Die mikroskopische Untersuchung der Zerebrospinalflüssigkeit
Bestimmung zytose
In der Zerebrospinalflüssigkeit von gesunden Personen enthalten eine sehr kleine Zahl von Zellen. Die klinische Bedeutung haben vor allem Leukozyten (Lymphozyten). Auf der weißen Blutkörperchen zählen nicht stören Erythrozyten, Sie zerstören sie durch Zugabe von unverdünntem Zerebrospinalflüssigkeit 1/10 Teilen Essigsäure Fuchsin. Magenta Farben kernhaltigen Zellen in rot. Zum Bemalen von Leukozyten unter Verwendung des Reagens Samson (gemischt 30 ml Eisessig, 2 ml verflüssigtes Phenol, 2 ml einer alkoholischen Lösung von Fuchsin 1 : 10 und gekrönt 100 ml destilliertem Wasser). Reagenz beständig, gute Flecken Zellen und innerhalb weniger Stunden hält sie davon ab Zytolyse.
Übernehmen als Lösung, umfassend 5 ml 10 % Essigsäure 0,1 Mr. metilvioleta. Es ist weniger stabil, Zellen zu färben blau.
Aufgrund der zytolytischen Eigenschaften der Zerebrospinalflüssigkeit, um die Anzahl der Zellen zu zählen sollte sofort nach der Einnahme werden. Die Flüssigkeit in das Rohr dosiert oder Mikrotropfen proportional 10 Teile der Zerebrospinalflüssigkeit und 1 Teil Farbstofflösung und links für 10-25 Minuten, um Zellen zu färben. Für die Zucht können Mischer Leukozyten verwendet werden,. Zellen Zerebrospinalflüssigkeit sehr schnell auf den Wänden der Rohre haften, so Flüssigkeit, Box in vitro, bevor die Studie müssen gründlich gemischt werden Drehbewegungen zwischen den Handflächen.
Um die Zellzahl berechnet wird verwendet, Kammer Fuchs-Rosenthal. Zählen Erzeugnisse in der gesamten Gitter durch 5 min nach dem Füllen der Kammer. Anzahl der Zellen, 1 L ist gegeben durch:
X =(A * 11)/(3.2*10)
worin X - Anzahl der Zellen in 1 l; A - Anzahl der Zellen, auf der Oberfläche des Bildschirms gezählt; 3,2 - Volumen der Kammer; 11/10 - Verdünnung.
Erlaubt die Registrierung der Zählungen als Bruch, zB 14/3, wo 14 - Die Anzahl der Zellen in der Kammer gezählt, 3 - Rundung Kammervolumen. Mit einer großen Anzahl von Zellen ausreichen, um sie in der einen Hälfte des Gitters und der Anzahl der empfangenen doppelt gezählt. Mit einem ausgeprägten Pleozytose (eine signifikante Zunahme der Zellzahl) erlaubt, Zellen zu zählen 16 Kleinen Plätzen und multiplizieren Sie diese Zahl durch 16.
In Abwesenheit der Fuchs-Rosenthal Kammer kann verwendet werden, Zählkammer Goryaeva mit einem deutlich geringeren Kapazitäts, daher gezählte Zellen mindestens drei Plätzen, berechnet das arithmetische Mittel und multipliziert es auf 1,2. Faktor 1,2 aus der Formel
X =(A * 11)/(0.9*10)
wo 0,9 Kapazitätskammer, 11/10 - Verdünnung.
Beim Zählen der Zellen in der Zerebrospinalflüssigkeit von unverdünntem einer der ersten Tropfen, die sich aus der Punktionsnadel, in einem Fuchs-Rosenthal gebracht und bestimmt die Anzahl von Zellen,, wie oben angegeben.
Normalerweise wird die Anzahl von Zellen, (Lymphozyten) in 1 l Zerebrospinalflüssigkeit von den Ventrikeln des Gehirns und Kleinhirn Tank 0-1, und Flüssigkeit, durch Lumbalpunktion erhalten - 2-4.
Kinder im Alter von drei Monaten 1 l Zerebrospinalflüssigkeit auf 20-23 Zellen gefunden wird, bis zu einem Jahr - 14-15, bis zu zwei Jahren - 11-14, von zwei auf fünf Jahre - 10-12, von fünf auf sieben Jahre 8-10, sieben bis zehn Jahre - 6-8, mehr als zehn Jahre - 4-5.
Bei Meningitis, Tumoren des Gehirns, Abszess und die Anzahl der Zellen in der zerebrospinalen Flüssigkeit zunimmt.
