Méthodes de détection de Leishmania dans frottis de moelle osseuse

Les réactifs pour la détection de Leishmania

• L'alcool méthylique, ou d'alcool éthylique absolu, ou un mélange de Nikiforov (mélange de quantités égales d'éthanol et d'éther absolu).
• Фосфатный буфер pH 6,9-7,1, pour la préparation de ce qui est mixte 40 ml KH₂RO₄ (9,078 g de matière sèche KH₂RO₄ dans 1 litre de solution) et 60 ml de Na₂PHO₄ (11,876 g de matière sèche 1 litre de solution).
• Azureozin Romanovsky.

Méthodes de détection de Leishmania dans frottis de moelle osseuse

De ponctuée de moelle osseuse immédiatement après avoir pris soin, ne pas écraser ou déformer les cellules,préparer les frottis minces. Si ponctuée dense, faire empreinte. Lorsque le sang significative ponctuée de lui isolé sur la vitre un peu grumeaux blanchâtres de graisse, si elles se distinguent, et de les préparer frottis.

Le frottis préparé est séché à l'air, puis fixe, comme les frottis de sang. Frottis fixés secs peuvent être conservés pendant plusieurs jours.

Dans frottis coulé dilué dans du tampon coloration Romanovsky (environ 3-5 ml) et laissé pour 30 50 m. Après coloration rincée avec de l'eau distillée, on sèche et on les examine au microscope avec système d'immersion.

L'évaluation des résultats de la détection de Leishmania dans frottis de moelle osseuse

Au milieu de la maladie Leishmania habituellement trouvés dans le ponctuée de moelle osseuse en quantité significative et, par conséquent, ils sont faciles à trouver. Toutefois, au stade précoce de la maladie et chez les patients traités pour, pour identifier l'agent causal, Elle exige une vision à long terme de tous les frottis (pas moins 40 m).

Leishmania trouvé dans les macrophages ou extracellulaire que les cellules arrondies ou risovidnyh 3-5 microns de diamètre. Le cytoplasme est coloré couleur gris-bleu, et le noyau - dans un violet rougeâtre. Dans le cytoplasme, kinétoplastes situés - en forme de tige ou de l'éducation arrondis, noyau intensément colorée.

Pour Leishmania parfois prendre des plaquettes ou des "éclats" de cellules (Komocki citoplazmy, contenant des matières nucléaires), trouvé dans les frottis de moelle osseuse, micro-organismes étrangers (par exemple,, les algues unicellulaires), pris au piège dans un frottis pendant la peinture. Le frottis coloré sont plus difficiles, de Leishmania (cytoplasme bleu foncé et le noyau d'écarlate), kinétoplastes manquantes.