Des procédés pour la détection de Leishmania dans le raclage des tissus affectés par l'isolement de culture pure

Lorsque l'ensemencement grattage du tissu affecté du patient à un milieu nutritif spécifique Leishmania multiplier et ils peuvent être détectés par microscopie.

Réactif

Среда W.W.W. pour la culture de Leishmania (14 g d'agar, 6 g de chlorure de sodium, sur 150 ml de sang de lapin défibriné, prise directement du cœur avant de préparer moyenne, 900 ml d'eau distillée). Dans l'eau distillée, on a ajouté du chlorure de sodium et d'agar. Le ballon contenant le milieu a été chauffé jusqu'à fusion complète de l'agar, de 20 à 30 min et stérilisé dans un stérilisateur à vapeur à 147,1 kPa (15 à).

Refroidie à 56 ° C agar ajouté du sang de lapin défibriné stérile, sous agitation en faisant tourner le ballon et rempli dans pipette stérile 4 tubes ml. gélose au sang de flacon au cours de distribution est un bain d'eau à une température 58 ° C. Les tubes avec les conseils de moyennes.

Après solidification de la gélose, ils sont placés dans un incubateur pendant une journée à 37 ° C pour le contrôle de stérilité et recevant le condensat liquide. Si elle est produite est insuffisant, avant le semis dans des flacons stériles, vous pouvez ajouter à propos 1 Un ml des solutions suivantes: 0,85 % le chlorure de sodium, 1 % solution de peptone, Solution de Hanks, hydrolysat de lactalbumine ou d'autres supports de nutriments à des concentrations isotoniques.

Méthodes de détection de Leishmania dans des raclures de tissus affectés par l'isolement de la culture pure

Lorsque vous sélectionnez une culture suivre attentivement les règles de stérilité. La zone de test de la peau est nettoyée avec un coton-tige, humidifié 70 % alcool.

Après évaporation de l'alcool de l'extrémité pointue d'un scalpel incision ophtalmique longueur tuberculeux stérile de 2-3 mm. Du fond de la coupe avec pipette Pasteur stérile ne tissu raclage. La baisse résultant de liquide séreux sanglant a été transféré à un tube à essai avec l'environnement. La manipulation est effectuée plusieurs fois, Matériel de semis à chaque fois un nouveau tube. Les bouchons d'oreilles inclus dans la paraffine ou les mettre capuchons en caoutchouc et placés dans un incubateur à 22-24 ° C.

Évaluation des résultats

Les cultures sont examinées au microscope sur une base quotidienne pour identifier l'agent causal. Explorez médicaments indigènes, préparé par le procédé de gouttes écrasées, la lentille 40×40. Les résultats sont considérés comme semis négative, si dans 40 jours pathogène n'a pas été trouvé. Les cultures sont allongées Leishmania (10-12 Microns avec câblage).

Application de la méthode de culture est plus utile quand tuberculoide forme de leishmaniose, diagnostic que d'autres méthodes peuvent être moins efficaces.