El examen microscópico del líquido cefalorraquídeo
Definición de Citoza
En el líquido cefalorraquídeo de las personas sanas contiene una cantidad muy pequeña de células. Significación clínica generalmente tienen leucocitos (linfocitos). A la cuenta de leucocitos no impidió que eritrocitos, destruyen no disuelto agregando el líquido cefalorraquídeo 1/10 parte del ácido acético con fuksinom. Células de âdrosoderžaŝie tinción de fucsina en rojo. Para colorante de leucocitos utilizando reactivo de Sansón (mixto 30 ml de ácido acético glacial, 2 fenol líquido ml, 2 Fucsina de solución ml alcohol 1 : 10 y añadir 100 ml de agua destilada). El reactivo es estable, bueno los colores las células y dentro de unas horas les impide citólisis.
Solución aplicada, que comprende 5 ml 10 % ácido acético y 0,1 g metilvioleta. Es menos resistente, células de color azul.
Como resultado de propiedades citolíticas del líquido cerebroespinal, contar el número de células inmediatamente después de su toma de posesión de. Medida de líquido en el tubo gotas o micropipeta en proporción 10 partes del líquido cefalorraquídeo y 1 parte de la solución colorante y dejar de 10-25 m de la celda de pintura. Para la cría, se puede utilizar el mezclador para leucocitos. Líquido cefalorraquídeo células rápidamente se adhieren a las paredes de tubos, Por lo tanto, líquido, situado en vitro, antes de la examinación es necesario revolver bien movimientos rotacionales entre las palmas.
Para calcular el citoza utilizado cámara de Fuchs-Rosenthal. Cálculo de la producción a través de la red a través de 5 minutos después de llenar las cámaras de. El número de células en la 1 viene determinada por la fórmula
X =((A) * 11)/(3.2*10)
donde X es el número de células en la 1 l; A es el número de células, mira en la malla de superficie; 3,2 es el volumen de la cámara de; 11/10 -el grado de dilución.
Fabricación permite cuenta como una fracción, por ejemplo, 14/3, donde 14 se contó el número de células en la cámara de, 3 es una redonda figura cámaras de volumen. Cuando un gran número de células es suficiente para considerarlos en la misma mitad de la rejilla y duplicar el número. Con pleocitoze agudamente expresada (un aumento sustancial en el número de células) Está permitido contar las células en 16 plazoletas y multiplique el número resultante en 16.
En ausencia de una cámara, puede utilizar el Rosenthal Fuchs la Gorâeva de la cámara de cuentas con una capacidad significativamente menor, por lo que cuenta con células en al menos tres plazas, calcular la media aritmética y multiplicar a 1,2. Multiplicador de 1,2 se obtiene de la fórmula
X =((A) * 11)/(0.9*10)
Dónde está la capacidad de la cámara 0.9, 11/10 -el grado de dilución.
Cuando recuento de células en líquido cefalorraquídeo no disuelto a las primeras gotas, derivadas de la aguja, en la cámara y definir el número de células de Rosenthal Fuchs, como se indicó anteriormente.
Normalmente, el número de células (linfocitos) en 1 Cefalorraquídeo MCL de los ventrículos del cerebro y el cerebro mozžečkovo el tanque es de 0, 1, y en líquido, Obtenido de una punción lumbar, 2-4.
Niños menores de tres meses en 1 MCL cerebroespinal se encuentra hasta a las células de 20-23, hasta un año es de 14-15, hasta por dos años, 11-14, de dos a cinco años: 10-12, de cinco a siete años-8-10, siete a diez años: 6-8, más de diez años-4-5.
Cuando la meningitis, abscesse y cerebro el número de tumores de las células en el líquido cefalorraquídeo aumenta.
En el estudio de líquido cefalorraquídeo hemorrágico en algunos casos es necesario establecer su verdadera citoz. Para este uso Método de Friedman: aumento de líquido hemorrágico con reactivo de Sampson para determinar citoza y izotoniceski solución de cloruro de sodio para contar el número de glóbulos rojos 1 Cefalorraquídeo MCL.
