Anémie, associée à une carence en acide folique

Quelle que soit la raison carence en acide folique anémie est caractérisée par l'apparition dans les mégaloblastes de moelle osseuse, destruction médullaire erythrokaryocytes, patsitopeniey, macrocytose et hyperchromie les globules rouges et, parfois, les troubles mentaux -.

Folique (pteroilglutaminovaya) acide (vitamine B₉) Il se compose de trois composants:

• cycle ptéridine;
• l'acide p-aminobenzoïque (constituent ensemble l'acide pteroievuyu);
• acide glutamique.

Le poids moléculaire de l'acide folique - 441. L'acide folique est actif dans la forme de dérivés de l'acide tétrahydrofolique. Teneur en acide folique sous différentes formes dans le corps humain est d'environ 5-10 mg. Stocks en violation de son chiffre d'affaires dans le corps peuvent être épuisées plus 4 du mois.

L'exigence quotidienne d'acide folique est 100-200 microgrammes, Grossesse, l'anémie hémolytique, il augmente plusieurs fois.

Le montant total de l'acide folique dans le régime avec la pleine puissance de 500-600 microgrammes par jour. Folate - folates contenu dans des quantités considérables dans le foie, levure, spinelle, viande. Plus 50 % acide folique, dans Restauration, Il peut briser lorsqu'ils sont cuits.

L'acide folique est absorbé dans l'intestin grêle supérieur. La capacité de l'intestin à absorber l'acide folique est très supérieure à l'exigence quotidienne.

L'acide folique participe à la synthèse de bases pyrimidiques et puriques,, avec méthylcobalamine - la synthèse de timidinm nofosfata uridinmonofosfata. Coenzymes folate Plus impliqué dans un certain nombre de réactions. En particulier, tétrahydrofolate participe à la synthèse de l'histidine de l'acide glutamique.

L'étiologie et la pathogenèse de l'anémie pendant la carence en acide folique

La carence en acide folique, ainsi que le déficit de la cobalamine, Elle conduit à la mise au point de l'anémie mégaloblastique.

Malabsorption du folate observé chez les individus, résection de l'intestin grêle, en particulier jéjunum, ainsi que dans le long terme prenant des anticonvulsivants tels que la diphénylhydantoïne (difenina) et le phénobarbital (luminale). L'absorption de l'acide folique est rompu lorsque la carotte et la maladie cœliaque. La carence en acide folique, ainsi que le déficit de la cobalamine, observée à syndrome de l'anse borgne. Décrit de rares cas de troubles héréditaires de transport de l'acide folique à travers la paroi intestinale et dans le liquide céphalo-rachidien. Absorption d'autres substances sans souffrir.

La carence en acide folique chez les nouveaux nés observé dans prématurité, violation de l'absorption intestinale, Le lait de chèvre Fed, contenant une petite quantité d'acide folique.

Une malabsorption importante d'acide folique peut survenir chez les patients, alcooliques.

Augmentation de la consommation d'acide folique pendant la grossesse peut conduire à une carence en acide folique, Cependant, dans les pays développés aujourd'hui, il est rare. La carence en acide folique chez les femmes enceintes se produire lorsque une mauvaise nutrition, la présence d'une anémie hémolytique, utiliser une grande quantité d'alcool avant la grossesse.

Les manifestations cliniques de la carence en folate

La carence en acide folique chez les enfants et les jeunes femmes. Dans le même temps, les patients se plaignent de faiblesse générale, vertiges. Contrairement à une déficience en cobalamine mal de la langue rarement observée. Paresthésie, et d'autres signes de funiculaire myélose manquantes. Sclérotique souvent ikterichnost.

A la différence du déficit de la déficience en cobalamine de l'acide folique est rarement observée gistaminoupornaya Akhil, gastratrophia, bien que la diminution de la sécrétion gastrique est souvent.

