Ο καθορισμός των ποσοτικών και ποιοτικών χαρακτηριστικών του σπέρματος

Προσδιορισμός της κινητικότητας του σπέρματος

Προσδιορισμός της κινητικότητα του σπέρματος είναι μια σημαντική παράμετρος, της ποιότητας της εκσπερμάτωση. Σπέρμα, ικανό γονιμοποίηση, έχουν κινητικότητα - Βεβαιωθείτε ευθεία κίνηση προς τα εμπρός με την ταχύτητα του 50 κυρία. Μπορεί να βρεθεί κατά την εκσπερμάτιση σπέρματος με μειωμένη κινητικότητα - diskinospermiey με τη μορφή δονητικής, Manege και λοιπές κινήσεις, που συνήθως απουσιάζουν.

Κινητικότητα του σπέρματος αξιολογήθηκε σε μητρική παρασκευή του εκσπερμάτωση με περιορισμένο οπτικό πεδίο (χρησιμοποιώντας το παράθυρο Fonio), Χρησιμοποιώντας τον προσοφθάλμιο φακό 7X και 40X, όταν κουκούλα συμπυκνωτή. Αρίθμηση 100 κελί, Σημειώστε τον αριθμό τους που διακινούνται, καθιστική ζωή και σταθερά σπέρμα. Κανονικά, ενεργό-κινητικό σπέρμα 80-90 %, καθιστική ζωή - 10-12, σταθερό - 6 10 %. Λαμβάνοντας υπόψη μόνο εκείνες που δραστηριοποιούνται κινούμενο και βραδέως κινούμενα σπερματοζωάρια, που κάνουν σταθερή πρόοδο.

Μπορείτε επίσης να χρησιμοποιήσετε μια πιο λεπτομερή πέντε σημείων κλίμακα διαβάθμισης:

• "4" - μεγάλη κινητικότητα (όλα έχουν ένα ευθύγραμμο μεταφραστικής κινητικότητας του σπέρματος σε ένα σημαντικό ποσοστό);
• "3" - καλή κινητικότητα (λίγες σταγόνες);
• "2" - μέτρια κινητικότητα (Ακόμα ένα πολύ σπέρμα, αλλά με δονούμενη ουρά);
• "1" - κακή κινητικότητα (η έλλειψη κίνησης προς τα εμπρός, Μόνο η ουρά της κινητικότητας του σπέρματος);
• "0" - η κίνηση των σπερματοζωαρίων που λείπουν.

Εκσπερμάτωση Γονιμότητα Εξαρτάται από τη διάρκεια της κινητικότητας του σπέρματος, Ως εκ τούτου, είναι απαραίτητο να προσδιοριστεί κινητικότητα του σπέρματος σε δυναμική (Δυναμική kinezisgramma).

Μια σταγόνα του σπέρματος εφαρμόζεται στο γυάλινο κάλυμμα, γυρίστε το ανάποδα και να θέσει σε γυάλινο πλακίδιο με μια ημισέληνο για την ανάρτηση του υποβιβασμού επομένως, ότι η πτώση ήταν στο κέντρο της εσοχής. Τα άκρα της καλυπτρίδος λιπαίνεται με υγρή παραφίνη και μικροσκοπικά προσδιορισμού του ποσοστού των ενεργά motile-, καθιστική ζωή και σταθερά σπέρματος μέσω 1, 3, 6, 12 και 24 ώρα μετά την εκσπερμάτωση. Η έρευνα διεξάγεται σε θερμοκρασία δωματίου. Κανονικά, ο αριθμός των ενεργών-κινητικό σπέρμα μειώνεται κάθε 2-3 ώρες 20 % ,

• Σημείωση. Μικροσκοπική εξέταση του σπέρματος πρέπει να διεξάγεται στο εργαστήριο ενός ατόμου, διαθέτουν επαρκή εμπειρία στον τομέα της εργαστηριακής διάγνωσης, καθώς τα αποτελέσματα του προσδιορισμού της κινητικότητας του σπέρματος σε διαφορετικούς ερευνητές κυμαίνονται μέχρι ± 40 % και εξαρτάται σε μεγάλο βαθμό από την εμπειρία με την εκσπερμάτωση.

Η δίκη για την "αναβίωση" του σπέρματος

Η δίκη για την "αναβίωση" του σπέρματος Η βάση για την αποκατάσταση της φυσιολογικής κινητικότητας του σταθερού, αλλά με τη βοήθεια των λύσεων διεγερτική ζωντανών σπερματοζωαρίων:

1) Λύση Becker (Γλυκόζη - 3 ζ, Επί₂HPO₄ - 0,6 ζ, Ν - 0,2 ζ, KH₂ΜΕΤΑ₄ -0,01 G, distillirovannaya στο νερό 100 ml; pH - 7,8);

2) 0,1 % διάλυμα καφεΐνης (όχι μόνο σε αμπούλες!) - 10 % ο όγκος της εκσπερμάτισης;

3) 0,1 Διάλυμα αργινίνης Μ.

