Estudio químico del líquido cefalorraquídeo
Las principales diferencias en la composición del líquido cefalorraquídeo y el plasma sanguíneo son que, en que el líquido está a punto 300 veces menos proteínas, significativamente menos colesterol, La glucosa y la más cloruros.
Químico composición de líquido cefalorraquídeo Refleja los cambios importantes, se producen en el sistema nervioso central.
La proteína en el líquido cefalorraquídeo
Normalmente, en el líquido de los ventrículos del cerebro contiene 0,12-0,2 g de proteína / L, del cerebro del cerebelo tsisterny- 0,1-0,2, desde el espacio subaracnoideo de la médula espinal - un 0,22 0,33 g / l.
Disminución o aumento de la proteína del líquido cefalorraquídeo Se indica un proceso patológico. El contenido promedio de proteína no da razón para negar la presencia de una lesión orgánica del sistema nervioso central, debido a posibles violaciónes de la proporción de fracciones de proteínas de líquido cefalorraquídeo. En la composición normal de la proteína se diferencia de la ausencia de líquido cefalorraquídeo y suero euglobulina presencia de facciones adicionales.
El estudio del origen de las proteínas del líquido cefalorraquídeo encontrado, casi 10 % no tienen similitud inmunológica con las proteínas del suero y se clasifican como proteínas específicas del SNC.
El aumento del contenido de proteínas en el LCR Es debido a alteraciones hemodinámicas del cerebro y el estancamiento de la sangre en los vasos del sistema nervioso central.
Fracción Prealbuminovaya en el líquido de los ventrículos del cerebro es 13 a 20%, de depósito de cerebro cerebelar - 7-13, un fluido, obtenido por punción lumbar,- 4-7 % contenido total de proteínas. Esta fracción de la proteína está ausente en el bloqueo de espacios del fluido cerebroespinal, puede ser enmascarada albúmina no siempre se asigna al más alto nivel de proteínas en el líquido cefalorraquídeo.
En los tumores cerebrales, y enfermedades inflamatorias del sistema nervioso central en el líquido cefalorraquídeo disminuye el contenido de fracciones finas (Albúmina, A'1- и a2-глобулинов) y el aumento de contenido de grueso (b- и c-глобулинов).
Para identificar alto contenido en el líquido cefalorraquídeo puede ser utilizado globulinas reacción Pandey, basado en la turbidez del líquido debido a la proteína de la coagulación influido fenol. La realización de este método de la gota de reacción permite que el líquido de prueba ahorro significativo, a menudo entregado al laboratorio en una cantidad muy pequeña.
Respuesta globulina aunque se utilizan en el diagnóstico de laboratorio, pero sólo dan una idea aproximada del contenido de proteína.
La cantidad de proteína en el fluido cerebroespinal se determinó como bien, en la orina, método Brandberg-Roberts-Stolnik o método colorimétrico usando ácido sulfosalicílico y sulfato de sodio.
La intensidad de la turbidez, formado por la adición de al ácido sulfosalicílico líquido cefalorraquídeo, proporcional a la concentración de proteínas.
En hemorrágica contenido de proteínas en el líquido cefalorraquídeo puede ser mejorada por la proteína plasmática. Tras la recepción del líquido cefalorraquídeo, la sangre de color, el paciente debe tomar la sangre del dedo a una solución de cloruro de sodio isotónica tubo y para obtener, manchada algo más intensamente, que el líquido. Los tubos con líquido cefalorraquídeo y la sangre debe ser el mismo grosor y color de cristal. El color de los niveles de líquido en el comparador, añadiendo con precaución a sangre diluida solución de cloruro sódico isotónica, a continuación, se centrifugó y la cantidad de proteína en una transparente incoloro sobre- líquido sedimentaria. La verdadera proteína en el líquido cefalorraquídeo se obtiene restando la cantidad de proteína en la sangre diluida a partir de la cantidad de proteína en el líquido hemorrágica. Metodología Esto no es muy precisa, Se utiliza en casos, Cuando el líquido cefalorraquídeo hemorrágico se vuelve incolora después de la centrifugación.