Pour la carence en folate, ainsi que pour la déficience en cobalamine, caractérisée par l'apparition dans le sang périphérique de macrocytose, megalocytes et mégaloblastes, la présence de l'anémie hyperchrome, la réduction du nombre de réticulocytes, plaquettes et leucopénie avec changement neutrophile à gauche et à droite. Dans la moelle osseuse - mégaloblastes.

Les changements dans le système nerveux sont différents des manifestations à B₁₂-l'anémie par carence.

Prouvées, que les personnes souffrant d'épilepsie, La carence en acide folique conduit à de fréquentes attaques, à leur plus grande sévérité. Ceci est particulièrement important en raison du fait, que la prise anticonvulsivants peut provoquer un syndrome de malabsorption du folate. D'après la littérature, chez les personnes atteintes de schizophrénie carence en acide folique provoque exacerbations, des symptômes plus sévères et un traitement moins efficace.

Le diagnostic différentiel de la carence en cobalamine et acide folique

Pour le diagnostic différentiel de la déficience en cobalamine et l'acide folique est utilisé Procédé de dosage radio-immunologique pour la détermination de l'acide folique dans le sérum et en particulier dans les érythrocytes. Le contenu de cobalamine est déterminée par la méthode microbiologique. Comme un organisme d'essai utilisé comme Streptococcus faecalis et Lactobacillis casei. Normalement, la teneur en acide folique dans les fourchettes de sérum sanguin, Selon les auteurs, en utilisant des méthodes de recherche différentes, de 3 à 25 ng / ml, et des érythrocytes - du 100 à 425 ng / ml.

Dans une carence en acide folique diminue à mesure que le niveau de sérum, et dans les érythrocytes. Teneur en acide folique d'au déficit dans le sérum sanguin se lève souvent, et les érythrocytes peuvent parfois être réduits, bien que la baisse, généralement, un petit.

Pour le diagnostic de la déficience en acide folique est également utilisé Procédé de charge d'histidine (15 g), puis définir le contenu de l'acide dans le formiminglutaminovoy d'urine. Normalement, la majeure partie des formes d'histidine acide glutamique. Avec la production d'urine 1-18 mg d'acide formiminglutaminovoy. Au carence en acide folique pour 8 heures après son introduction dans le corps est libéré à partir de l'urine 20 à 1500 acide formiminglutaminovoy mg. Un nombre important d'acide formiminglutaminovoy excrétée dans l'urine après l'administration de l'histidine en personnes, traités avec le méthotrexate. Au carence en cobalamine, la cirrhose du foie l'excrétion urinaire de l'acide augmente formiminglutaminovoy, dans une moindre mesure, qu'avec un déficit d'acide folique. Les niveaux normaux de urinaires méthylmalonique teneur en acide augmente formiminglutaminovoy histidine acide après avoir reçu la preuve de carence en acide folique, au lieu de la cobalamine.

Il permet de différencier ces deux états et étude radionucléide. Au carence en cobalamine, Elle implique une violation de la sécrétion du facteur intrinsèque, altération de l'absorption de cyanocobalamine marqué, une carence en acide folique, il est absorbé correctement.

Au carence en acide folique, de son introduction dans le corps conduit à un taux plus élevé de réticulocytes, alors que l'injection de la cyanocobalamine (dérivés) inefficace. La carence en acide folique méthylcobalamine augmente le niveau de réticulocytes.

Définition neutrophiles indice de segmentation

Comptez le nombre de neutrophiles, avec 4 segment et plus (Total 200 cellule). Déterminer le pourcentage de cellules, avec 5 segments et plus par rapport à la quantité de cellules, avec 4 segment. L'indice est déterminé par la formule:

IS =(KS (5 et plus))/KS(4);

où IC - indice de la segmentation;

KS (5 et plus) - Le nombre de polynucléaires neutrophiles (sur 200 cellule), dans lequel le nombre de segments est égal à 5 ou plus;

KS (4) - Le nombre de polynucléaires neutrophiles, dans lequel le nombre de segments est égal à 4.