Μέθοδος. Τρισδιάστατα σιφωνισμού 1 ml nasasyvayut 0,1 ml σπέρματος (καλά αναμεμειγμένο) και το ίδιο πιπέτα κερδίζει 0,9 ml διάλυμα διέγερσης. Το περιεχόμενο της πιπέτας εμφυσάται επί υάλου ωρολογίου, ανακατεύουμε καλά με επαναλαμβανόμενη αναρρόφηση και φυσάει ρευστό επί υάλου ωρολογίου, και στη συνέχεια το τελικό προϊόν που κρέμεται drop. Μέσα από 5 10 min σταθερό, αλλά ζωντανά σπερματοζωάρια αρχίζουν να κινούνται.

Το ποσοστό του κινητικού σπέρματος προσδιορίζεται αμέσως όταν αποκατάσταση της κινητικότητας και μετά 3, 6, 12 και 24 όχι. Για πιο αξιόπιστα αποτελέσματα, διεξάγεται παράλληλα με το δείγμα με δύο ενδιαφέρουσες λύσεις. Μόνο εάν είναι αδύνατο να «αναβιώσει» το σπέρμα μπορεί ακόμα να μιλήσουμε για nekrospermii.

Ταυτοποίηση των ζωντανών σπερματοζωαρίων μεταξύ σταθερού

Η αρχή της μεθόδου βασίζεται στην, ένζυμα που ζουν σπέρμα αποχρωματίζεται εωσίνης. Καθώς τα αντιδραστήρια που χρησιμοποιούνται 5 % υδατικό διάλυμα καλίου και ηωσίνη 10 % υδατικό Nigrosine.

Μέθοδος. Στις slide προκαλέσει μια μικρή σταγόνα του σπέρματος, τοποθετείται κοντά δύο φορές την πτώση 5 % διάλυμα ηωσίνη και μια σταγόνα του καλίου 10 % Λύση Nigrosine, είναι επίσης διπλάσιος μεγάλες σταγόνες εοσίνη κάλιο. Πρώτον, η εκσπερμάτωση αναμιγνύεται με ηωσίνη κάλιο, περιμένει λίγα δευτερόλεπτα, και στη συνέχεια αναμιγνύεται με μια σταγόνα Nigrosine, και πάλι να περιμένει λίγα δευτερόλεπτα και να κάνει λεπτές κηλίδες γυαλισμένο γυαλί διαφάνεια.

Χρησιμοποιώντας ένα μικροσκόπιο σύστημα βύθιση, στα επιχρίσματα υπολογίζονται τουλάχιστον 200 σπέρμα, τονίζοντας διαβίωσης (Άχρωμος) και τους νεκρούς (εοσίνη χρωματισμένο κόκκινο). Ο αριθμός των ζωντανών και νεκρών σπερματοζωαρίων εκφράζεται ως ποσοστό. Εν απουσία σπέρματος Nigrosine σταγόνα αναμιγνύονται με άχυρο 5 % εοσίνη λύση του καλίου και να προετοιμαστούν λεπτά επιχρίσματα για μικροσκοπία. Νιγκροζίνη βαφές μόνο το φόντο του φαρμάκου, όπου το σπέρμα έχουν διατεθεί περισσότερη αντίθεση. Κανονικά ζουν σπέρμα 80-90 % του συνολικού αριθμού.

Μετρώντας το σπέρμα 1 ml, και σε ολόκληρο τον όγκο του εκσπερμάτωση

Ο αριθμός των σπερματοζωαρίων στο 1 Οι ml όλη την εκσπερμάτωση υπολογίζεται σε ένα θάλαμο καταμέτρησης Goryaeva.

Ο αριθμός των σπερματοζωαρίων σε ολόκληρο εκσπερμάτωση προσδιορίζεται με πολλαπλασιασμό του αριθμού των σπερματοζωαρίων σε 1 ml ποσότητα εκσπερμάτισης (χιλιοστόλιτρα).

• Σημείωση. Ο θάλαμος μέτρησης μπορεί επίσης να προσδιορίσει τον αριθμό των κινητικών σπερματοζωαρίων, Γιατί εκσπερμάτωση θα πρέπει να αραιωθεί με ζεστό ισοτονικό hloridz νατρίου και μετρήστε τον αριθμό των σταθερών σπέρματος, και στη συνέχεια αφαιρούμε από το συνολικό.

