प्रतिरक्षा के कारण बांझपन का निदान
गर्भ निरोधकों के इस्तेमाल के बिना एक लंबे विवाहित जीवन के दौरान, और जनन अंग में श्लेष्मा झिल्ली की सूक्ष्म क्षेत्र की उपस्थिति में धीरे-धीरे घटित हाजिर कर सकते हैं शुक्राणु के टीकाकरण एंटीजन. जीवन साथी के शारीरिक परीक्षा, एक बंजर शादी में शामिल, 10-15 में बांझपन का कारण निर्धारित नहीं कर सकते % मामलों. जांच गुप्त ग्रीवा नहर की विशेष तरीकों को लागू करते समय यह बांझ जीवन साथी के इस समूह में है, वीर्य प्लाज्मा और सीरम शुक्राणु एंटीबॉडी अक्सर पता चला रहे हैं (ASAT), प्रतिरक्षा अनुसंधान के गुणात्मक और मात्रात्मक परीक्षण का उपयोग करता है.
Postkoytalnыy परीक्षण (एफसीटी)
Postkoytalnыy परीक्षण (एफसीटी) यह गुणात्मक प्रतिरक्षा करने के लिए संदर्भित करता है. एक नकारात्मक परीक्षा परिणाम ग्रीवा नहर राज में शुक्राणु के अभाव का संकेत, लेकिन आप उनकी अनुपस्थिति के कारण की पहचान नहीं कर सकते.
विधि. ग्रीवा नहर गुप्त रूप से गतिशील शुक्राणु की संख्या से, सहवास के बाद प्राप्त, उन्हें गर्भाशय ग्रीवा नहर के बलगम बांझपन या उन्मुक्ति के साथ उनकी मर्मज्ञ क्षमता के उल्लंघन की हद तक स्थापित.
एफसीटी निम्न स्थितियों के लिए बाहर ले जाने के लिए आवश्यक है: अध्ययन ovulation की अवधि में आयोजित किया जाना चाहिए, जो colpocytologic या अन्य विधि से पता चला, 2-3 दिनों के भीतर से पहले संयम जीवन साथी के बाद.
की कार्यप्रणाली. एक औरत के लिए सामान्य सहवास के बाद 30 मिनट उसकी पीठ पर झूठ चाहिए, अपने घुटनों के बल झुका. Douching और निषिद्ध सफाई, केवल सैनिटरी नैपकिन की जरूरत है, ग्रीवा नहर के बलगम के अध्ययन के लिए कब्जा करने के दौरान हटा दिया जाता है, जो. 2-4 घंटे के बाद, अनुमेय और 6-10 घंटे के बाद (समय, अध्ययन से पहले गुजरे, विश्लेषण में संकेत) संभोग ग्रीवा एक दर्पण Cuzco और aspirated endocervical बलगम या टूबेरक्यूलिन सिरिंज का उपयोग उजागर होने के बाद (सुई के बिना), एक रबर बल्ब के साथ एक पिपेट, या पॉलीथीन कैथेटर.
साधन धोने कीटाणुनाशक नहीं किया जाना चाहिए, वे शुक्राणु की गतिशीलता को प्रभावित के रूप में. ग्रीवा नहर के परिणामस्वरूप बलगम की एक बूंद एक गरम गिलास स्लाइड को सौंप दिया है, लेपित coverslip, तरल आयल के साथ lubricated टेरिटरी रिसाव. निरूपण तुरंत mikroskopiruyut (आईपीस 7X, 40x उद्देश्य), शुक्राणु की गतिशीलता की संख्या और प्रकृति का निर्धारण. दवा सक्रिय शुक्राणु प्रगतिशील गतिशीलता के साथ पाया जा सकता है, दोलन गति (झूले की घटना) और तय.
एफसीटी निष्कर्ष के पांच प्रकार प्रदान स्वीकार किए जाते हैं.
- उत्कृष्ट (प्रासंगिक मानदंडों): सक्रिय शुक्राणु प्रगतिशील गतिशीलता और अधिक के साथ 15-20 के लिए दृश्य के पांच क्षेत्रों में. दोलन की घटना के साथ शुक्राणु की तुलना में कम है 25 %.
- संतोषजनक: दृश्य के पांच क्षेत्रों में 10 सक्रिय शुक्राणु प्रगतिशील गतिशीलता और कम 25 % झूले की घटना के साथ शुक्राणु.
- दरिद्र: कम 5 दृश्य के पांच क्षेत्रों में शुक्राणु.
- ऋणात्मक: शुक्राणु का अभाव.
- संदिग्ध: और देखें के पांच क्षेत्रों में 5 सक्रिय गतिशील शुक्राणु और अधिक 25 % झूले की घटना.
