Die Definition von quantitativen und qualitativen Merkmale der Spermien

Bestimmung der Beweglichkeit der Spermien

Bestimmung der Spermienbeweglichkeit ist ein wichtiger Parameter, der Qualität des Ejakulats. Sperma, befruchtungsfähig, haben Mobilität - Stellen Sie gerade Vorwärtsbewegung mit der Geschwindigkeit des 50 Frau. Kann im Ejakulat gefunden werden Spermien mit eingeschränkter Mobilität - diskinospermiey in Form von Schwingungs, Manege und andere Bewegungen, die in der Regel nicht vorhanden sind.

Spermien-Motilität wurde in nativen Vorbereitung des Ejakulats bewertet mit einem begrenzten Sichtfeld (mit Fenster Fonio), Verwenden der Okular 7X und 40X, wenn Kapuzen Kondensator. Zählen 100 Zelle, beachten Sie die Anzahl der sie in Bewegung, Bewegungsmangel und Fest Spermien. Normalerweise aktiv-beweglichen Spermien sind 80-90 %, Bewegungsmangel - 10-12, Fest - 6 10 %. Unter Berücksichtigung nur diejenigen aktiv bewegenden und sich langsam bewegenden Spermien, die stetige Fortschritte machen.

Sie können auch eine detailliertere Fünf-Punkte-Bewertungsskala:

• "4" - große Mobilität (alle haben eine geradlinige translatorische Beweglichkeit der Spermien mit einer signifikanten Rate);
• "3" - gute Mobilität (einige Tropfen);
• "2" - mittelmäßige Mobilität (Noch viel Sperma, aber mit vibrierenden Schwanz);
• "1" - arme Mobilität (der Mangel an Vorwärtsbewegung, Nur der Schwanz der Spermien-Motilität);
• "0" - die Bewegung von Spermien fehlt.

Fertility Ejakulat Es hängt von der Dauer der Spermienbeweglichkeit, Daher ist es erforderlich, die Beweglichkeit der Spermien in der Dynamik festzustellen (Dynamische kinezisgramma).

Ein Tropfen Sperma an das Deckglas aufgebracht, umdrehen und legte auf einem Objektträger mit einem Halbmond für den hängenden Tropfen so, daß der Abfall war in der Mitte der Vertiefung. Die Ränder des Deckglases mit flüssigem Paraffin geschmiert und mikroskopisch Bestimmung des Prozentsatzes aktiv motile-, Bewegungsmangel und Fest Spermien durch 1, 3, 6, 12 und 24 Stunden nach der Ejakulation. Forschung wird bei Raumtemperatur durchgeführt wird. Normalerweise ist die Anzahl der aktiven beweglichen Spermien nimmt alle 2-3 h 20 % ,

• Notiz. Die mikroskopische Untersuchung von Samen muss im Labor von einer Person durchgeführt werden,, über ausreichende Erfahrung auf dem Gebiet der Labordiagnostik, da die Ergebnisse der Bestimmung der Spermienbeweglichkeit in verschiedene Forscher bis zu ± 40 % und hängt weitgehend von der Erfahrung mit dem Ejakulat.

Die Studie über die "Wiederbelebung" der Spermien

Die Studie über die "Wiederbelebung" der Spermien Es basiert auf der Wiederherstellung der normalen Beweglichkeit der festen, sondern leben Spermien durch die Stimulierung Lösungen:

1) Becker-Lösung (Glucose - 3 g, An₂HPO₄ - 0,6 g, NaCl - 0,2 g, KH₂NACH₄ -0.01 G, distillirovannaya zu Wasser 100 ml; pH - 7,8);

2) 0,1 % Koffein-Lösung (nicht nur in Ampullen!) - 10 % das Volumen des Ejakulats;

3) 0,1 M Argininlösung.

Verfahren. Dimensional Pipettierer 1 ml nasasyvayut 0,1 ml Ejakulat (gut gemischt) und dieselbe Pipette gewinnt 0,9 ml Lösung anregenden. Der Inhalt der Pipette wird auf einem Uhrglas geblasen, gut mischen durch mehrmaliges Saugen und Blasen Flüssigkeit auf einem Uhrglas, und dann das fertige Produkt hängenden Tropfen. Bis 5 10 min Fest, aber leben Spermien beginnen sich zu bewegen.

Der Prozentsatz der beweglichen Spermien sofort bei der Wiederherstellung der Mobilität und nach fest 3, 6, 12 und 24 Nein. Für zuverlässigere Ergebnisse, erfolgt parallel zu der Probe mit zwei anspruchsvolle Lösungen durch. Nur dann, wenn es unmöglich ist, "wieder zu beleben", die Spermien noch über nekrospermii sprechen.

