L'examen microscopique du liquide céphalo-rachidien
Détermination cytose
En liquide céphalo-rachidien d'individus sains contenait un très petit nombre de cellules. La signification clinique ont principalement leucocytes (lymphocytes). Pour compter des globules blancs ne pas interférer érythrocytes, Ils les détruisent en ajoutant liquide céphalo-rachidien non dilué 1/10 parties de fuchsine acide acétique. couleurs magenta cellules nucléées en rouge. Pour la peinture des leucocytes en utilisant le réactif Samson (mixte 30 ml d'acide acétique glacial, 2 ml de phénol liquéfié, 2 ml d'une solution alcoolique de fuchsine 1 : 10 et surmonté 100 ml d'eau distillée). Réactif résistant, bonnes cellules antitaches et en quelques heures les empêche de cytolyse.
Appliquer une solution, comprenant 5 ml 10 % acide acétique 0,1 M. metilvioleta. Il est moins stable, cellules se colorent en bleu.
En raison des propriétés cytolytiques de liquide céphalo-rachidien pour compter le nombre de cellules doit être immédiatement après la prise. Le liquide est introduit dans le tube ou micropipette baisse en proportion 10 parties de liquide céphalo-rachidien et 1 solution de colorant de la pièce et de gauche pour 10-25 minutes pour teindre cellules. Pour l'élevage peut être utilisé leucocytes de mixage. Les cellules du liquide céphalorachidien très rapidement coller aux parois des tubes, si liquide, box in vitro, avant que l'étude doit être mélangé mouvements de rotation entre les paumes.
Pour calculer le nombre de cellules est utilisé Chambre Fuchs-Rosenthal. Comptage des produits tout au long de la grille par 5 min après le remplissage de la chambre. Nombre de cellules 1 L est donné par:
X =(A * 11)/(3.2*10)
dans laquelle X - nombre de cellules dans 1 l; A - nombre de cellules, compté sur la surface de l'écran; 3,2 - Volume de la chambre; 11/10 - Dilution.
Admis l'enregistrement des comtes comme une fraction, par exemple, 14/3, où 14 - Le nombre de cellules comptées dans la chambre, 3 - Volume de la chambre Arrondi. Avec un grand nombre de cellules est suffisant pour les compter dans une moitié de la grille et le nombre de doubles reçu. Avec une pléocytose prononcée (une augmentation significative du nombre de cellules) permis de compter les cellules 16 Petit carrés et multipliez ce nombre par 16.
En l'absence de la chambre de Fuchs-Rosenthal peut être utilisé Chambre de comptage Goryaeva avec une capacité nettement inférieure, cellules il est donc compté au moins trois carrés, calculer la moyenne arithmétique et la multiplier sur 1,2. Facteur 1,2 obtenu à partir de la formule
X =(A * 11)/(0.9*10)
où la chambre 0,9 capacités, 11/10 - Dilution.
Pour compter les cellules dans le liquide céphalo-rachidien, non dilué de l'une des premières gouttes, résultant de l'aiguille de ponction, placé dans une Fuchs-Rosenthal et déterminer le nombre de cellules, Comme indiqué ci-dessus.
Normalement, le nombre de cellules (lymphocytes) dans 1 l liquide céphalo-rachidien à partir des ventricules du cerveau et du cervelet cérébral réservoir est 0-1, et liquide, obtenu par ponction lombaire - 2-4.
Les enfants de moins de trois mois 1 l liquide céphalo-rachidien se trouve à 20-23 cellules, jusqu'à un an - 14-15, jusqu'à deux ans - 11-14, de deux à cinq ans - 10-12, de cinq à sept années, 8-10, sept à dix ans - 6-8, plus de dix ans - 4-5.
Lorsque la méningite, tumeurs du abcès cérébral et le nombre de cellules dans les augmentations de liquide céphalorachidien.
Dans l'étude du liquide céphalo-rachidien hémorragique dans certains cas, il est nécessaire d'établir sa véritable cytose. A cet effet, la La méthode de Friedman: hémorragique fluide réactif Samson de gain pour déterminer le nombre de cellules et une solution isotonique de chlorure de sodium pour compter le nombre de rouge 1 l liquide céphalo-rachidien.