जब एफसीटी के पांचवें प्रकार अक्सर पत्नियों के बीच प्रतिरक्षा असंगति मनाया, ACAT निर्धारित करने के लिए इसलिए जरूरी. ACAT गुप्त endocervical पहचान करने के लिए, प्लाज्मा, वीर्य या रक्त सीरम और उन्हें प्रदर्शित (समूहन या स्थिर) यह मात्रात्मक immunoassays की नियुक्ति की आवश्यकता है.
एक नकारात्मक पीबीसी पढ़ाई के मर्मज्ञ की एक परिभाषा के साथ शुरू (प्रवेश) छेदक परीक्षण के माध्यम से शुक्राणु की क्षमता (शुक्र) और गर्भाशय ग्रीवा नहर के शुक्राणु स्राव के लिए संवेदनशीलता शुक्राणु और गर्भाशय ग्रीवा बलगम के एक परीक्षण के संपर्क का उपयोग (TKSTSS).
Penetracionnyj परीक्षण (टी.पी.)
पतली केशिका लंबाई 10 ग्रीवा नहर की ovulation के बलगम के दौरान आपके द्वारा लिखे देखें. केशिका से एक खुला अंत मिट्टी बंद कर देता है, और दूसरा एक परीक्षण ताजा बोल पड़ना के साथ एक टेस्ट ट्यूब में रखा गया है (अब और नहीं 3 स्खलन के बाद घंटे). केशिका में मिट्टी ईमानदार ट्यूब से जुड़ा हुआ है के साथ. नमूना तापमान पर एक थर्मोस्टेट में incubated है 37 डिग्री सेल्सियस 1 नहीं. स्खलन की गुणवत्ता ग्रीवा नहर के बलगम में शुक्राणु के प्रवेश की गहराई से माना जाता है पर. जीएचजी के तीन प्रकार के होते हैं.
- सकारात्मक - प्रवेश की गहराई (सेंटीमीटर में सबसे बड़ी दूरी, कम से कम एक शुक्राणु पर कूच) ऊपर 5 सेमी; अधिकतम पैठ की बात में शुक्राणु की संख्या अधिक 5 दृष्टि में, और केशिका के ऊपरी सिरे में गतिशील शुक्राणु की संख्या से अधिक है 50 %.
- संदिग्ध - प्रवेश तक की गहराई तक 5 कम शुक्राणुओं की संख्या देखें 5, केशिका पहुँचता के ऊपरी सिरे में अपनी गतिशीलता 50%.
- ऋणात्मक - शुक्राणु तक पहुँच के प्रवेश की गहराई 1 सेमी.
प्रवेश के लिए शुक्राणु की क्षमता यह मासिक धर्म चक्र के चरण पर निर्भर करता है. वह मासिक धर्म चक्र के 9 दिन से उभरने के लिए शुरू होता है,, धीरे-धीरे सक्रिय करने, ovulation की अवधि में इसकी अधिकतम अभिव्यक्ति पहुँचता है, दो दिनों के लिए इस स्तर पर आयोजित, और फिर धीरे-धीरे कम हो जाती है.
टेस्ट संपर्क वीर्य और गर्भाशय ग्रीवा बलगम (TKSTSS)
स्लाइड पर ग्रीवा नहर से बलगम की एक छोटी सी बूंद डाल दिया जाता है, ovulation के दौरान महिलाओं से लिया, और स्खलन की एक ही आकार बूंद के एक नंबर. दोनों बूँदें एक गिलास को कवर के साथ आते हैं, थोड़ा के लिए जो नीचे दबाया जाता है, एक बूंद के लिए शामिल हो गए. दवा एक नम कक्ष में रखा गया है (सिक्त कपास झाड़ू के साथ पेट्री डिश) और एक के तापमान पर एक थर्मोस्टेट में incubated 37 डिग्री सेल्सियस 1 नहीं.
इन शर्तों के तहत, सामान्य शुक्राणु सामान्य ग्रीवा नहर का रहस्य घुसना, एक बढ़ाई 200X में माइक्रोस्कोप के नीचे देखा जा सकता है. दो मीडिया के बीच की सीमा के पास प्रतिक्रिया के लिए खाते में देखने के दो सटे क्षेत्रों में गर्भाशय ग्रीवा नहर शुक्राणु का रहस्य मर्मज्ञ की संख्या की गणना.
दो क्षेत्रों में उत्कृष्ट TKSTSS के साथ देखने में अधिक पता चलता है 25 कम स्विंग की घटना में सक्रिय रूप से गतिशील शुक्राणु 25 %. देखने के दो क्षेत्रों में संतोषजनक TKSTSS अधिक से पता चला, तो 15 सक्रिय रूप से गतिशील शुक्राणु, कम में TKSTSS - से कम 15. एक नकारात्मक अनुपस्थित पैठ TKSTSS, दोलन की एक घटना से अधिक है - संदिग्ध यदि 25 %.