Normalement, les plages cet index 2,5 à 25 %. Où, quand il dépasse 30 % (vibration 120%), Vous pouvez parler de neutrophiles hypersegmentation. Il observe une carence en acide folique, metilkoʙalamina, et urémie.

Détermination de l'acide méthylmalonique dans l'urine par Giordio et Plaud

Réactifs.

1. La résine échangeuse d'ions Dowex-ZX4 (forme chlorure, 200-400 Mesh). La résine a été lavée avec cinq volumes d'eau distillée 3 fois, a été mis en suspension dans deux volumes d'eau distillée et stocké dans une boîte obscurité à 4 ° C.

2. Une solution de para-nitroaniline 0,075 % préparée en dissolvant 37,5 réactif mg 500 ml 0,2 M solution d'acide chlorhydrique. Conserver dans un pot sombre, Elle est restée stable pendant plusieurs mois à la température ambiante.

3.Un tampon d'acétate (pH 4,3) fait à partir de 1 L'acétate de sodium M et 1 M solution d'acide acétique.

4.Diazoreaktiv: 4 ml 0,5 % une solution de nitrate de sodium a été mélangé avec 15 ml para-nitroaniline. Le mélange a été placé dans un réfrigérateur à 4 ° C et on a ajouté la solution refroidie, 4 ml 0,2 L'acétate de sodium M. Réactif stable à des températures 4 ° C pendant un jour.

5.Standard 0,05 M solution d'acide méthylmalonique: 295 acide méthylmalonique mg sont dissous dans 50 ml d'eau.

Méthode

L'urine a été recueillie dans une bouteille en verre et congelé jusqu'à ce que l'étude. Pour étudier la partie de charge de l'urine (20- 25 ml), décongelé, centrifugé, et le surnageant a été recueilli en utilisant une solution diluée d'hydroxyde de sodium ou d'acide chlorhydrique pour ajuster le pH 6,5.

Hauteur de la colonne chromatographique 20 cm et un diamètre 1 cm a été rempli avec de la résine Dowex-ZX4. La couche de résine doit être à l'intérieur 3 cm. Est passée à travers la résine 5 ml d'urine, lavé avec de l'eau distillée (2 × 50 ml à un débit de pas plus de 15 ml 1 de). Acide méthylmalonique peut être éluée de la résine 20 ml 0,1 M solution d'acide chlorhydrique. Plus loin 2 ml d'éluat ont été mélangés avec 3 ml 1 M de tampon d'acétate, pH 4,3 dans un tube à essai avec un bouchon en verre (15×2cm). Au mélange est ajouté 3 ml diazoreaktiva froid, dans lequel le pH est élevé à 4,0. Le mélange a été chauffé dans un bain d'eau à une température 94 ° C 3 min et 2 ml 3 Solution d'hydroxyde de sodium M. Le tube a ensuite été retiré du bain d'eau, bouchés et le contenu agité. Le mélange a été refroidi à la température ambiante pendant 10 min et à une photométrique 620 nm dans une cuvette avec une longueur de trajet 1 cm.

A titre de témoin, un mélange de, consistant en 2 ml 0,1 M solution d'acide chlorhydrique, 3 ml et diazoreaktiva 3 ml de tampon d'acétate. Solution étalon d'acide méthylmalonique est constituée des mêmes composants et 0,02 ml 0,05 M solution d'acide méthylmalonique. L'absorbance de ces solutions ont été mesurés dans les mêmes conditions.

Contenu de l'acide méthylmalonique (mg) par unité de volume de l'urine (1 l) déterminé par la formule:

(EST_Échantillon-EST_contrôle)/(EST_standard-EST_contrôle)*UN *((1000*J)/M)

où E - absorbance de divers échantillons;

A - la quantité d'acide méthylmalonique dans un tube à essai standard, ml;

1000 - La quantité d'urine, pris pour la recherche, ml;

T - la quantité d'acide chlorhydrique, pris pour l'élution, ml;

M - le numéro de l'éluat, pris pour la recherche, ml.