In der Studie von hämorrhagischem Zerebrospinalflüssigkeit in einigen Fällen ist es notwendig, seine wahre zytose etablieren. Hierzu wird die Friedmans Methode: hämorrhagischem Fluidzunahme Reagenz Samson Zellzahl und isotonische Natriumchlorid-Lösung zum Zählen der Zahl der roten bestimmen 1 l Zerebrospinalflüssigkeit.
Zum Beispiel, Anzahl der Zellen in 1 l - 20, die Anzahl der roten Blutkörperchen - 3600. Die Anzahl der roten Blutkörperchen und weiße Blutkörperchen aus dem allgemeinen Analyse erkennen die Patienten, vor Lumbalpunktion durchgeführt. Zum Beispiel, in 1 ml Blut 4 200 000 Erythrozyten-, 7000 Leukozyten. Daher muss man 4200000/7000 = 600 Erythrozyten Leukozyten.
Um den wahren Wert der zytose gleichsetzen zu erhalten:
auf 600 rote Blutkörperchen - 1 Leukozyt;
auf 3600 Erythrozyten - X Leukozyten, Folglich,
X = 3600/600 = 6 леикоцитов.
Wahre Zerebrospinalflüssigkeit zytose 20-6 = 14 Zellen 1 l.
Die Anwendung dieses Verfahrens ist begrenzt,, Da Cerebrospinalflüssigkeit mit einer beträchtlichen Blutbeimengung ist nicht geeignet für eine solche Studie.
Bestimmen der Anzahl von Erythrozyten in der Zerebrospinalflüssigkeit Es wird gesetzt, um die Schwere der Hirnblutungen des Patienten zu etablieren.
In Gegenwart von 1 l 2000-5000 Erythrozyten Zerebrospinalflüssigkeit wird rosa, 900-1000 Erythrozyten - nur leicht opaleszierende. Die farblose Flüssigkeit kann durch den unteren roten Blutkörperchen nachgewiesen werden. Die klinische Bedeutung ist die Erhöhung der Dynamik der Zahl der roten Blutzellen.
Zelldifferenzierung Zerebrospinalflüssigkeit in der Zählkammer in Form von nativen gehalten und gefärbt.
Bei hoher Vergrößerung (Okular 10X oder 15X, 40X-Objektiv) in der Zählkammer die Aufmerksamkeit auf die Menge an Zellen, Form, Die Lage und die Größe der Kerne, die Anwesenheit von Einschlüssen im Zytoplasma. Es ist leicht zu Lymphozyten differen, neutrophilen Granulozyten, Makrophagen. Normalerweise im Liquor nur Lymphozyten enthaltende.
Zur vollständigen Charakterisierung der zellulären Zusammensetzung von Liquor untersucht gefärbten Präparaten. Die Zellen wurden Flüssigkeits schlimmer gebeizt, als Blutzellen. Es gibt mehrere Möglichkeiten der Färbung: von Rosina, Tummeln, Papanicolaou, Alekseev, Kann Gryunvalydu, Pappengeymw.
Bestimmung der Art des Verfahrens der Fluoreszenz-Mikroskopie pleocytosis
Skim beschichteten Glasobjektträger und einem Rückgang von Zerebrospinalflüssigkeit mischen Sie es mit einem Fluorochromfarbstoff (eine Mischung aus wässrigen Salzlösungen von Acridinorange und Rhodamin in der Zucht 1:20000). Das gemischte Medikament wird unter einem Fluoreszenzmikroskop ML-2 in der blauviolettes Licht im sichtbaren Spektrum untersucht, Verwendung von Kombinationen von Anregungsfilter: FS 1-4, FBS 14-4, BS 8-2 und der Sperrfilter LS-1 Immersionslinse. Wie neflyuorestsiruyuschego Immersionsöl für die Forschung verwendet Dimethyl (Orthophthalsäure dimethylester).
In dem dunklen Hintergrund des Sichtfeldes und Lymphozyten Polynuklearen leicht durch das grüne Leuchten des Zytoplasma identifiziert. Count Zeile 100 Zelle, da die Anzahl der Lymphozyten und Neutrophile.
Lymphozyten verschieden von der Art der Neutrophilen Kern (glybchatoy Struktur mit orange Einschlüsse) und helle grüne Fluoreszenz.
Neutrophilen Granulozyten haben eine klare Struktur, ihre Kerne Chromatin diffus beleuchtet, gleichmäßige helle- grün. Cytoplasmic gelb- grün, es Streu ziegelrot Granulat.
Bei leichter zytose nativen Zerebrospinalflüssigkeit wird zentrifugiert und der Niederschlag Studie.
Fluorescent mikroskopische Untersuchung von Liquor macht es einfach, dass neutrophile abschließen, lymphatischer oder polymorphkernige Zell Natur Pleozytose.