इस परीक्षण में, पीसीटी में के रूप में, झूले की घटना, से अधिक 25 %, संभावना, यह ACAT की उपस्थिति का संकेत है और मात्रात्मक immunoassays की नियुक्ति की आवश्यकता है.
TKSTSS का उपयोग करने के वीर्य और गर्भाशय ग्रीवा स्राव विभिन्न मात्रा में चैनल बांझ और उपजाऊ पुरुषों का प्रयोग बांझ पति की पहचान.
- उदाहरण 1. महिलाओं को बांझ दंपतियों और नियंत्रण बोल पड़ना स्वस्थ पुरुषों में गर्भाशय ग्रीवा के एक गुप्त चैनल में ले ली. उत्कृष्ट TKSTSS उसके पति का शुक्राणु की एक कमजोर प्रवेश क्षमता है, और गर्भाशय ग्रीवा नहर के सामान्य स्राव की संवेदनशीलता को इंगित करता है.
- उदाहरण 2. में ले ली पूर्ण ग्रीवा नहर स्वस्थ महिला के गुप्त और बांझ दंपतियों की उसके पति बोल पड़ना. बुरा TKSTSS शुक्राणु की एक कमजोर पैठ इंगित करता है.
- उदाहरण 3. में ले ली गुप्त endocervical महिलाओं को बांझ दंपतियों और नियंत्रण बोल पड़ना स्वस्थ पुरुषों. बुरा TKSTSS हीनता गुप्त ग्रीवा नहर इंगित करता है, जो स्पष्ट रूप से सामान्य शुक्राणु घुसना नहीं है.
मात्रात्मक प्रतिरक्षा परीक्षण
Mikroagglyutinatsionny परीक्षण फ्रीबर्ग
Mikroagglyutinatsionny परीक्षण फ्रीबर्ग (TF) पर्याप्त रूप से संवेदनशील और नैदानिक नैदानिक प्रयोगशालाओं के लिए उपलब्ध है. टीएफ का प्रयोग विभिन्न सामग्रियों में ACAT और समूहन अनुमापांक की उपस्थिति निर्धारित कर सकते हैं (प्लाज्मा बोल पड़ना, ग्रीवा नहर के बलगम की और दोनों पत्नियों के सीरम में अर्क).
अभिकर्मकों:
1. बफर फॉस्फेट खारा (एफएसबी) 0,01 М पीएच 7,2-7,4.
2. Vazelinovoe तेल.
उपकरण: माइक्रोस्कोप, टूबेरक्यूलिन सिरिंज, mikroagglyutinatsionnye pipetter 1 मिलीलीटर, micropipette क्षमता 0,1 मिलीलीटर.
विधि. रक्त परीक्षण सीरम में एक मशीन में ऊष्मायन द्वारा निष्क्रिय है 56 डिग्री सेल्सियस 30 एम. बोल पड़ना, हस्तमैथुन करके प्राप्त, तुरंत इतना है कि पतला एफएसबी, शुक्राणु की एकाग्रता था 40 दस लाख. में 1 मिलीलीटर.
सामग्री की वजह से (प्लाज्मा बोल पड़ना, ग्रीवा नहर या सीरम का रहस्य निकालने) dilutions की एक श्रृंखला तैयार कर रहा है 1:4 को 1:128 कमजोर पड़ने एफएसबी के लिए एक तरल के रूप में उपयोग करते हुए. एक सुई शुरू की है साथ तेल तेल mikroagglyutinatsionnyh साथ कुओं में टूबेरक्यूलिन सिरिंज planchettes (vazelinovoe तेल के तहत) परीक्षा सामग्री का प्रत्येक कमजोर पड़ने की छोटी बूंदों. प्रत्येक नमूना चार बार सिरिंज धोया जाता है के बाद. प्रत्येक कमजोर पड़ने में करने के लिए जोड़ा गया है, 5 स्खलन के समय छोटे ड्रॉप, और द्वारा 4 कमरे के तापमान पर ज agglutinates का पता चला. अंतिम प्रजनन, जिससे पता चला 100X बढ़ाई पर एक खुर्दबीन के नीचे 3 समीक्षा और अधिक तहत सरेस से जोड़ा, समूहन अनुमापांक ACAT मेल खाती है.
Spermoimmobilizuyuschy परीक्षण Izodzhima (एसआईटी).