El contenido de proteína de los aumentos de líquido cefalorraquídeo en la violación de la hemodinámica, inflamatorio, después de las operaciones en el sistema nervioso central, así como en los tumores del cerebro y la médula espinal. El marcado aumento en la cantidad de proteína se observó en la estasis venosa en conjunción con la violación de la circulación del líquido cefalorraquídeo. En tales casos, alta en proteínas cytosis Normal - disociación de células de proteínas. En conjunto con el que xantosis característica Síndrome Froana, que se observa en los tumores del cerebro y la médula espinal. La reducción de la cantidad de proteína en el fluido cerebroespinal está marcado en su hipersecreción e hidrocefalia.
Reacción Nonne-Apelt dlya globulina específica. Su principio consiste en la precipitación de las globulinas en presencia de solución de sulfato de amonio saturado. La reacción se consideró positiva cuando el contenido en el líquido cefalorraquídeo 0,05 % globulinas y más. Se da una indicación del contenido de las globulinas en el líquido cefalorraquídeo.
Número globulina aumentó significativamente en los procesos inflamatorios y degenerativos crónicos en el sistema nervioso central (meningitis, meningoэncefalit, parálisis general, esclerosis múltiple). Al aumentar el nivel de albúmina, globulinas de la relación de globulina rota de líquido cefalorraquídeo. Normalmente varía entre 0,2-0,3. Para obtener una imagen más precisa de la fracción proteica de líquido cefalorraquídeo debe definirlos mediante electroforesis u otros métodos cuantitativos.
Estudio de la composición de proteínas de líquido cefalorraquídeo por electroforesis - Un proceso que consume tiempo, que el estudio de la composición de suero de la sangre. En el líquido cefalorraquídeo de 200-400 veces menos proteína, por lo tanto pre-concentrado (concentrado) por ultrafiltración a vacío, diálisis frente a dextrano o goma árabe, y la evaporación al vacío. Sin embargo, el engrosamiento del líquido cefalorraquídeo puede ser la pérdida de fracciones de proteína o identificar artefactos. En relación con esta determinación tiene, sin duda, proteinograma ventaja líquido cefalorraquídeo mediante electroforesis en gel de agar o de poliacrilamida.
La electroforesis en gel de agar en sana fluido cerebroespinal humano aislado γ2– и c3-hlobulynы.
Un método más sensible de fraccionamiento de proteínas del líquido cefalorraquídeo, que no requiere engrosamiento, Es эlektroforez de poliakrilamidnom Gelè, permitiendo identificar las fracciones de proteína de 30-40, principalmente en la γ-globulina.
El método de inmunoelectroforesis detectado en el fluido cerebroespinal de inmunoglobulina A, METRO, GRAMO, contenido es 3-4 veces menor, que el suero: 2,65 мг / л IgG, 2,05 mg / l IgA y 0,24 мг / л IgM.
Composición fraccional de las proteínas del líquido cefalorraquídeo edad sufre cambios importantes. Para los niños se caracteriza por bajos niveles de albúmina, aunque el nivel de pre- fracción de albúmina es relativamente alta. El aumento observado en personas de edad avanzada IgA y IgG, que se refieren a γ-globulinas.
El estudio de la composición fraccionada de la proteína del líquido cefalorraquídeo tiene un importante valor diagnóstico, Puesto que un número de enfermedades del SNC (tumores, esclerosis rasseânnom) la cantidad total de la misma no se puede cambiar. El diagnóstico más valiosa es la determinación simultánea de fracciones de proteína, lipo- y glicoproteínas.
Establecido, que en las enfermedades inflamatorias agudas del sistema nervioso es más caracteriza por un aumento en el contenido del fluido α-globulinas cefalorraquídeo, para los procesos inflamatorios crónicos - inmunoglobulina, y las neoplasias malignas - β-lipoproteína.