Identifizierung lebender Spermien unter festen

Das Prinzip des Verfahrens basiert auf dem, Enzyme, die Spermien entfärbt Eosin leben. Als Reagenzien verwendet werden 5 % wässrigen Lösung von Kalium und Eosin 10 % wässrige Nigrosine.

Verfahren. Auf Folie verursachen einen kleinen Tropfen von Sperma, in der Nähe der doppelten Drop platziert 5 % Eosin-Lösung und ein Tropfen Kalium 10 % Nigrosin-Lösung, ist auch doppelt so groß Tropfen Eosin Kalium. Zuerst wird das Ejakulat mit Kalium Eosin vermischt, wartet ein paar Sekunden, und dann mit einem Tropfen Nigrosin vermischt, wieder warten ein paar Sekunden und machen dünne Abstriche polierten Glasträger.

Mit Hilfe eines Tauchsystem Mikroskop, in den Ausstrichen mindestens gezählt 200 Sperma, Hervorhebung Wohn (Farblos) und die Toten (Eosin rot). Die Anzahl der lebenden und toten Spermien in Prozent. In Abwesenheit von Nigrosin Tropfen Sperma mit dem Stroh vermischt 5 % Eosin-Lösung von Kalium und bereiten dünne Abstriche für die Mikroskopie. Nigrosinfarbstoffe nur der Hintergrund des Arzneimittels, wo Spermien mehr Kontrast zugeordnet. Normalerweise leben Spermien sind 80-90 % der Gesamtzahl.

Zählen der Spermien in 1 ml und in dem gesamten Volumen des Ejakulats

Die Anzahl der Spermien in 1 ml während des Ejakulats in einer Zählkammer Goryaeva berechnet.

Die Zahl der Spermatozoen in der gesamten Ejakulat wird durch Multiplizieren der Anzahl von Spermien im fest 1 ml Menge des Ejakulats (Milliliter).

• Notiz. Zählkammer kann auch die Anzahl von beweglichen Spermien zu bestimmen, Warum Ejakulat sollten mit warmem isotonischer Koch hloridz verdünnt werden und zählen die Anzahl der festen Spermien, und subtrahieren sie von der Gesamt.

Normalerweise in der 1 ml Sperma enthält 60-120000000. Sperma, wenn giperspermii - mehr 120 Millionen., in Oligo - von 30 bis 60 Millionen., was, meistens, was es unmöglich macht Befruchtung. Die beschriebenen Fälle, Wenn die Befruchtung stattfindet und Inhalt 1 ml эyakulyata 5 bis 30 Million. Sperma.

Sowieso bei der Ermittlung von Oligospermie 2-3 notwendigen Kontrollen Zählung der Anzahl von Spermien mit Intervallen von 3-4 Wochen auf ihre maximale Höhe zu bestimmen,. Bei Spermienzahl der gleiche Mann ist erheblichen Schwankungen unterliegen in physiologischen.

Normalerweise um das Ejakulat enthält mehr als 150 Million. Sperma.

Zählen Spermiogramm

Spermiogramms - ist der Anteil der verschiedenen morphologischen Formen von Samenzellen und Spermatogenese.

In einem Abstrich, mit Hämatoxylin-Eosin angefärbt oder Pappen, berechneten Mindest 200 Sperma, wobei die Anzahl von normalen und pathologischen Formen, und spermatogenic Zellen in Prozent ausgedrückt. Die Berechnung erfolgt mit Hilfe der Immersionsmikroskop Anlagen und Maschinen zum Zählen Leukogramm pre verändert die Namen der Tasten gemacht.

In einem normalen Ejakulat Spermien Normalformen ist 80-85 %, manchmal 100 %, diese umfassen physiologische Veränderungen, gekennzeichnet durch ungewöhnliche oder Hals, oder reduziert, oder vergrößerten Kopf.

Jung, oder unreife, förmigen Spermien um den Kopf und Hals der Rest des Zytoplasma ("Halsband"), mit häufigen Geschlechtsverkehr auf und sind nicht in der Lage Befruchtung.

Die alten Formen der Spermien (hyperchromia, axromija, Vakuolisierung Kopf) erscheint im Ejakulat nach längerer Abstinenz und nicht für die Befruchtung geeignet.

Pathologische Formen zählen Spermien mit Missbildungen des Kopfes: megalospermatozoidы (gigantospermatozoidы), Makro-, mikrospermatozoidy, Konisch, zwei Kopf Spermien mit einem Hals und einem Schwanz, ohne Hals mit einem oder mehreren Schwänze, ohne Schwanz, ohne Schwanz Kopf etc..