Por Ejemplo, el número de células en la 1 MCL es 20, el número de glóbulos rojos, 3600. El número de eritrocitos y leucocitos en la sangre del paciente a aprender a partir del análisis global, a cabo antes de la punción lumbar. Por Ejemplo, en 1 sangre l 4 200 000 eritrocitos, 7000 leucocitos. De aquí uno tiene a leucocito 4200000/7000 = 600 gr.
Para obtener los verdaderos valores citoza conforman la ecuación:
en 600 glóbulos rojos- 1 Leucocito;
en 3600 eritrocitos leucocitos-X, Consecuentemente,
X = 3600/600 = leikocitov 6.
El verdadero citoz de líquido cefalorraquídeo 20-6 = 14 células en 1 l.
Aplicación de este método es limitada, porque con la adición de la sangre líquido cefalorraquídeo no es adecuado para dicho estudio.
Determinación del número de glóbulos rojos en el líquido cefalorraquídeo se encuentra para establecer la severidad de la condición del paciente con krovoislianiah intracraneal.
En la presencia de 1 2000-5000 μl de eritrocitos cerebroespinal de color de rosa, 900— 1000 eritrocitos sólo es ligeramente opalesciruet. En líquidos incoloros que pueden ser detectados por un contenido más bajo de los eritrocitos. Significado clínico de niveles del eritrocito subida en la dinámica.
Diferenciación de las células del líquido cerebroespinal se lleva a cabo en la cámara de cuenta en forma nativa y color.
A mayor aumento (ocular 10 x o 15 x, lente 40 x) contable cámara a prestar atención a la cantidad de células, forma, la ubicación y tamaño de granos, la presencia de inclusiones en el citoplasma. Fácilmente diferenciar linfocitos, granulocitos neutrófilos, macrófagos. Vale en el líquido cefalorraquídeo contiene solamente linfocitos.
Para especificaciones completas de la composición celular del líquido cerebroespinal es investigadas preparaciones teñidas. Células del líquido pintadas peor, que las células de la sangre. Hay varias maneras de colorear: por Rosina, Voznoj, Papanicolaou, Alekseev, May-Grunwald, Pappengejmu.
Definición de pleocitoza método de microscopia luminiscente
Para hojear la diapositiva poner un poco de líquido cefalorraquídeo y se mezcla con tinte flûorohromov (la mezcla de soluciones de agua-sal akridinovogo naranja y rodamina en cría 1:20000). Cocido de la droga examinada bajo microscopio de fluorescencia 2 ML en los rayos azul violeta del espectro visible, usando una combinación de filtros de excitación: FS 1-4, ESS 14-4, BS 8-2 y filtro bloqueo JS-1 con lente de immersionnym. Como neflûoresciruûŝego aceites de inmersión para la investigación utilizan dimetil ftalato (ortoftalevoj éster del ácido dimetil).
Sobre un fondo oscuro campo de visión polinukleary y los linfocitos son fácilmente identificables por el resplandor verde de citoplasma. Recuento de filas 100 célula, dado el número de linfocitos y granulocitos neutrófilos.
Los linfocitos Los granulocitos neutrófilos son diferentes desde el núcleo en la naturaleza (estructura glybčatoj con tonos naranja) y fluorescencia verde brillante.
Granulocitos neutrófilos tienen una estructura clara, sus corazones ilumina difusamente la cromatina, uniforme brillante- Verde. Citoplasma de amarillo- Verde, dispersa los gránulos rojo ladrillo.
En los casos de leve citoza nativa spinnomozgovu líquido y lodo centrífuga.
Luminiscencia microscópico examinación del líquido cerebroespinal es fácil hacer una conclusión acerca de nejtrofil′nom, Naturaleza linfocítica o polymorphically celular pleocitoza.
Características morfológicas de las células del líquido cerebroespinal
Los linfocitos
En el líquido cefalorraquídeo de las personas sanas encontraron linfocitos pequeños y medianos (1-2 en 1 l) talla 4-6 μm. Esta es una forma redonda las células con un núcleo de glybčatym grande y un citoplasma muy estrecho.
En limfoidnom pleocitoze (meningitis tuberculosa, cisticercosis) junto a pequeñas y medianas aparecen linfocitos grandes (8-9 M), De vez en cuando puede encontrar linfocitos con núcleos de división directos.
