Anemia, asociado con la deficiencia de ácido fólico

Cualquiera que sea la razón fólico anemia por deficiencia de ácido se caracteriza por la aparición en los megaloblastos de médula ósea, destrucción intramedular erythrokaryocytes, patsitopeniey, macrocitosis y hipercromia las células rojas de la sangre y, a veces - los trastornos mentales.

Fólico (pteroilglutaminovaya) ácido (Vitamina B₉) Consta de tres componentes:

• anillo de pteridina;
• Ácido p-aminobenzoico (en conjunto constituyen el ácido pteroievuyu);
• ácido glutamico.

El peso molecular del ácido fólico - 441. El ácido fólico es activo en la forma de derivados de ácido tetrahidrofólico. Contenido de ácido fólico en diferentes formas en el cuerpo humano es aproximadamente 5-10 mg. Las acciones en violación de sus ingresos en el cuerpo pueden agotarse más 4 del mes.

El requerimiento diario de ácido fólico es 100 a 200 microgramos, Embarazo, anemia hemolítica, aumenta muchas veces.

La cantidad total de ácido fólico en la dieta con toda la potencia de 500 a 600 microgramos por día. Folato - folatos contenida en cantidades considerables en el hígado, levadura, espinela, carne. Más 50 % ácido fólico, en los alimentos, Se puede romper cuando se cocina.

El ácido fólico se absorbe en el intestino delgado superior. La capacidad de los intestinos para absorber el ácido fólico es mucho mayor que el requerimiento diario.

El ácido fólico participa en la síntesis de bases de pirimidina y purina,, junto con metilcobalamina - la síntesis de timidinm nofosfata uridinmonofosfata. Coenzimas folato Más involucrado en una serie de reacciones. En particular, tetrahidrofolato participa en la síntesis de histidina ácido glutámico.

La etiología y la patogénesis de la anemia durante la deficiencia de ácido fólico

Deficiencia de ácido fólico, así como déficit de cobalamina, Esto conduce al desarrollo de anemia megaloblástica.

La malabsorción de folato observado en individuos, resección del intestino delgado, especialmente el yeyuno, así como en el largo plazo tomando anticonvulsivos como la difenilhidantoína (difenina) y el fenobarbital (luminal). La absorción de ácido fólico se rompe cuando el bebedero y la enfermedad celíaca. Deficiencia de ácido fólico, así como déficit de cobalamina, observado en síndrome de asa ciega. Descrito casos raros de trastornos hereditarios de transporte ácido fólico a través de la pared intestinal y en el líquido cefalorraquídeo. La absorción de otras sustancias sin sufrir.

La deficiencia de ácido fólico en los recién nacidos observado en la prematuridad, violación de la absorción intestinal, La leche de cabra alimentado, que contiene una pequeña cantidad de ácido fólico.

Una mala absorción significativa de ácido fólico puede ocurrir en pacientes, alcohólicos.

El aumento del consumo de ácido fólico durante el embarazo puede conducir a una deficiencia de ácido fólico, Sin embargo, en los países desarrollados hoy en día es raro. La deficiencia de ácido fólico en mujeres embarazadas se producen cuando la mala nutrición, la presencia de anemia hemolítica, utilizar una gran cantidad de alcohol antes del embarazo.

Las manifestaciones clínicas de la deficiencia de folato

La deficiencia de ácido fólico en los niños y las mujeres jóvenes. Al mismo tiempo, los pacientes se quejan de debilidad general, mareo. A diferencia de la deficiencia de cobalamina dolor en la lengua observa raramente. Parestesias, y otros signos de mielosis funicular que faltan. Esclerótica menudo ikterichnost.

En contraste con el déficit de la deficiencia de cobalamina de ácido fólico es gistaminoupornaya raramente observada Akhil, gastratrophia, aunque la disminución de la secreción gástrica es a menudo.

Para la deficiencia de ácido fólico, así como para la deficiencia de cobalamina, caracterizado por la aparición en la sangre periférica macrocitosis, megalocitos y megaloblastos, la presencia de anemia hipercrómica, reducir el número de reticulocitos, plaquetas y leucopenia con cambio neutrofílica a la izquierda y derecha. En la médula ósea - megaloblastos.

Los cambios en el sistema nervioso son diferentes de las manifestaciones en B₁₂-La anemia por deficiencia.

Probadas, que las personas con epilepsia, La deficiencia de ácido fólico conduce a frecuentes ataques, a su mayor severidad. Esto es particularmente importante debido al hecho de, que tomando anticonvulsivos puede causar la mala absorción de folato. Según la literatura, en individuos con deficiencia de ácido fólico esquizofrenia provoca exacerbaciones, síntomas más severos y tratamiento menos eficaz.

El diagnóstico diferencial de la deficiencia de cobalamina y ácido fólico

Para el diagnóstico diferencial de la deficiencia de cobalamina y ácido fólico se utiliza método de radioinmunoensayo para la determinación de ácido fólico en el suero y en particular en los eritrocitos. El contenido de cobalamina se determina por el método microbiológico. Como organismo de prueba utilizado como Streptococcus faecalis y Lactobacillis casei. Normalmente, el contenido de ácido fólico en los rangos de suero sanguíneo, Según los autores, utilizando diferentes métodos de investigación, de 3 a 25 ng / ml, y eritrocitos - a partir de 100 a 425 ng / ml.

