Los métodos para la detección de Leishmania en el raspado de los tejidos afectados por el aislamiento de cultivo puro

Cuando la siembra raspando el tejido afectado del paciente a un medio nutriente específico Leishmania multiplicar y pueden ser detectados por microscopía.

Reactivo

Среда W.W.W. para el cultivo de Leishmania (14 g de agar, 6 g de cloruro de sodio, acerca de 150 ml de sangre de conejo desfibrinada, tomada directamente del corazón antes de preparar medio, 900 ml de agua destilada). En agua destilada se añadió cloruro de sodio y agar. El matraz que contiene el medio se calentó hasta fusión completa del agar, y 20-30 min esterilizado en un esterilizador de vapor de agua a 147,1 kPa (15 en).

Se enfrió a 56 ° C agar añadió sangre de conejo desfibrinada estéril, agitada girando el matraz y se introducen en pipeta estéril 4 tubos ml. Agar sangre durante Frasco dispensador es un baño de agua a una temperatura 58 ° C. Los tubos con las puntas medianas.

Después de la solidificación del agar, se colocan en una incubadora durante un día en 37 ° C para el control de la esterilidad y de recibir el condensado líquido. Si se ha producido no es suficiente, antes de la siembra en viales estériles, puede agregar sobre 1 Un ml de las siguientes soluciones: 0,85 % cloruro de sodio, 1 % solución de peptona, Solución de Hanks, hidrolizado de lactoalbúmina o otros medios de nutrientes en concentraciones isotónicas.

Los métodos de detección de Leishmania en los raspados de tejidos afectados por el aislamiento del cultivo puro

Al seleccionar una cultura siga cuidadosamente las normas de esterilidad. El área de ensayo de la piel se limpia con un algodón, humedecido 70 % alcohol.

Después de la evaporación del alcohol el extremo afilado de una incisión con bisturí oftálmica estéril tubérculo longitud de 2-3 mm. Desde el fondo de la herida con una pipeta Pasteur estéril no raspar el tejido. La caída resultante de líquido seroso-sangrienta se transfirió a un tubo de ensayo con el medio ambiente. La manipulación se lleva a cabo varias veces, material de siembra cada vez que un nuevo tubo. Tapones para los oídos embebidos en parafina o ponerlos tapones de goma y se colocan en una incubadora a 22-24 ° C.

Evaluación de los resultados

Los cultivos se examinan bajo un microscopio sobre una base diaria para identificar el agente causal. Explorar las drogas nativas, preparado por el método de gotas trituradas, la lente 40×40. Los resultados se consideran siembra negativo, si en 40 no se encontró día patógeno. Los cultivos son alargadas Leishmania (10-12 Micras con cableado).

Aplicación del método de cultivo es más útil cuando tuberculoide forma de leishmaniasis, diagnósticos que otros métodos pueden ser menos eficaces.