Par Exemple, nombre de cellules dans 1 l - 20, le nombre de globules rouges - 3600. Le nombre de globules rouges et des globules blancs du patient de reconnaître de l'analyse générale, effectué avant la ponction lombaire. Par Exemple, dans 1 ml de sang 4 200 000 érythrocyte, 7000 leucocytes. Par conséquent on doit leucocytes 4200000/7000 = 600 érythrocytes.
Pour obtenir la valeur réelle de cytose Equate:
sur 600 les globules rouges - 1 leucocyte;
sur 3600 érythrocytes - X leucocytes, Donc,
X = 3600/600 = 6 леикоцитов.
Vrai cytose de liquide céphalo-rachidien 20-6 = 14 cellules 1 l.
L'application de cette méthode est limitée, depuis liquide céphalo-rachidien avec un mélange de sang considérable ne convient pas pour une telle étude.
La détermination du nombre d'érythrocytes dans le liquide céphalo-rachidien Il est situé à établir la gravité d'hémorragies intracrâniennes du patient.
En présence de 1 l 2000-5000 érythrocytes liquide céphalo-rachidien devient rose, 900-1000 Érythrocytes - seulement légèrement opalescente. Le liquide incolore peut être détectée par les globules rouges inférieur. La signification clinique est l'augmentation de la dynamique du niveau de globules rouges du sang.
La différenciation cellulaire de liquide céphalo-rachidien tenue à la chambre de comptage sous la forme d'native et colorées.
À fort grossissement (oculaire 10X ou 15X, Lentille 40X) dans la chambre de comptage de prêter attention à la quantité de cellules, forme, l'emplacement et la taille des noyaux, la présence d'inclusions dans le cytoplasme de. Il est facile de différencier les lymphocytes, granulocytes neutrophiles, macrophages. Normalement, dans le liquide céphalo-rachidien ne contenant que des lymphocytes.
Pour la caractérisation complète de la composition cellulaire du liquide céphalo-rachidien étudié préparations colorées. Les cellules ont été colorées pire fluide, que les globules. Il ya plusieurs façons de coloration: Rosina, Comédie, Papanicolaou, Alekseev, Peut Gryunvalydu, Pappengeymw.
La détermination de la nature de la méthode de microscopie fluorescente pléiocytose
Écrémé lame de verre revêtue et une goutte de liquide céphalo-rachidien mélanger avec un colorant fluorochrome (un mélange de solutions aqueuses de sels de l'orange d'acridine et de la rhodamine dans l'élevage 1:20000). Le médicament mixte est examiné sous un microscope à fluorescence ML-2 à la lumière bleu-violet dans le spectre visible, utilisant des combinaisons de filtres d'excitation: FS 1-4, FBS 14-4, BS 8-2 et le filtre de blocage LS-1 lentille à immersion. Comme neflyuorestsiruyuschego huile d'immersion utilisé pour diméthyle de recherche (l'ester diméthylique de l'acide orthophtalique).
Dans le fond sombre du champ de vue et les lymphocytes polynucléaires facilement identifiés par la lueur verte du cytoplasme. Comte rangée 100 cellule, compte tenu du nombre de lymphocytes et de neutrophiles.
Lymphocytes différente de la nature des neutrophiles noyau (Structure avec des inclusions d'orange glybchatoy) et la fluorescence vert vif.
Granulocytes neutrophiles avoir une structure claire, leur chromatine noyaux diffuse allumé, lumineux uniforme- vert. Cytoplasmique jaune- vert, il d'une brique diffusée granulés rouges.
En cas de cytose mineure liquide céphalo-rachidien natif est centrifugé et l'étude de précipité.
Examen microscopique fluorescente de liquide céphalo-rachidien, il est facile de conclure que neutrophiles, lymphocytaire ou polynucléaires cellule nature pléiocytose.
Caractéristiques morphologiques de cellules de liquide céphalo-rachidien
Lymphocytes
Dans le liquide céphalo-rachidien de l'homme sain trouvé les petites et moyennes lymphocytes (1-2 1 l) taille de 4-6 microns. Cette cellules de forme ronde avec un gros noyau et cytoplasme glybchatym très étroite.
Lorsque lymphoïde pléiocytose (méningite tuberculeuse, cysticercose) avec de petites et moyennes grands lymphocytes apparaissent (8-9 M), parfois il est possible de détecter des cellules avec la fission directe.
Le nombre de lymphocytes (ainsi que d'autres cellules) augmentation de liquide céphalo-rachidien dans les tumeurs cérébrales, Pendant méningite chronique. Lorsque maladies neurochirurgicales augmentation du nombre de lymphocytes dans la période postopératoire survient après l'augmentation du nombre de neutrophiles et indique une issue favorable.