El número de linfocitos (junto con otras células) aumenta en el líquido cefalorraquídeo en tumores cerebrales, curso crónico de la meningitis. En las enfermedades neuroquirúrgicas aumento del número de linfocitos en el período postratamiento se produce tras el aumento en el número de granulocitos neutrófilos e indicativo de un resultado favorable.
Las células plasmáticas
Células plasmáticas en el líquido cerebroespinal puede ser detectadas solamente cuando los procesos inflamatorios a largo plazo en el tejido cerebral y las cubiertas del cerebro. Morfología de la célula de plasma es la misma, como en la sangre o médula ósea punteada.
Esta células redondeadas con èkscentričeski ubicado el núcleo e intensamente coloreado, citoplasma bazofylnoy. En algunos casos, su número puede llegar a 26%. Las células plasmáticas se encuentran también en el período postoperatorio y cuando la corriente lenta de procesos reparativos de las lesiones de cerebro.
Gistiocitы
En líquido cerebroespinal normal a veces se detectan como copias individuales.
En preparaciones teñidas histiocitos tienen un núcleo grande y citoplasma relativamente estrecho. La cantidad de células de 7 a 10 m, forma redondeada o irregular. Forma irregular lobulado o núcleo bobovidnoj, normohromnoe. Nucleolo visible en productos naturales con microscopía fazovokontrastnoj.
Cuando la meningitis tuberculosis en líquido cefalorraquídeo detecta un gran número de histiocitos, encuentra por separado y la acumulación, su citoplasma basófilo, pintado más intensamente.
Según los datos disponibles, algunos tipos de células pueden convertirse en histiocytes nejroglii. Un gran número de histiocitos en el líquido cefalorraquídeo en pacientes, sometidos a cirugía en el cerebro o la médula espinal (indica una reacción activa del tejido y cicatrización normal), y en individuos, sufre de meningitis y cisticerkozom en el lánguido durante el proceso inflamatorio. Cuando los tumores cerebrales con la germinación en el espacio podpautinnoe o ventricular de la pared histiocitos pueden aparecer en el líquido cefalorraquídeo junto con macrófagos y células modificadas, Lo que es característico para la aparición alrededor de la zona reactiva del tumor.
Los macrófagos
Los macrófagos se forman de una- y multi-core endotelio células de la aracnoides y monocitos. Elementos del endotelio del mater del aracnoide está separada de sincitiâ y se convierten en células redondeadas, movimiento de amebovidnym nuclear y penetrar en el líquido cefalorraquídeo.
Los macrófagos activa absorben y digieren las células y otros elementos, caer en el líquido cefalorraquídeo en procesos patológicos, que contribuye a su purificación. Inclusión en el citoplasma de los macrófagos fácilmente distinguido de la célula y en tinción de preparaciones.
Los macrófagos fagocitan eritrocitos, granulocitos neutrófilos destruido o no modificado, gotitas de grasa, cristales de gematoidina, etc.. A menudo el citoplasma de los macrófagos son las vacuolas de diferentes tamaños o una grande una vacuola, que ocupa casi el citoplasma todo, Este núcleo es desplazado a la periferia. En tales casos, la célula tiene un tipo de macrófago anillo cricoides.
Normalmente, faltan los macrófagos en líquido cefalorraquídeo. Aparición en citoze normal atestigua a hemorragia o proceso inflamatorio en el sistema nervioso central. Un gran número de macrófagos en el líquido cefalorraquídeo en el período postoperatorio indica un rescate activo (pronóstico positivo). Un pequeño número de macrófagos o falta de ella cuando se expresa pleocitoze — signo de pronóstico desfavorable.
Bolas de granulares – células espumosas
Bolas de granulares (células espumosas) los macrófagos son grandes con múltiples inclusiones de las gotitas de grasa en el citoplasma.
Se trata de células más redondeadas, fuksinom pintado en color marrón oscuro. Cuando procesamiento las bolas de tamaño de Sudán III líquido cefalorraquídeo están pintados en color naranja y rojo.
Detectado en el líquido cefalorraquídeo en caso de contacto con su líquido de quiste de diversa etiología, degradación del tejido de cerebro (junto con gotitas de grasa), a veces en el período postoperatorio, en algunos tumores de cerebro (kraniofaringiome, èpendimome, etc..). Si el tumor se encuentra cerca de los ventrículos del cerebro, las bolas granulares más a menudo se detectan en el líquido cefalorraquídeo de los ventrículos. La fuente de las bolas granuladas son mikrogliocity, así como oligodendrocitos, las células de las carcasas exteriores de los buques y aracnoides.