Morphologische Eigenschaften von Zellen von Liquor
Lymphozyten
In der Zerebrospinalflüssigkeit von gesunden Menschen gefunden kleine und mittlere Lymphozyten (1-2 1 l) Größe von 4-6 Mikrometer. Diese runde Zellen mit einer großen Zellkern und Zytoplasma glybchatym sehr schmal.
Wenn lymphatischen Pleozytose (tuberkulöse Meningitis, Zystizerkose) zusammen mit kleinen und mittleren großen Lymphozyten erscheinen (8-9 M), Gelegentlich ist es möglich, Zellen, die mit direkten Spalt erfassen.
Die Anzahl der Lymphozyten (zusammen mit anderen Zellen,) steigt im Liquor bei Hirntumoren, Während chronische Meningitis. Bei neurochirurgischen Erhöhung der Anzahl der Lymphozyten in der postoperativen Periode auftritt, nachdem die Erhöhung der Zahl der Neutrophilen und zeigt ein positives Ergebnis.
Plasmazellen
Plasma-Zellen in der Zerebrospinalflüssigkeit nachgewiesen werden, wenn die aktuelle lang Entzündung im Gehirn und Hirnhäute. Morphologie Plasmazellen, wie, in Blut oder Knochenmark punktiert.
Diese abgerundete Zellen mit Èkscentričeski gelegen Kern und intensiv gefärbt, bazofylnoy Zytoplasma. In einigen Fällen kann ihre Zahl erreichen. 26%. Plasmazellen sind auch in der postoperativen Phase und bei den trägen Strom reparative Prozesse von der Hirnverletzungen gefunden.
Gistiocitы
In der normalen Zerebrospinalflüssigkeit werden manchmal als Einzelexemplare erkannt.
Im gefärbten Präparate haben Histiozyten einen großen Kern und relativ schmalen Zytoplasma. Die Höhe der Zellen aus 7 bis 10 m, Form rund oder unregelmäßig. Kernel Bobovidnoj oder unregelmäßig gelappte Form, normohromnoe. Nukleolus sichtbar bei Naturprodukten mit Fazovokontrastnoj Mikroskopie.
Wenn die Tuberkulose Meningitis in der Rückenmarksflüssigkeit eine große Anzahl von Histiozyten erkannt, separat gelegen und Akkumulation, die Basophilen Zytoplasma, intensiver gemalt.
Nach den verfügbaren Daten, einige Arten von Zellen können Nejroglii Histiozyten werden.. Eine große Anzahl von Histiozyten in der Rückenmarksflüssigkeit bei Patienten erkannt, sich einer Operation am Gehirn oder Rückenmark (Das zeigt eine aktive Gewebereaktion und normale Wundheilung), und bei Personen,, Meningitis und Cisticerkozom bei leiden während des entzündlichen Prozesses träge. Bei Hirntumoren mit Keimen im Podpautinnoe Raum oder ventrikuläre in Wand möglicherweise Histiozyten in der Zerebrospinalflüssigkeit in Verbindung mit Makrophagen und veränderten Zellen angezeigt., Was ist charakteristisch für die Entstehung rund um den Tumor reaktiven Zone.
Makrophagen
Makrophagen werden aus einem einzigen gebildet- Endothelzellen und multi-Arachnoidea und Monozyten. Elemente der endothelialen Arachnoidea vom Synzytium getrennt und werden abgerundeten Zellen, besitzen amöboiden Bewegung und Eindringen in die Rückenmarksflüssigkeit.
Makrophagen aktiv verschlingen und verdauen die Zellen und anderen Elementen, fallen in die Cerebrospinalflüssigkeit bei pathologischen Vorgängen,, Beitrag zu dessen Reinigung. Aufnahme in das Zytoplasma der Makrophagen leicht differenzierte Zelle und im gefärbten Präparate.
Makrophagen phagocytize Erythrozyten, zerstörte oder unveränderte neutrophilen Granulozyten, Fetttröpfchen, Kristalle von Gematoidina usw.. Oft das Zytoplasma der Makrophagen sind Vakuolen in verschiedenen Größen oder ein großes eine Vakuole, die nimmt fast des ganze Zytoplasmas, Dieser Kernel ist auf die Peripherie verdrängt.. In solchen Fällen hat die Zelle eine Art Ring-Ringknorpel Makrophagen.
Im Normalfall sind Makrophagen im Liquor cerebrospinalis abwesend. Auftritt beim normalen Citoze zeugt von Blutungen oder entzündlichen Prozess im zentralen Nervensystem. Eine große Anzahl von Makrophagen in der Zerebrospinalflüssigkeit in der postoperativen Phase zeigt eine aktive Rettung (positive Prognose). Eine kleine Anzahl von Makrophagen oder Mangel davon ausgedrückt Pleocitoze — ungünstige prognostische Zeichen.