Determinación de proteínas reacción coloidal
Reacción Lange Es sobre la base de la, que el contacto líquido cefalorraquídeo patológicamente alterada con solución coloidal finamente de cloruro de oro en presencia de electrolitos avance de la coagulación y el color de la solución cambió.
Normalmente, el líquido cefalorraquídeo no cambia el color de la solución coloidal de oro, Él sigue siendo roja. Cambiar el color de la solución adoptada en la patología para evaluar los datos:
- Rojo - 0;
- rojo y púrpura - 1;
- Violeta - 2;
- rojo y azul o rojo y opalescente con un pequeño depósito de partículas - 3;
- azulada - 4;
- de color ligeramente rosado con un tinte azulado, y sedimentos - 5;
- incoloro de sedimentos - 6.
Distinguir cuatro tipos de reacción Lange:
- normal, en el que el cambio de color no se produce en absoluto, o tres hasta cinco tubos de color es ligeramente diferente de los colores en el tubo de control (rojo con un tinte púrpura tenue);
- degenerativo, caracterizado por un cambio de color en la mitad izquierda del número de tubos (de púrpura a la decoloración) y la aparición del sedimento; observado en la sífilis del cerebro, esclerosis rasseânnom, tumores del cerebro y la médula espinal, ablandamiento del cerebro, y otros.;
- inflamatorio, que tienden a cambiar de color en el lado derecho o en el medio de la fila de tubos; meningitis observado en diferentes etnología;
- mixto, en el que el cambio de color se produce en la izquierda, y en el lado derecho de la fila de tubos; Lesiones mixtas observadas en las membranas y tejido cerebral.
Reacción Takata-Ara completa o confirma la reacción Lange. A base de proteínas de coagulación líquido cefalorraquídeo bajo la influencia de dicloruro de mercurio y la solución cambia de color en presencia de una solución de mezcla de fucsina.
Hay Cuatro tipos de reacciones:
- negativo (normal) - De color púrpura de la mezcla cambia, líquido claro;
- degenerativo - Pérdida de precipitado azul-púrpura, sobre la que hay un líquido transparente;
- inflamatorio - Una mezcla de color rosado y sin sedimentos, tiempo decolora;
- mixto - Líquido claro sobre un precipitado de color rosa.
Reacción Takata-Ara es más sensible, que la reacción Lange.
Para el diagnóstico de procesos degenerativos e inflamatorias en el SNC utilizado reacción masilla.
Reacción triptófano y la reacción Levinson se utilizan para el diagnóstico de tuberculosis.
Friedman Reacción utilizado para el diagnóstico precoz de la meningitis. El principio es, que bajo la influencia de permanganato de potasio se producen procesos redox y cambios de color de líquido cefalorraquídeo, y bajo la influencia de ácido tricloroacético precipitado de proteína contenida en él. Para las lesiones, tumores, sífilis del cerebro, MS color del líquido no cambia.
El líquido cefalorraquídeo se detecta por 20 a 25 aminoácidos libres. Para estudiar la composición de aminoácidos de la cromatografía de líquido cefalorraquídeo utilizando métodos modernos, intercambio de iones fluorometría.
El contenido de aminoácidos libres y el nitrógeno amino en el líquido cefalorraquídeo promediaron 0,6- 1,4 mmol / l, abajo, que en el plasma - 1.9 a 2.8 mmol / l.
Un papel importante en el diagnóstico de enfermedades del sistema nervioso son estudios contenido en glucosa en el líquido cefalorraquídeo, enzimas, xloridov, bilirrubina, colesterol y nitrógeno residual.
La glucosa en el líquido cefalorraquídeo
Normalmente, en el líquido cefalorraquídeo contenía 2,5- 3,33 mmol / L de glucosa. Para determinar la cantidad del mismo en el líquido cefalorraquídeo utilizando cualquiera de los métodos, utilizado para determinar el nivel de glucosa en la sangre. El líquido se investiga inmediatamente después de tomar, porque se trata de la glucólisis rápida. En la inflamación aguda y subaguda de las meninges glucosa niveles en los descensos de líquido cefalorraquídeo, algunas veces (que es muy raro) desaparece por completo. Muy a menudo, en la glucosa en el líquido cefalorraquídeo está ausente en la meningitis meningocócica y estreptocócica.