Bei gesunden Menschen in einem normalen Ejakulat abnormen Spermien Formen sind in der Regel nicht gefunden, aber manchmal ihre Zahl während des normalen Fruchtbarkeit kann das Ejakulat zu erreichen 20 %, von denen ca. 15 % Leiter der Pathologie, 3-5 % - Body, 2-5 % - Heck.

In pathologischen Spermatogenese, sekretorischen Form von Unfruchtbarkeit identifiziert Spermien mit abnormen Kopf-Hals-. Pathology tail Regel Ausscheidungs ​​Herkunft, Es tritt bei der Passage von Sperma vas Weisen.

In gefärbten Präparate sind ebenfalls deutlich sichtbar getrennt befindet Keimzellen in verschiedenen Stadien der Differenzierung und Reifung, es ist wichtig, Aspermie und Azoospermie differen.

Spermatogonien abgerundet, manchmal oval, Durchmesser von 5-12 Mikrometer. Der Kern nimmt etwa ein Drittel der Zellen, Dunkelheit- oder helle, 1-2-3 Nucleo- Lama, oft in der Nähe befindet karyotheca (Atomhülle), Chromatinstruktur melkozernystaya. Das Zytoplasma ist schmal, basophilen, Homogene. Spermatogonien divide mitotisch mehrmals. Es gibt Zellen, die mit wohldefinierten Mitosestadien.

Einige der Zellen, durch Mitose gebildet, дифференцируются в сперматоциты I, und II um. Spermatocyte ich bestellen - Runden oder polygonalen Zellen mit einem Durchmesser von 17-19 mm mit einem großen, runden Zellkern und Zytoplasma Lichtfein. In gefärbten Präparaten ist eine klare perinukleären Zone.

Spermatozyten II der Bestellung als Ergebnis der Meiose gebildet. Sie sind kleiner, als Spermatozyten I bestellen (Durchmesser 15 m), aber in der Morphologie fast identisch. Im Ejakulat häufiger, als Spermatozyten I bestellen, aber viel weniger häufig, als Spermatiden.

Spermatydы - Klein, runden oder länglichen Zellen mit einem Durchmesser von 12-15 mm mit rundem -hyperchromasie, mittig oder außermittig angeordnet ist. Es mag ein Multicore-Spermatiden sein. Pale Zytoplasma, bazafilnaya, oft vakuolisierten.

Spermatiden in Samenzellen transformiert.

Die Zellen der Spermatogenese bei normalen Spermiogramms nicht mehr als 2 %. Eine große Anzahl von Unfruchtbarkeit in der sekretorischen Natur beobachtet.

Für Phasenkontrastmikroskopie Ejakulat wird mit isotonischer Kochsalzlösung durch die Zugabe einer kleinen Menge verdünnter 1 % wässrige Lösung rivanola oder Karbolsäure auf die Beweglichkeit der Spermien reduzieren.

Mit Fluoreszenz-Mikroskopie Es wird auf einen Glasträger und einem Tropfen Ejakulat ein Tropfen Acridinorange im Zucht angewendet 1:20000. Die Tropfen werden gemischt und mit einem Deckglas abgedeckt. Mikroskop-Okular verwendet 7X und 40X-Objektiv. Live Spermien werden grün gefärbt, tot - Orange. Normale und abnormale Spermien Formen sind leicht zu unterscheiden durch ihre morphologischen Merkmale.

Rabotы Regeln der Phasen kontrastnom und lyuminestsentnom Mikroskop opisanы in instruktsiyah k эtim Instruments. Bei der Verwendung von Phasenkontrast und Fluoreszenzmikroskopie Spermiogramm nach den allgemeinen Regeln berechnet.

Auf der Basis der mikroskopischen Untersuchung des Ejakulats können verschiedene pathologische Zustände zu identifizieren.

• Spermatoschesis - Das Fehlen von Spermien im Ejakulat und die Zellen der Spermatogenese.
• Azoospermie - Fehlen von Samenzellen in Gegenwart von Spermatogenese.
• Asthenospermia - Verringerung der Anzahl der beweglichen Zellen und eine Erhöhung der Anzahl von pathologischen Formen unter normalen Anzahl von Spermien.
• Oligoastenospermiya - Verringerung der Anzahl der Spermien und deren mobile Formulare und die Erhöhung der Anzahl von pathologischen Formen.
• Nekrospermiya - Behoben: alle Spermien in der Vorbereitung auch nach der "Wiederbelebung".
• Akinospermiya - Bundesland, in der im Gegensatz zum vorher fest nekrospermii Spermien nach der "Wiederbelebung" beginnen zu bewegen.