11 7,4 (0,05 मिलीलीटर).
6. Distillirovannaya पानी (0,62 मिलीलीटर). मिश्रण पर संग्रहित किया जा सकता है - 20 डिग्री सेल्सियस एक सप्ताह से अधिक नहीं है.

विधि.

अनुसंधान उपयोग रक्त के लिए, हेपरिन या सोडियम साइट्रेट के साथ लिया. यह centrifuged है, aspirated और तैयार प्लाज्मा 20 % isotonic सोडियम क्लोराइड समाधान के चार खंडों जोड़कर लाल रक्त कोशिकाओं के निलंबन.

एक राशि में एरिथ्रोसाइट निलंबन 0,02 मिलीलीटर के साथ मिलाया जाता है 0,2 अभिकर्मक के मिलीग्राम और के लिए incubated 30 मिनट पर 37 सी. एक छोटी बूंद फिल्टर पेपर पर रख दिया गया है, और प्रतिदीप्तिदर्शी ब्राउज़िंग गया था. आधारभूत प्रतिदीप्ति ऊष्मायन से पहले मिश्रण करने के लिए एरिथ्रोसाइट्स के अलावा के बाद तुरंत पता चला था. आम तौर पर ऊष्मायन के 30 मिनट के बाद यह गायब हो जाता है, और पाइरूवेट काइनेज की कमी बनी हुई है की गतिविधि. यह है, क्षेत्र में पराबैंगनी विकिरण के प्रभाव में fluoresces जो एनएडीएच, दृश्य के लिए बंद, एनएडी प्रतिदीप्ति नहीं करता है, जबकि. ऊपर समाधान अस्थिर और आसानी से अपमानित किया जाता है क्योंकि, निगरानी की आवश्यकता है. आप ध्यान से सफेद रक्त कोशिकाओं की परत अलग होना चाहिए, एरिथ्रोसाइट pyruvate leukocytes में इस एंजाइम गतिविधि की कमी की गतिविधि सामान्य हो सकती है, क्योंकि.