Κανονικά, στην 1 ml σπέρματος περιέχει 60 με 120.000.000. σπέρμα, όταν giperspermii - περισσότερα 120 εκατ., σε ολιγο - από 30 να 60 εκατ., τι, συνήθως, καθιστώντας αδύνατη την γονιμοποίηση. Ωστόσο, η περιγραφόμενη περιπτώσεις, Όταν γονιμοποίηση και Περιεχόμενο 1 ml του эyakulyata 5 να 30 εκατομμύριο. σπέρμα.

Οπωσδήποτε στον εντοπισμό ολιγοσπερμία 2-3 απαραίτητους ελέγχους μετρώντας τον αριθμό των σπερματοζωαρίων με διαστήματα 3-4 εβδομάδων για να καθορίσει το μέγιστο ποσό τους. Κατά τον αριθμό των σπερματοζωαρίων του ίδιου του ανθρώπου, υπόκειται σε σημαντικές διακυμάνσεις σε φυσιολογικές.

Κανονικά γύρω από την εκσπερμάτιση περιέχει περισσότερα από 150 εκατομμύριο. σπέρμα.

Μετρώντας σπερμιόγραμμα

Σπερμιόγραμμα - είναι το ποσοστό των διαφόρων μορφολογικών μορφές σπερματοζωαρίων και σπερματογένεση.

Σε ένα επίχρισμα, χρώση με αιματοξυλίνη-ηωσίνη ή Pappenheim, υπολογιζόμενη ελάχιστη 200 σπέρμα, όπου ο αριθμός των φυσιολογικών και παθολογικών μορφών, και σπερματογένεσης κύτταρα που εκφράζονται σε εκατοστιαία αναλογία. Ο υπολογισμός γίνεται με τη χρήση των συστημάτων βύθισης μικροσκόπιο και μηχανήματα για την καταμέτρηση leukogram προ αλλοιώσει τα ονόματα των κλειδιών.

Σε μια κανονική εκσπερμάτωση του σπέρματος κανονικές μορφές είναι 80-85 %, μερικές φορές 100 %, αυτές περιλαμβάνουν φυσιολογικές παραλλαγές, που χαρακτηρίζεται από ασυνήθιστες ή το λαιμό, ή μειωμένη, ή διευρυμένη κεφαλή.

Νέος, ή ανώριμα, σχήμα σπέρμα έχουν γύρω από το κεφάλι και το λαιμό του υπόλοιπου του κυτταροπλάσματος ("Κολάρο"), παρατηρήθηκε με συχνή σεξουαλική επαφή και δεν είναι ικανά γονιμοποίηση.

Οι παλιές μορφές του σπέρματος (υπερχρωμία, axromija, κενοτοπίωση κεφάλι) εμφανίζονται κατά την εκσπερμάτιση μετά από παρατεταμένη αποχή και δεν είναι κατάλληλο για τη λίπανση.

Παθολογικές μορφές περιλαμβάνουν σπέρματος με παραμορφώσεις της κεφαλής: megalospermatozoidы (gigantospermatozoidы), μακροοικονομική, mikrospermatozoidy, Κωνικός, δικέφαλος σπέρματος με ένα λαιμό και ουρά, χωρίς λαιμό με ένα ή περισσότερα ουρές, χωρίς ουρά, ουρά χωρίς το κεφάλι, κ.λπ..

Σε φυσιολογικούς υγιείς άρρενες εκσπερμάτισης μορφές μη φυσιολογικού σπέρματος είναι συνήθως δεν βρέθηκε, αλλά μερικές φορές ο αριθμός τους κατά τη διάρκεια της κανονικής εκσπερμάτωση γονιμότητας μπορεί να φθάσει 20 %, εκ των οποίων περίπου 15 % επικεφαλής της παθολογίας, 3-5 % - Σώμα, 2-5 % - Ουρά.

Σε παθολογικές σπερματογένεσης, εκκριτική μορφή της υπογονιμότητας προσδιορίζονται σπερματοζωαρίων με ανώμαλη κεφαλής και του τραχήλου. Παθολογία ουρά συνήθως απεκκριτικό προέλευσης, Εμφανίζεται κατά τη διέλευση του σπέρματος τρόπους vas.

Σε λεκιασμένο παρασκευάσματα είναι επίσης σαφώς ορατή ξεχωριστά βρίσκεται βλαστικών κυττάρων σε διάφορα στάδια διαφοροποίηση και ωρίμανση, είναι σημαντικό να γίνει διάκριση ασπερμία και η αζωοσπερμία.

Σπερμογονίων Οι στρογγυλεμένες, Μερικές φορές οβάλ, διάμετρο 5-12 μικρά. Ο πυρήνας καταλαμβάνει περίπου το ένα τρίτο των κυττάρων, σκοτάδι- ή ανοιχτόχρωμα, 1-2-3 Nucleo- Ιερέας του βούδα, Συχνά βρίσκονται κοντά karyotheca (πυρηνικού φακέλου), δομή της χρωματίνης melkozernystaya. Το κυτταρόπλασμα είναι στενό, βασεόφιλα, Ομοιογενής. Χάσμα σπερμογονίων μιτωτικώς αρκετές φορές. Υπάρχουν κύτταρα με καλά καθορισμένα στάδια μίτωσης.

