Piropojkilocitoz תורשתי — своеобразная, לעתים נדירות נתקל אנמיה המוליטית תורשתית, הקשורים להפרת מבנה חלבון ממברנה של כדוריות דם אדומות. המאופיינת מבוטא תאיים гемолизом и пониженной резистентностью эритроцитов к изменению температуры.
У больных пиропойкилоцитозом обнаружен дефект структуры спектрина. Белок нестабилен, имеет тенденцию к повышенной агрегации. Количество спектрина при пиропойкилоцитозе уменьшено.
У детей раннего возраста выявляются резко выраженная желтушность, значительное увеличение селезенки и увеличение печени. Содержание гемоглобина снижается до 3,1—3,41 ммоль/л (50—55 г/л), количество ретикулоцитов повышается до 30 %, в периферической крови обнаруживается значительное количество эритрокариоцитов. В мазках крови выявляются микросфероциты, отмечают ся выраженный анизоцитоз, poikilocytosis היו, фрагментация эритроцитов, значительно выраженная базофильная пунктация эритроцитов. Осмотическая резистентность их понижена. Обнаруживается значительный аутогемолиз с частичной коррекцией глюкозой. Активность исследованных ферментов нормальная, патологии структуры гемоглобина не выявлено.
Характерной особенностью заболевания является повышенная чувствительность эритроцитов к небольшому нагреванию. При повышении температуры до 48 °С эритроциты резко деформируются. Появляется выраженная фрагментация пойкилоцитов. В норме такая деформация наступает при 52—55 °С. При пиропойкилоцитозе в эритроцитах выявляется большое количество ионов кальция, отмечается их повышенное проникновение внутрь эритроцитов и замедленное выведение.
Определение осмотической резистентности может производиться как свежих эритроцитов, так и эритроцитов, инкубированных в течение суток при температуре 37 °С в стерильных условиях.
ריאגנטים.
1. Основной раствор, осмотически соответствующий 10 % раствору хлорида натрия.
2. ב2HPO4 - 27,31 ז.
3. NaH2לאחר4 - 4,86 ז.
4. NaCl - 180 ז. Все реактивы растворяют в 2 ליטרי מים; pH полученного раствора должен быть 7,4. Раствор может храниться в закрытой посуде в холодильнике в течение нескольких месяцев. Из него готовят 1% פתרון, из которого приготавливают все остальные: 0,85; 0,75; 0,65; 0,55; 0,5; 0,45; 0,4; 0,35; 0,3; 0,25 ו 0,1 %. Можно приготовить сразу по 100 мл рабочих растворов разных концентраций и хранить их в течение 2 недель в холодильнике.
שיטה. В две стерильные пробирки, מֵכִיל 2 капли гепарина, наливают по 1,5 מיליליטר של דם.
Одну пробирку помещают на сутки в термостат, кровь во второй исследуют в день взятия.
על ידי 5 мл раствора хлорида натрия (1 %) и всех рабочих растворов разливают в центрифужные пробирки. К каждой пробирке пипеткой от гемометра добавляют по 0,02 мл перемешанной крови. Пробирки оставляют при комнатной температуре на 30 מ ', затем центрифугируют при 2000 об/мин в течение 5 מ '. Сливают верхний слой из каждой пробирки и колориметрируют на медицинском колориметре при зеленом светофильтре в кювете с длиной оптического пути 1 см против надосадочного слоя пробирки, מכיל 1 % נתרן כלורי.
ל 100 % гемолиз принимают оптическую плотность в надосадочном слое пробирки, מכיל 0,1 % נתרן כלורי (שולחן).
|
Показатели нормальной осмотической резистентности эритроцитов |
||
|
Концентрация раствора хлорида натрия |
המוליזה, % |
|
|
в свежей крови |
בדם, инкубированной в течение суток |
|
| 0,2 | 98-100 | 95-100 |
| 0,3 | 97-100 | 85-100 |
| 0,35 | 90-100 | 75-100 |
| 0,4 | 50-100 | 65-100 |
| 0,45 | 5—45 | 55-95 |
| 0,5 | 0-6 | 40-85 |
| 0,55 | 0 | 15-70 |
| 0,6 | 0 | 0-40 |
| 0,65 | 0 | 0-10 |
| 0,7 | 0 | 0-5 |
| 0,75 | 0 | 0 |
| 0,8 | 0 | 0 |
| 0,85 | 0 | 0 |
דוגמא.
לפי 0,1 % растворе хлорида натрия оптическая плотность равна 0,65, ב 0,4 % - 0,22.
0,65 - 100 % gemoliz
0,22 — x
x=(0,22*100)/0,65=34%
Вторую пробирку, помещенную в термостат, извлекают через 24 ч и исследование повторяют.
При микросфероцитарной гемолитической анемии наблюдается понижение осмотической резистентности эритроцитов. Гемолиз наблюдается уже в 0,7—0,65 % растворах хлорида натрия У некоторых больных микросфероцитозом выявить понижение осмотической резистентности эритроцитов в свежей крови не удается, однако в инкубированной крови она резко понижается. Гемолиз может начаться в концентрации раствора хлорида натрия 0,85 %.
При талассемии, а также при некоторых видах несфероцитарной гемолитической анемии осмотическая резистентность эритроцитов повышается. Гемолиз может начаться в 0,35 או 0,3 % פתרון נתרן כלוריד.
Определение осмотической резистентности эритроцитов необходимо проводить во всех случаях наличия внутриклеточного гемолиза. Желательно исследовать осмотическую резистентность не только свежей крови, но и инкубированной в течение суток.
אתר זה משתמש בעוגיות ובשירותים כדי לאסוף נתונים טכניים מהמבקרים כדי להבטיח ביצועים ולשפר את איכות השירות.. על ידי המשך השימוש באתר שלנו, אתה מסכים אוטומטית לשימוש בטכנולוגיות אלו.
Read More