अनुमापांक immobilizing ACAT सीरम, प्लाज्मा या वीर्य निकालने गुप्त ग्रीवा नहर एंटीजन की उपस्थिति में गतिशील शुक्राणु की संख्या से सेट किया गया है (शुक्राणु).
अवयव.
1. बोल पड़ना, उत्पादन किया है और इसी तरह से तैयार किया जाता है जो, एफएसबी का उपयोग कर TF के लिए; गतिशीलता से अधिक 70 %.
2. गिनी सूअरों की Komplementsoderzhaschaya सीरम.
3. इम्यून मानव सीरम (IChS), पूरक की उपस्थिति के माध्यम से दे रही है 1 ज ऊष्मायन स्थिरीकरण 90 % शुक्राणु.
4. सामान्य मानव सीरम (NCHS), एक के तापमान पर गर्म करने से निष्क्रिय 56 डिग्री सेल्सियस 30 एम.
5. टेस्ट निष्क्रिय सीरम, प्लाज्मा और वीर्य गुप्त ग्रीवा नहर निकालने.
विधि. 1 ट्यूब immobilizing पूरक गतिविधियों का मूल्यांकन करने के लिए शुरू की है 0,5 isotonic सोडियम क्लोराइड समाधान के मिलीलीटर, ASAT 2 टेस्ट ट्यूब बिना शुक्राणु की गतिशीलता में परिवर्तन का निर्धारण करने के लिए - 0,5 मिलीलीटर एनएचएस, नियंत्रण स्थिरीकरण तीसरे ट्यूब - 0,5 और ICHS मिलीलीटर 4 ट्यूब immobilizing ACAT निर्धारित करने के लिए - 0,5 सीरम की मिलीलीटर, स्खलन की या प्लाज्मा, निकालने या स्राव endocervical.
फिर, प्रत्येक ट्यूब द्वारा शुरू की है 0,1 मिलीलीटर पूरक. सभी ट्यूबों को आखिरी बात जोड़ा जाता है 0,05 एक एकाग्रता में मिलीलीटर शुक्राणु निलंबन 40 दस लाख. में 1 मिलीलीटर. तिपाई ट्यूब एक के तापमान पर एक मशीन में रखा गया 37 सी 1 नहीं. नलियों बसे agglutinated शुक्राणु को प्रतिबिंबित करने के लिए हिल ध्यान से ओवन से हटा दिया है और कर रहे हैं.
उच्च बढ़ाई खुर्दबीन के नीचे परिणामों का मूल्यांकन करने के लिए (400एक्स) टेस्ट ट्यूब की एक बूंद में गतिशील शुक्राणु के प्रतिशत की गणना, एक गिलास स्लाइड पर जमा है और एक कवर के साथ कवर. इसी तरह, यह एन एच एस और ICHS साथ टेस्ट ट्यूब की बूंदों में गतिशील शुक्राणु का प्रतिशत सेट. सूत्र द्वारा खाते में प्रतिक्रिया का परिणाम
एसआईटी = कश्मीर / ए
जहां कश्मीर - ICHS और एनएचएस के साथ नियंत्रण में गतिशील शुक्राणु की संख्या;
के बारे में - एक टेस्ट ट्यूब में गतिशील शुक्राणु की संख्या (सीरम परीक्षण, स्खलन की या प्लाज्मा, या गर्भाशय ग्रीवा नहर का रहस्य).
औसत एसआईटी के साथ<2 परीक्षण नकारात्मक है (लगभग नियंत्रण में है और टेस्ट ट्यूब में गतिशील शुक्राणु कोशिकाओं की संख्या में एक ही), अगर सूचकांक सीटीआई>2 - परीक्षण सकारात्मक है, T. यह है. सामग्री में (सीरम, प्लाज्मा या वीर्य गुप्त ग्रीवा नहर निकालने) ACAT स्थिर कर रहे हैं.
- उदाहरण 1. ICHS को ग्राउंड नियंत्रण - 10 % गतिशील शुक्राणु. एनएचएस के साथ दूसरे पर नियंत्रण - 80% गतिशील शुक्राणु. दो नियंत्रण एक साथ - 90 % गतिशील शुक्राणु. टेस्ट ट्यूब में - 80 % गतिशील शुक्राणु.
एसआईटी = आर / डी = 90/80 = 1.1
परीक्षण नकारात्मक है, स्थिर ACAT अनुपस्थित.
- उदाहरण 2. टेस्ट ट्यूब में - 40 % गतिशील शुक्राणु, हालांकि, नियंत्रण में, उदाहरण में 1.
के.एन. = 90/40 = 2.2
सकारात्मक परीक्षण. स्थिर एंटीबॉडी है (ASAT), जो शुक्राणु की गतिशीलता के माध्यम से काफी कम.