Granulocitos neutrófilos
Granulocitos neutrófilos en líquido cefalorraquídeo similar a nejtrofil′nymi sangre granulopitami, su citoplasma (en la cámara de contabilidad y los productos nativos) estirado a menudo o tiene una protuberancia (psevdopodii). Esta diversidad de células se produce en los primeros 10-15 minutos después del asimiento de líquido cefalorraquídeo e indica la preservación nejtrofil′ny- Capacidad de granulozitami de MI movimiento. Caracterizado por un núcleo segmentado, el número de cubos en que se extiende de dos a cinco; granulocitos neutrófilos bandas son bastante raros.
Cuando guarde el cambio neutrófilos granulocitos CSF antes de, que otras células. Granulocitos de núcleo Lisis o segmentos pueden ser convertido en redondeado, con contornos claros, el puente bien Unido; se convierten en una especie de gránulos separados. Neitrofilny granulocite, de que hay solamente un segmento de un núcleo redondeado, en apariencia se asemeja a un Normoblasto. Ya Está hinchada de granulocitos neutrófilos con contornos de segmentos, ocupando casi el citoplasma todo. En las preparaciones teñidas, es posible observar todas las etapas de la desintegración de los granulocitos neutrófilos, desde inflamación hasta la destrucción completa de las estructuras celulares, Cuando los contornos del citoplasma no es visible, y segmentos de núcleo amorfo, formado por cromatina suave rallado. Propiedad de las células nejtrofil′nym granulocitam sólo se puede instalar en reacción de la peroxidasa: la presencia de gránulos de color amarillo verdoso o marrón destrozado el citoplasma.
A veces en líquido cefalorraquídeo se encuentran con el núcleo de los granulocitos neutrófilos piknotičnym como una forma irregular trozos de giperhromnyh.
Granulocitos neutrófilos aparecen en líquido cefalorraquídeo hemorragia en el espacio podpautinnoe, enfermedades inflamatorias del sistema nervioso, Después de operaciones neuroquirúrgicas. La presencia de granulocitos Neutrophilic con las impurezas de la sangre en el líquido cefalorraquídeo indica inflamación de meninges.
El predominio de granulocitos no modificados indica un proceso inflamatorio agudo.
La repentina la aparición de pleocitoza de nejtrofil′nogo Cuando el absceso se rompe bajo la cáscara del cerebro.
En abscesse, situada en el tejido cerebral, comúnmente observado fuera de foco, pronunciado pleocitoz con predominio de linfocitos.
Cuando la pérdida de energía del proceso inflamatorio en el líquido cefalorraquídeo que aparecen degenerirovannye formas de granulocitos neutrófilos.
La presencia de granulocitos neutrófilos modificados y sin modificados es característico del proceso inflamatorio en curso. Debe tenerse en cuenta, que el granulocito neutrófilo no modificado aparece en líquido cefalorraquídeo con sangre fresca de impureza, en tales casos, debe definir un citoza correctivo.
Granulocitos eosinófilos
Granulocitos eosinófilos en muestras de líquido cefalorraquídeo de originaria de diferenciar con otras células por la presencia de una característica brillante manchas grandes, el citoplasma se llena. Las células con núcleo dos módulos son raras, más a menudo que no hay formas mononucleares. En la morfología de la muestra de color de èozinofil′nyh granulozitov es el mismo, como en la sangre. En el líquido espinal detectado más a menudo destruido granulocitos eosinófilos.
El contenido de èozinofil′nyh granulocitos en líquido cerebroespinal en cisticerkoze gamas de 1 a 46%.
La aparición de meningitis como complicaciones cisticerkoznogo arachnoiditis acompañado de la aparición de pleocitoza de nejtrofil′nogo y reducción de granulozitov de èozinofil′nyh. Para abscedirovaniâ èhinokokkovogo burbuja en el cerebro se caracteriza por la presencia en sus contenido y èozinofil′nyh granulocitos neutrófilos, sirve como un signo auxiliar en diferenciándolo de por. A veces puede encontrarse un gran número de granulozitov de èozinofil′nyh en el contenido de los tumores quistes del cerebro y la médula espinal (nevrinome, kraniofaringiome, èpendimome, Metástasis del cáncer al cerebro). Expresado por un incremento en el número de èozinofil′nyh granulocitos en líquido cerebroespinal pueden observarse después de cisternoskopii ventricular.