Les cellules plasmatiques
Les cellules plasmatiques peuvent être détectées dans le liquide céphalo-rachidien uniquement lorsque le temps actuel inflammation dans le cerveau et les méninges. Morphologie des cellules plasmatiques tels que, dans le sang ou la moelle osseuse ponctuée.
Cette cellules de forme ronde avec noyau excentré et intensément coloré, basophiles. Dans certains cas, le montant peut atteindre leur 26%. Il ya des cellules plasmatiques dans la période postopératoire et bien sûr atone du processus de réparation dans les lésions cérébrales.
Gistiocitы
Dans un liquide céphalo-rachidien normale sont parfois trouvés dans la forme de copies simples.
Les préparations colorées histiocytes ont un grand coeur et un cytoplasme relativement étroite. La quantité de cellules 7 à 10 m, forme ronde ou irrégulière. Le noyau de haricot ou de la forme de la lame incorrecte, normohromnaja. Nucléoles sont visibles dans les préparations natives avec la microscopie à contraste de phase.
Lorsque la méningite tuberculeuse dans le liquide céphalorachidien a révélé un grand nombre d'histiocytes, espacées et grappes, de leur cytoplasme basophile, peint de manière plus intensive.
Selon les données disponibles, certains types de cellules gliales peuvent se transformer en histiocytes. Un grand nombre d'histiocytes est détectée dans le liquide céphalo-rachidien de patients, subi une intervention chirurgicale sur le cerveau ou la colonne vertébrale (ce qui indique une réaction tissulaire active et la cicatrisation des plaies normales), et chez des individus, souffrant de méningite tuberculeuse et la cysticercose dans l'inflammation actuelle atone. Lorsque les tumeurs du cerveau avec invasion dans l'espace sous-arachnoïdien ou histiocytes dans la paroi ventriculaire peuvent apparaître dans le liquide céphalo-rachidien, en liaison avec les cellules et les macrophages modifiés, qui est typique pour l'émergence autour de la zone réactive de la tumeur.
Macrophages
Les macrophages sont formées d'un seul- les cellules endothéliales et les monocytes mater et multi-arachnoïde. Éléments de arachnoïde endothéliale est séparé du syncytium et deviennent des cellules arrondies, possédant mouvement et la pénétration amoeboid dans le liquide céphalo-rachidien.
Les macrophages phagocytent activement et digèrent les cellules et autres éléments, tomber dans le liquide céphalo-rachidien dans les processus pathologiques, contribuant à sa purification. Les inclusions dans le cytoplasme des macrophages différenciés facilement dans la chambre et colorées.
Les macrophages phagocytent érythrocytes, granulocytes neutrophiles non modifiés ou détruits, gouttelettes de graisse, cristaux gematoidina, etc.. Souvent dans le cytoplasme des macrophages vacuoles de différentes tailles sont disponibles, ou une grande vacuole, qui occupe la quasi-totalité du cytoplasme, tandis que le noyau est déplacé vers la périphérie. Dans de tels cas, la cellule a la forme d'anneau - macrophages cricoïde.
Normalement les macrophages dans le liquide absent moelle. Leur apparition dans le nombre de cellules normales indiquant une hémorragie ou d'une inflammation dans le système nerveux central. Un grand nombre de macrophages dans le liquide céphalo-rachidien dans la période postopératoire indique la restauration active (vision positive). Un petit nombre de macrophages ou leur absence lorsqu'il est exprimé pléiocytose - un signe pronostique défavorable.
Boules granulaires – cellules spumeuses
Boules granulaires (cellules spumeuses) Les macrophages sont grandes avec de multiples inclusions de gouttelettes de graisse dans le cytoplasme.
Ceci est le plus souvent la forme arrondie des cellules, couleur magenta de couleur brun foncé. Dans le traitement de fluides spinaux billes granulaires Soudan III peint en rouge-orangé.
Détecté dans le liquide céphalo-rachidien en contact avec ce liquide dans des kystes de différentes étiologies, la désintégration du tissu cérébral (avec des gouttes de graisse), parfois dans la période postopératoire, dans certaines tumeurs cérébrales (kraniofaringiome, épendymomes et autres.). Si la tumeur est située à proximité des ventricules, les boules granulaires souvent détectés dans le liquide céphalorachidien des ventricules. La source de boules granulaires sont microglie, et les oligodendrocytes, les cellules de l'enveloppe extérieure de navires et arachnoïde.