Μερικά από τα κύτταρα, σχηματίζεται μέσω της μίτωσης, дифференцируются в сперматоциты μου, και, στη συνέχεια, προκειμένου II. Σπερματοκύτταρα μπορώ να παραγγείλω - Στρογγυλό ή πολυγωνικά κύτταρα με διάμετρο 17-19 mm με μεγάλο στρογγυλό πυρήνα και του κυτταροπλάσματος φως πρόστιμο. Σε χρωματισμένο παρασκευάσματα είναι ένα σαφές περιπυρηνικό ζώνη.

Σπερματοκύτταρα ΙΙ της τάξης σχηματίζονται ως αποτέλεσμα της μειωτικής. Είναι μικρότερα, από σπερματοκύτταρα μπορώ να παραγγείλω (διάμετρος 15 m), αλλά στη μορφολογία σχεδόν ταυτόσημη. Στην πιο συχνή εκσπερμάτωση, από σπερματοκύτταρα μπορώ να παραγγείλω, αλλά πολύ λιγότερο συχνά, από σπερματίδια.

Spermatydы - Μικρό, στρογγυλά ή επιμήκη κύτταρα με διάμετρο 12-15 χιλιοστά του με στρογγυλό πυρήνες υπερχρωματικούς, που βρίσκεται κεντρικά ή έκκεντρα. Μπορεί να υπάρχουν πολυπύρηνους σπερματίδια. Pale κυτταρόπλασμα, bazafilnaya, συχνά κενοτόπιοι.

Οι σπερματίδια μετατραπεί σε σπερματοζωάρια.

Τα κύτταρα της σπερματογένεσης σε φυσιολογικό ορμονικό δεν είναι πάνω από 2 %. Ένας μεγάλος αριθμός της στειρότητας που παρατηρούνται στην εκκριτική φύση.

Για μικροσκόπιο αντίθεσης φάσης εκσπερμάτωση αραιώνεται με ισότονο διάλυμα χλωριούχου νατρίου με την προσθήκη μιας μικρής ποσότητας 1 % rivanola ή ένα υδατικό διάλυμα του καρβολικό οξύ για τη μείωση της κινητικότητας του σπέρματος.

Με μικροσκόπιο φθορισμού εφαρμόζεται σε μια διαφάνεια μία σταγόνα σπέρματος, και μια σταγόνα πορτοκαλί ακριδίνης στην εκτροφή 1:20000. Οι σταγόνες αναμιγνύονται και καλύπτεται με ένα γυάλινο κάλυμμα. Μικροσκόπιο προσοφθάλμιου χρησιμοποιείται 7X και 40Χ αντικειμενικό. Ζωντανή σπέρμα είναι χρωματισμένο πράσινο, νεκρός - πορτοκαλί. Φυσιολογικών και μη φυσιολογικών μορφών των σπερματοζωαρίων είναι εύκολο να διακρίνει λόγω των μορφολογικών χαρακτηριστικών τους.

Rabotы κανόνες της φάσης kontrastnom και lyuminestsentnom μικροσκόπιο opisanы σε instruktsiyah k эtim Όργανα. Όταν χρησιμοποιείτε αντίθεσης φάσης και μικροσκοπία φθορισμού σπερμιόγραμμα υπολογίζεται από τους γενικούς κανόνες.

Βάσει μιας μικροσκοπικής εξέτασης της εκσπερμάτωση μπορεί να αποκαλύψει διάφορες παθολογικές συνθήκες.

• Spermatoschesis - Η απουσία σπερματοζωαρίων κατά την εκσπερμάτιση, και τα κύτταρα της σπερματογένεσης.
• Αζωοσπερμία - Απουσία σπερματοζωαρίων με την παρουσία της σπερματογένεσης.
• Astenospermii - Μείωση του αριθμού των κινητικών κυττάρων και η αύξηση του αριθμού των παθολογικών μορφών υπό κανονικές συνολικό αριθμό σπερματοζωαρίων.
• Oligoastenospermiya - Μείωση του αριθμού των σπερματοζωαρίων και των κινητών μορφές τους και την αύξηση του αριθμού των παθολογικών μορφών.
• Nekrospermiya - Σταθερό όλο το σπέρμα στο προϊόν ακόμα και μετά την "αναβίωση".
• Akinospermiya - Μέλους, στην οποία, σε αντίθεση με την προηγουμένως καθοριστεί nekrospermii σπέρμα μετά την «αναζωπύρωση» αρχίζουν να κινούνται.