Después de la extirpación de tumores cerebrales con la herida curativo activa aumenta el número de granulozitov de èozinofil′nyh, Lo que puede considerarse como una reacción alérgica local a trauma y meninges decaimiento de inducción de productos de tejido.
Las células modificadas y las células de sombra
Gracias a las propiedades citolitičeskim de las células del líquido cerebroespinal, en el mismo tiempo, mantener sólo los contornos del citoplasma y los restos de núcleos. Determinar su accesorio morfológica no es posible. Más a menudo, tales cambios son objeto de granulocitos neutrófilos, A veces es las células de tumores malignos. Sometida fácilmente a las células zitolizu y aracnoides èpendimy ventrículos del cerebro.
Basófilos de tejido se encuentran en líquido cerebroespinal después de intervenciones neuroquirúrgicas.
Células de la aracnoide mater en el líquido cefalorraquídeo
Células de la aracnoide mater (arahnoèndoteliâ) es una sola capa de células epiteliales, pueden distinguir tanto en el cálculo de la citoza en cámara, y en preparaciones, hecho de lodo de líquido cefalorraquídeo. Este es un células bastante grandes irregular forma o redondeados, con relativamente pequeños redondos u ovales núcleo, un céntrico.
Los núcleos están pintados gipohromno, y el citoplasma es pálido- o color azul grisáceo, Ha irregular los bordes y a menudo contiene inclusiones fagocitado partículas (gotitas de grasa, elementos celulares, vacuolas). El citoplasma de las células de la aracnoide mater a menudo es destruido, en tales casos, detectados los desechos características de núcleo y citoplasma. Cromatina de los núcleos es de estructura granulada o melkopetlistuû, a veces notan un núcleo azul. La cantidad de núcleos de 5 a 19 m.
Presencia de células en el líquido cerebroespinal aún aracnoides es indicativa de patología, porque estas células línea el espacio podpautinnoe y, sluŝivaâs′, entrar en el líquido cefalorraquídeo. El aumento en el número de células de la aracnoides se observa en arahnoidite, cerebro cisticerkoze. En el contenido de arahnoidal′noj quistes detectados por separado situado células aracnoideas y su simplasty en forma de grupos de núcleos de diferente tamaño e intensidad de la coloración, rodeado de citoplasma pálido sin límites claros entre las células.
Las células del plexo coroideo
Del plexo coroides ventricular en el líquido cefalorraquídeo puede entrar poligonal, redondeado, a veces grandes cilíndricos (15μm 19) célula. Pequeño (4— 5 μm) situado en el centro del núcleo o èkscentričeski, hipercromáticos, Citoplasma eosinófilo, color intensamente. En el citoplasma de las células del plexo coroides tiene un tamaño de grano, a veces en forma de glybok e inclusiones, tamaño 1-3 micras, redondeadas o irregulares en forma, color verdoso o azulado. Algunas células pueden ser vacuolas detectadas o eritrocitos capturados.
Las células del plexo coroides que más a menudo se encuentran en el líquido de los ventrículos del cerebro.
Èpendimy las células de los ventrículos del cerebro en el líquido cefalorraquídeo
Èpendimy las células de los ventrículos del cerebro en el líquido cefalorraquídeo, obtenido por punción lumbar, destruye fácilmente durante la cocción y preparación de pintura. En un frotis coloreado que tienen de las entidades, que consta de un núcleos ovalados con estructura suave. En el citoplasma de algunas células conservadas rodea el núcleo como una franja estrecha.
En el líquido de los ventrículos del cerebro son más abundantes las células èpendimy con estructura conservada, morfológicamente se parecen a las células de la aracnoide mater, pero el núcleo de su pálido pintada y tienen un más suave, distribución homogénea de la cromatina. Oval de las células a menudo postes del èpendimy señalados, el citoplasma tiene un tono grisáceo. Satisfacer por separado situados jaulas y grandes acumulaciones de, que no puede ser determinado por los límites de las células individuales.