Granulocytes neutrophiles
granulocytes neutrophiles dans le liquide céphalo-rachidien semblable à du sang neutrophile granulopitami, leur cytoplasme (dans la chambre de comptage et préparations natifs) souvent tendue ou a une saillie (pseudopodes). Cette diversité de cellules observées dans les 10-15 premières minutes après la prise du liquide céphalo-rachidien et indique la préservation de neutrophiles- la capacité de se déplacer de granulocytes. Caractéristique est un noyau segmenté, le nombre de segments dans lesquels varie de deux à cinq; granulocytes neutrophiles couteau sont rares.
Lorsque le stockage des granulocytes neutrophiles liquide céphalo-rachidien modifiés avant, que les autres cellules. Les noyaux des granulocytes neutrophiles peuvent être lysées ou segments sont arrondies, avec des contours clairs, relié par un pont mince; plus tard, ils prennent la forme de pastilles individuelles. Microphage, qui est stocké un seul segment de base de forme arrondie, en apparence ressemble cellule Loevit. Là granulocytes neutrophiles gonflées aux contours indistincts de segments, occupant presque toute la cytoplasme. Dans préparations colorées peut observer toutes les étapes de l'effondrement de granulocytes neutrophiles - gonflement du noyau à la destruction complète de la structure de la cellule, lorsque les contours ne sont pas visibles cytoplasme, et segments principaux sont informes, constitué de chromatine douce de maille. L'adhésion de ces cellules à des granulocytes neutrophiles peut être réglé que par la réaction à la peroxydase: la présence de granulés à vert-jaune ou brun dans le cytoplasme de la destruction.
Parfois, dans le liquide céphalo-rachidien trouvé granulocytes neutrophiles à noyau de pycnotiques sous la forme de morceaux de forme irrégulière hyperchromatique.
Granulocytes neutrophiles apparaissent dans le liquide céphalo-rachidien des hémorragies dans l'espace sous-arachnoïdien, les maladies inflammatoires du système nerveux, après des opérations neurochirurgicales. La présence de granulocytes neutrophiles dans le sang dans le liquide céphalorachidien indique une inflammation des méninges.
La prédominance des neutrophiles inchangés des signes d'inflammation aiguë.
Soudain l'apparition de pléocytose neutrophile vu dans la rupture de l'abcès sous la membrane du cerveau.
Lorsque l'abcès, Situé profondément dans le tissu cérébral, habituellement observé exprimé pléiocytose doux avec une prédominance de lymphocytes.
Lorsque l'atténuation de l'inflammation dans le liquide céphalo-rachidien semble formes dégénérées de granulocytes neutrophiles.
La présence de neutrophiles altérées et inaltérées est caractéristique du processus inflammatoire en cours. Il doit être pris en compte, que granulocytes neutrophiles non modifiés apparaissent dans le liquide céphalo-rachidien en mélange de sang frais, dans de tels cas, la définition corrective cytose.
Granulocytes éosinophiles
Granulocytes éosinophiles dans des échantillons de liquide céphalo-rachidien natives avec d'autres cellules se différencient par la présence d'un grand brillant grain caractéristique, remplir le cytoplasme. Les cellules avec noyau bipale rares, forme mononucléaires souvent observé. Morphologie dans les granulocytes éosinophiles tachées mêmes, dans le sang. Les fluides souvent trouvés granulocytes éosinophiles détruits céphalo-rachidien.
Contenu de granulocytes éosinophiles dans le liquide céphalo-rachidien à des distances de cysticercose 1 à 46%.
La présence d'une méningite comme une complication de l'arachnoïdite tsistitserkoznogo est accompagnée d'une pléocytose neutrophile et une diminution du nombre de granulocytes éosinophiles. Pour abstsedirovaniya bulle échinococcose dans le cerveau caractérisée par la présence dans son contenu de neutrophiles et éosinophiles granulocytes, qui sert une fonction auxiliaire dans la différencier de l'abcès. Parfois, un grand nombre de granulocytes éosinophiles peuvent être trouvées dans le contenu des kystes des tumeurs du cerveau et la moelle épinière (névrome, kraniofaringiome, épendymome, des métastases du cancer du cerveau). L'augmentation marquée du nombre de granulocytes éosinophiles dans le liquide céphalo-rachidien peut être observée après ventriculaire tsisternoskopii.