En la deficiencia de ácido fólico disminuye a medida que el nivel de suero, y en los eritrocitos. Contenido de ácido fólico en la deficiencia kolabaminov en el suero de la sangre a menudo se eleva, y los eritrocitos a veces pueden reducirse, aunque el descenso, normalmente, una pequeña.

Para el diagnóstico de deficiencia de ácido fólico también se utiliza Método Load histidina (15 g), a continuación, definir el contenido de ácido en la orina formiminglutaminovoy. Normalmente, la mayor parte de las formas de histidina ácido glutámico. Con la producción de orina ácida formiminglutaminovoy 1-18 mg. En la deficiencia de ácido fólico para las 8 horas después de su introducción en el cuerpo se libera de la orina 20 a 1500 ácido formiminglutaminovoy mg. Un número significativo de ácido formiminglutaminovoy excretada en la orina después de la administración de la histidina en personas, tratados con metotrexato. En la deficiencia de cobalamina, cirrosis del hígado la excreción urinaria de ácido aumenta formiminglutaminovoy, en un grado menor, que con un déficit de ácido fólico. Los niveles normales de orina contenido ácido metilmalónico aumentos formiminglutaminovoy histidina ácido después de recibir pruebas de la deficiencia de ácido fólico, en lugar de cobalamina.

Ayuda a diferenciar estos dos estados y el estudio con radionúclidos. En la deficiencia de cobalamina, Se trata de una violación de la secreción del factor intrínseco, absorción deteriorada de cianocobalamina marcada, una deficiencia de ácido fólico, se absorbe correctamente.

En la deficiencia de ácido fólico, su introducción en el cuerpo conduce a un mayor contenido de reticulocitos, mientras que la inyección de cianocobalamina (derivados) ineficaz. Metilcobalamina deficiencia de ácido fólico aumenta el nivel de reticulocitos.

Definición de los neutrófilos de segmentación índice

Cuente el número de neutrófilos, con 4 segmento y más (Total 200 célula). Determinar el porcentaje de células, con 5 segmentos y más en relación con la cantidad de células, con 4 segmento. El índice se determina por la fórmula:

IS =(Kansas (5 y mas))/Kansas(4);

donde IC - segmentación índice;

Kansas (5 y mas) - El número de neutrófilos segmentados (en 200 célula), en el que el número de segmentos es igual a 5 o más;

Kansas (4) - El número de neutrófilos segmentados, en el que el número de segmentos es igual a 4.

Normalmente, los rangos de este índice 2,5 a 25 %. Dónde, cuando excede 30 % (vibración 120%), Se puede hablar de neutrófilos hipersegmentación. Se observó la deficiencia de ácido fólico, metilkoʙalamina, y la uremia.

Determinación de ácido metilmalónico en la orina por Giordio y Plaud

Reactivos.

1. La resina de intercambio iónico Dowex-Zx4 (forma de cloruro, 200-400 Malla). La resina se lavó con cinco volúmenes de agua destilada 3 veces, se suspendió en dos volúmenes de agua destilada y se almacena en un plato oscuridad a 4 ° C.

2. Una solución de para-nitroanilina 0,075 % preparada disolviendo 37,5 reactivo mg 500 ml 0,2 Solución M de ácido clorhídrico. Almacenar en una olla oscura, Se mantuvo estable durante varios meses a temperatura ambiente.

3.Tampón de acetato (pH 4,3) a partir de 1 M de acetato de sodio y 1 Solución M de ácido acético.

4.Diazoreaktiv: 4 ml 0,5 % solución de nitrato de sodio se mezcló con 15 ml para-nitroanilina. La mezcla se colocó en un refrigerador a 4 ° C y se añadió la solución enfriada 4 ml 0,2 Acetato de sodio M. Reactivo estable a temperaturas 4 ° C durante un día.

5.Estándar 0,05 Solución M de ácido metilmalónico: 295 ácido metilmalónico mg se disuelven en 50 ml de agua.

Método

Se recogió la orina en una botella de vidrio y se congeló hasta que el estudio. Para estudiar la parte de carga de orina (20- 25 ml), descongelado, centrifugada, y el sobrenadante se recogió usando una solución débil de hidróxido de sodio o ácido clorhídrico para ajustar el pH 6,5.

Altura de la columna cromatográfica 20 cm y un diámetro 1 cm se llenó con resina Dowex-Zx4. La capa de resina debe estar dentro de 3 cm. Se hace pasar a través de la resina 5 ml de orina, se lavó con agua destilada (2 × 50 ml a una velocidad de no más de 15 ml 1 de). Ácido metilmalónico se puede eluir de la resina 20 ml 0,1 Solución M de ácido clorhídrico. Adicional 2 ml de eluido se mezclaron con 3 ml 1 M tampón de acetato, pH 4,3 en un tubo de ensayo con un tapón de vidrio (15×2cm). Se añade a la mezcla 3 diazoreaktiva fría ml, en el que el pH se eleva hasta 4,0. La mezcla se calentó en un baño de agua a una temperatura 94 ° C. 3 min y 2 ml 3 Solución de hidróxido de sodio M. El tubo se retira entonces del baño de agua, tapó y los contenidos se agitaron. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente durante 10 min y en un fotométrica 620 nm en una cubeta con una longitud de trayectoria 1 cm.