Aumento del nivel de glucosa se observa en la encefalitis fluido cerebroespinal y epiléptico. Cuando los tumores de la glucosa en el cerebro pueden o bien crecer, y soltar.
El ácido láctico en el líquido cefalorraquídeo
En el líquido cefalorraquídeo de los seres humanos sanos métodos enzimáticos determinaron promedio 1,54 (0,89-2,8) ácido láctico / L mmol.
La mayoría aumenta significativamente el contenido de ácido láctico en el líquido cefalorraquídeo bajo procesos hipóxicos y destructivas en el tejido cerebral, que no es única de diagnóstico, y valor pronóstico. Enzimas, implicada en el metabolismo de la CNS, encontrado en el líquido cefalorraquídeo en un número mucho más pequeños, que en la sangre, y se determinan por los mismos métodos, y que en la sangre.
Debido a las enzimas glucolíticas aldolasa menudo definido y lactato deshidrogenasa y sus isoenzimas.
Los cloruros en el líquido cefalorraquídeo
El contenido de cloruro en el líquido cefalorraquídeo adulto normal 197 a 242 mmol / l, en los niños - 195 a 204 mmol / l. Para determinar el nivel de cloruros en el líquido cefalorraquídeo puede ser utilizado por cualquier técnica, utilizado para estudiar los cloruros de sangre, sino más bien la aplicación del método de determinación del volumen de líquido por titulación con nitrato de plata.
La disminución de la cantidad de cloruros observado en la meningitis tuberculosa, a veces - con la encefalitis, povyshenie- en la uremia.
La bilirrubina en el líquido cefalorraquídeo
La bilirrubina en el líquido cefalorraquídeo y líquido de los quistes del cerebro es origen hematógena y causa xantosis. Para la determinación cualitativa y cuantitativa de la bilirrubina utiliza la misma muestra, y que para la determinación de bilirrubina en la sangre. Normalmente la bilirrubina en el líquido cefalorraquídeo no se detectan.
El colesterol en el líquido cefalorraquídeo
En saludable de colesterol en el líquido cefalorraquídeo o está ausente, o su contenido va desde trazas de 0,003-0,005 mg / dl. El aumento de los niveles de colesterol observados en la meningitis y los tumores cerebrales, especialmente maligna.
Para determinar el colesterol en el líquido cefalorraquídeo se puede utilizar Método Engelhardt-Smirnov o método de Ilka.
Normalmente, el contenido de nitrógeno residual en el líquido cefalorraquídeo promedio de 8,6-14,3 mmol / l, t. es. en 50 % abajo, que en la sangre.
El nivel de nitrógeno residual en el LCR es investigado por los mismos métodos, y que el contenido de nitrógeno residual en la sangre.
Glicoproteínas y lipoproteínas en el líquido cefalorraquídeo
El estudio de glicoproteínas y lipoproteínas celebrada por electroforesis en el papel en un gel de agar pre-espesada o líquido cefalorraquídeo o nativo de poliacrilamida. Estos estudios se utilizan para el diagnóstico de enfermedades inflamatorias y tumores.
En el líquido cefalorraquídeo revelado sustancias biológicamente activas de diferente naturaleza química:
- Mediadores (acetilcolina, noradrenalina, dofamin, La serotonina, ácido gamma-aminobutírico);
- hormonas pituitarias, glándula pineal y otras glándulas endocrinas;
- neuropéptidos (endorfiny, encefalinas);
- nucleótidos cíclicos (adenozincnklofosfat, ácido guanílico);
- prostaglandinas;
- cininas.
La mayoría de estos compuestos biológicamente activos se determina por radioinmunoensayo, que cada vez se utiliza en el diagnóstico de laboratorio clínico.