Après la suppression des tumeurs cérébrales avec plaie actif plaie chirurgicale augmente le nombre de granulocytes éosinophiles, qui peut être considéré comme une réaction allergique locale au traumatisme des méninges et l'absorption des produits de dégradation tissulaire.
Les cellules modifiées et des cellules d'ombre
Merci de propriétés cytolytiques des cellules du liquide céphalorachidien, qu'il contient pendant une longue période, ne conserver que les contours du cytoplasme et des noyaux de résidus. Pour déterminer leur affiliation morphologique est pas possible. Dans la plupart des cas, ces changements sont soumis à des granulocytes neutrophiles, parfois ce sont les cellules de tumeurs malignes. Facile à subir une cytolyse cellules arachnoïde et ventricules épendymales.
basophiles du tissu se trouvent dans le liquide céphalo-après neurochirurgie.
Les cellules arachnoïde dans le liquide céphalo-rachidien
Cellules arachnoïde (arahnoэndoteliya) - Une couche unique de cellules de l'épithélium, ils peuvent être différenciées comme un nombre de cellules de la chambre de comptage, et dans colorées, préparé à partir de la boue liquide céphalo-rachidien. Cette relativement grande forme irrégulière cellules ou arrondie avec un noyau relativement petit circulaire ou ovale, d'un emplacement central.
Les noyaux des cellules sont colorés hypochrome, et le cytoplasme - pale- ou de couleur gris-bleu, il est donc souvent contours irréguliers et contient des inclusions de particules phagocyté (gouttelettes de graisse, éléments cellulaires, vacuole). Le cytoplasme des cellules de l'arachnoïde souvent détruite, dans de tels cas sont détectés caractéristique des fragments de noyau et le cytoplasme. Chromatine a noyaux de melkopetlistuyu ou structure de grain, parfois beaucoup d'un nucléole bleu. La taille des noyaux de 5 à 19 m.
La présence dans le liquide céphalorachidien de cellules unitaires de l'arachnoïde est pas encore de preuves de pathologie, que ces cellules bordent l'espace sous-arachnoïdien et, exfoliant, tomber dans le liquide céphalo-rachidien. Augmenter le nombre de cellules observées dans le arachnoïdite arachnoïde, cerveau cysticercose. Le contenu des kystes arachnoïdiens se trouvent dans des endroits séparés cellules arachnoïde et leur symplaste comme des groupes de noyaux de différentes tailles et intensité de la couleur, entouré d'un cytoplasme pâle sans limites claires entre les cellules.
Les cellules du plexus choroïde
A partir des plexus choroïdes des ventricules dans le liquide céphalo-rachidien peut entrer polygonal, arrondie, parfois grande cylindrique (15-19 M) cellule. Petit (4-5 M) Situé dans le centre du noyau, ou excentrée, hyperchromatique, cytoplasme éosinophile, intensément coloré. Dans le cytoplasme des cellules de plexus choroïdes a granulation, parfois sous la forme d'inclusions et de bouquets, taille 1-3 microns, forme ronde ou irrégulière, couleur verdâtre ou bleuâtre. Certaines cellules peuvent être détectés ou capturé par les cellules de globules rouges vacuolaire.
Les cellules du plexus choroïde est le plus souvent trouvé dans le liquide à partir des ventricules du cerveau.
Les cellules épendymaires ventriculaire liquide céphalo-rachidien dans le cerveau
Les cellules épendymaires ventriculaire liquide céphalo-rachidien dans le cerveau, obtenu par ponction lombaire, Il est facilement détruite dans le processus de cuisson et de coloration. Dans frottis colorés qu'ils ont le genre d'éducation, comprenant des noyaux ovales avec structure fine. Dans certaines cellules, cytoplasme préservé entoure le noyau sous la forme d'une frontière étroite.
Le fluide à partir des ventricules du cerveau sont des cellules épendymaires les plus courantes avec la structure préservée, morphologiquement ressemblent aux cellules de l'arachnoïde, mais le noyau de leur pâle peint et ont plus tendre, une répartition homogène de la chromatine. Les pôles des cellules épendymaires ovales ont souvent souligné, Le cytoplasme a une teinte grisâtre. Il sont situés séparément et de grandes grappes de cellules, qui ne peut être déterminé par les limites des cellules individuelles.