Como control, una mezcla de, que consiste en 2 ml 0,1 Solución M de ácido clorhídrico, 3 ml y diazoreaktiva 3 tampón de acetato ml. Solución patrón de ácido metilmalónico consta de los mismos componentes y 0,02 ml 0,05 Solución M de ácido metilmalónico. La absorbancia de estas soluciones fueron medidos en las mismas condiciones.

Contenido de ácido metilmalónico (mg) por unidad de volumen de orina (1 l) determinado por la fórmula:

(ES_Muestra-ES_control)/(ES_estándar-ES_control)*A *((1000*T)/METRO)

donde E - absorbancia de varias muestras;

A - la cantidad de ácido metilmalónico en un tubo de ensayo estándar, ml;

1000 - La cantidad de orina, adoptado para la investigación, ml;

T - la cantidad de ácido clorhídrico, tomado por elución, ml;

M - el número del eluato, adoptado para la investigación, ml.

En las condiciones anteriores, la fórmula se puede simplificar como sigue::

(ES_Muestra-ES_control)/(ES_estándar-ES_control)*236

Dónde, cuando la cantidad de ácido metilmalónico en la orina es mayor que 300 mg / l, debe ser re-mezclado con eluato tampón de acetato y diazoreaktivom, pero en vez 2 ml de eluido es recomendable tomar 4- 10 veces menor y llevar el volumen a 2 ml 0,1 Solución de ácido clorhídrico M. Al calcular la dilución debe ser considerado.

Normalmente por día, con la producción de orina 0,6-4,7 mg de ácido metilmalónico. En la deficiencia de cobalamina excreción diaria de alcances de ácido metilmalónico 294 mg. Normalmente, la recepción 10 g valina no aumenta aclaramiento de ácido metilmalónico, deficiencia de cobalamina aumenta la excreción de ácido metilmalónico.

Determinación de ácido metilmalónico en la orina por Green

Reactivos.

1. Éter.
2. Etanol.
3. Una solución de ácido clorhídrico 0,1 M.
4. Sulfato de amonio.
5. Сильноосновная смола деацидит FF (200 malla, forma de cloruro).
6. Una solución de nitrato de sodio 0,5 % (peso / volumen).
7. Una solución de para-nitroanilina (750 mg disolvió en 1 l 0,2 Solución M de ácido clorhídrico).
8. Acetato de sodio 0,2 M.
9. Tampón de acetato 1 M, pH 4,3: mixto 1 Solución de acetato de sodio y M 1 Solución M de ácido acético en la proporción 16,35:33,9.
10. Una solución acuosa de hidróxido de sodio 3 M.

LA. Ácido metilmalónico Solución estándar: 100 mg disolvió en 100 ml de agua, almacenado en el refrigerador.

B. Trabajar ácido metilmalónico estándar: solución estándar diluida en 20 tiempo 0,1 Solución de ácido clorhídrico M (1 ml de la norma y 19 ml de ácido clorhídrico). Esta cantidad de equivalente de ácido metilmalónico 100 ácido metilmalónico mg 1 condiciones de prueba l de orina.

Para la preparación de diazoreaktiva mixto 4 ml 0,5 % solución de nitrato de sodio y 15 ml para-nitroanilina. La mezcla se colocó en un baño de hielo y añadir 4 ml 0,2 Acetato de sodio M.

Método.

Se recogió la orina durante un día, medido su volumen y 10 ml de acidificada 1 Solución de ácido sulfúrico M a pH 2,0 o ligeramente por debajo. Se añadió sulfato amónico a una saturación. La mezcla se colocó en un embudo de separación y se extrajo tres veces con éter y etanol en una proporción de 3:1. Para evitar la formación de la mezcla de emulsión extraída se usa en exceso.

El extracto se pasa a través de una cromatografía en columna pequeña (1 – 1,5 cm de diámetro), terminado 5 ml de resina. La columna se lavó 50 ml de agua destilada. Ácido metilmalónico eluye 0,1 Solución de ácido clorhídrico M. Después de la elución seleccionado 2 ml eluato, W se añade ml de tampón de acetato y 3 ml diazoreaktiva.

Después de mezclar, el tubo se colocó en un baño de agua a una temperatura 95 ° C 3 m. Entonces añadido 2 ml 3 M de hidróxido de sodio y una vez tapón de tubo cerrado para minimizar el contacto con el aire. Después de enfriar, se midió la absorbancia a la longitud de onda 620 ellos. Para el blanco en lugar de utilizar el eluato 2 ml 0,1 Solución M de ácido clorhídrico, y para la solución estándar - 2 ml de patrón de trabajo.