Dans les conditions ci-dessus, la formule peut être simplifiée comme suit::

(EST_Échantillon-EST_contrôle)/(EST_standard-EST_contrôle)*236

Où, lorsque la quantité d'acide méthylmalonique dans l'urine est supérieure à 300 mg / l, devrait être re-mélangé avec éluat tampon acétate et diazoreaktivom, mais plutôt 2 ml d'éluat est conseillé de prendre 4- 10 fois plus faible et porter le volume à 2 ml 0,1 Solution d'acide chlorhydrique M. Lors du calcul de la dilution doit être considéré.

Normalement par jour avec la sortie de l'urine 0,6-4,7 mg d'acide méthylmalonique. Au manque de cobalamine excrétion quotidienne d'acide atteint méthylmalonique 294 mg. Normalement, la réception 10 g valine pas augmenter la clairance de l'acide méthylmalonique, déficience en cobalamine augmente l'excrétion d'acide méthylmalonique.

Détermination de l'acide méthylmalonique dans l'urine par Green

Réactifs.

1. Éther.
2. Éthanol.
3. Une solution d'acide chlorhydrique 0,1 M.
4. Du sulfate d'ammonium.
5. Сильноосновная смола деацидит FF (200 engrener, forme chlorure).
6. Une solution de nitrate de sodium 0,5 % (poids / volume).
7. Une solution de para-nitroaniline (750 mg dissous dans 1 l 0,2 M solution d'acide chlorhydrique).
8. L'acétate de sodium 0,2 M.
9. Un tampon d'acétate 1 M, pH 4,3: mixte 1 Une solution d'acétate de sodium M et 1 M solution d'acide acétique dans le rapport 16,35:33,9.
10. Une solution aqueuse d'hydroxyde de sodium 3 M.

UNE. L'acide méthylmalonique solution standard: 100 mg dissous dans 100 ml d'eau, stocké dans le réfrigérateur.

B. Travailler acide méthylmalonique norme: solution étalon diluée dans 20 temps 0,1 Solution d'acide chlorhydrique M (1 mL de la norme et 19 ml d'acide chlorhydrique). Cette quantité d'équivalent acide méthylmalonique 100 acide méthylmalonique mg 1 conditions d'essai l d'urine.

Pour la préparation du mélange diazoreaktiva 4 ml 0,5 % une solution de nitrate de sodium et 15 ml para-nitroaniline. Le mélange a été placé dans un bain de glace et ajouter 4 ml 0,2 L'acétate de sodium M.

Méthode.

L'urine a été recueillie pendant une journée, mesuré son volume et 10 ml d'acidifié 1 Solution M d'acide sulfurique à un pH de 2,0 ou légèrement au-dessous. Du sulfate d'ammonium a été ajouté à saturation. Le mélange a été placé dans une ampoule à décanter et on l'extrait trois fois avec de l'éther et de l'éthanol dans un rapport de 3:1. Pour éviter la formation du mélange extrait en émulsion utilisé en excès.

L'extrait a été passé à travers une petite colonne de Chromatographie (1 – 1,5 cm de diamètre), terminé 5 résine ml. La colonne a été lavée 50 ml d'eau distillée. Acide méthylmalonique élue 0,1 Solution d'acide chlorhydrique M. Après élution choisi 2 ml éluat, W est ml de tampon acétate ajouté et 3 ml diazoreaktiva.

Après mélange, le tube a été placé dans un bain d'eau à une température 95 ° C 3 m. On ajoute ensuite 2 ml 3 Hydroxyde de sodium M et une fois tube fermé bouchon pour minimiser le contact avec l'air. Après refroidissement, l'absorbance a été mesurée à la longueur d'onde 620 leur. Pour l'ébauche au lieu d'utiliser l'éluat 2 ml 0,1 M solution d'acide chlorhydrique, et pour la solution étalon - 2 ml d'étalon de travail.