Los métodos para la detección de Leishmania en frotis de médula ósea

Los reactivos para la detección de Leishmania

• El alcohol metílico, o alcohol etílico absoluto, o una mezcla de Nikiforov (mezcla de cantidades iguales de éter y etanol absoluto).
• Фосфатный буфер pH 6,9-7,1, para la preparación de los cuales es mixta 40 ml KH₂RO₄ (9,078 g de materia seca KH₂RO₄ en 1 litro de solución) y 60 ml de Na₂PHO₄ (11,876 g de materia seca 1 litro de solución).
• Azureozin Romanovsky.

Los métodos de detección de Leishmania en frotis de médula ósea

De punteada de médula ósea inmediatamente después de tomar el cuidado, no aplastar o deformar las células,la preparación de frotis finos. Si punteada densa, hacer impronta. Cuando la sangre significativa en punteada de ella aislado en el vaso un poco de bultos blanquecinos de grasa, si son distinguibles, y prepararlos frotis.

El frotis preparado se seca al aire, entonces fijo, como los frotis de sangre. Frotis fijos secos se pueden almacenar durante varios días.

En frotis vierte diluido en tampón colorear Romanovsky (unos 3-5 ml) y se fue a 30 50 m. Después de la tinción se enjuagaron con agua destilada, se seca y se examinan bajo un microscopio con sistema de inmersión.

Evaluación de los resultados de la detección de Leishmania en frotis de médula ósea

En medio de la enfermedad de Leishmania generalmente se encuentran en la médula ósea punteada en una cantidad significativa y, por tanto, son fáciles de encontrar. Sin embargo, en la etapa temprana de la enfermedad y en los pacientes tratados para, para identificar el agente causante, Se requiere una visión a largo plazo de todos los frotis (no menos 40 m).

Leishmania encontrado en los macrófagos o extracelularmente como células redondeadas o risovidnyh 3-5 micras de diámetro. El citoplasma es de color de color gris-azul, y el núcleo - en un color rojizo-púrpura. En el citoplasma, ubicadas kinetoplasts - en forma de varilla o redondeados educación, núcleo intensamente coloreada.

Para Leishmania veces tomar las plaquetas o "fragmentos" de las células (Komocki citoplazmy, que contiene material nuclear), encontrado en los frotis de médula ósea, microorganismos extraños (por ejemplo,, algas unicelulares), atrapado en una mancha en la pintura. El frotis teñido son más difíciles, de Leishmania (citoplasma azul oscuro y núcleo de color carmesí brillante), kinetoplasts desaparecidos.