Granulare Kugeln – Schaumzellen
Granulare Kugeln (Schaumzellen) Makrophagen sind groß mit mehreren Einschlüsse von Fetttröpfchen im Zytoplasma.
Dies ist am häufigsten abgerundeten Zellen, gemalte Fuksinom in dunkelbraun. Bei Verarbeitung der Liquor cerebrospinalis Sudan III-große Kugeln sind in Orange-rote Farbe bemalt.
Im Liquor bei Kontakt mit ihrer Flüssigkeit aus der Zyste unterschiedlicher Ätiologie erkannt, Abbau von Hirngewebe (zusammen mit Fett-Tröpfchen), manchmal in der postoperativen Phase, in einigen Hirntumoren (kraniofaringiome, Èpendimome usw.). Wenn der Tumor in der Nähe der Ventrikel des Gehirns befindet, die granulare Kugeln sind am häufigsten im Liquor aus den Ventrikeln erkannt.. Die Quelle der körnigen Kugeln sind mikrogliocity, Neben Oligodendrozyten, die Zellen der äußeren Hüllen von Schiffen und Arachnoidea.
Neutrophilen Granulozyten
Neutrophilen Granulozyten im Liquor cerebrospinalis ähnlich wie Nejtrofil′nymi Blut granulopitami, Ihrem Zytoplasma (in der Buchhaltung Kammer und die einheimischen Produkte) oft gestreckt oder hat einen Vorsprung (psevdopodii). Diese Vielfalt der Zellen erfolgt in den ersten 10-15 Minuten nach der Machtergreifung des Liquor cerebrospinalis und zeigt die Erhaltung nejtrofil′ny- MI Granulozitami Fähigkeit sich zu bewegen. Zeichnet sich durch einen segmentierten Kern, die Anzahl der Buckets in welche reicht von zwei bis fünf; gebänderte neutrophilen Granulozyten sind eher selten.
Wenn die neutrophilen Granulozyten CSF-Änderung vor der Speicherung, als andere Zellen. Kernel Neutrophile Granulozyten Lyse oder Segmente können gerundet werden, mit klaren Konturen, die United feine Pullover; Sie werden eine Art von separaten Granulat. Neitrofilny granulocite, von denen gibt es nur ein Segment aus einem abgerundeten kernel, im Aussehen ähnelt einem normoblast. Dort neutrophilen Granulozyten mit Konturen der Segmente geschwollen, fast das ganze Zytoplasma zu besetzen. Im gefärbten Präparate ist es möglich, alle Phasen von der Auflösung der neutrophilen Granulozyten zu beobachten – von Schwellungen bis zur völligen Zerstörung der Zellstrukturen, Wenn die Konturen des Zytoplasmas nicht sichtbar ist, und Kernsegmenten werden formlos, bestehend aus sanften Gitter chromatin. Eigentum an die Zellen, die Nejtrofil′nym Granulocitam kann nur in Reaktion auf die Peroxidase installiert werden: das Vorhandensein von grünlich-gelb oder braun Pellets erschüttert das Zytoplasma.
Manchmal sind im Liquor cerebrospinalis mit neutrophilen Granulozyten Piknotičnym Kernel als einen unregelmäßig geformten Klumpen des Giperhromnyh gefunden.
Neutrophilen Granulozyten erscheinen im Liquor cerebrospinalis Blutungen im Podpautinnoe Raum, entzündliche Erkrankungen des Nervensystems, nach neurochirurgischen Operationen. Neutrophile Granulozyten bedeutet mit Verunreinigungen des Blutes in die cerebrospinale Flüssigkeit Entzündung der Hirnhäute.
Die Vorherrschaft der unveränderten Neutrophile Granulozyten zeigt einen akuten entzündlichen Prozess.
Die plötzliche die Entstehung von Nejtrofil′nogo pleocitoza Wenn der Abszess unter dem Tretlager des Gehirns Brüche.
Bei abscesse, befindet sich tief in das Hirngewebe, häufig beobachtet Out of Focus ausgesprochen Pleocitoz mit einer Dominanz von Lymphozyten.
Wenn die Verlustleistung des entzündlichen Prozesses in der Zerebrospinalflüssigkeit erscheinen Degenerirovannye Formen der neutrophilen Granulozyten.
Das Vorhandensein von modifizierten und unmodifizierten neutrophilen Granulozyten ist charakteristisch für die fortschreitende entzündliche. Es sollte nicht vergessen werden, die unveränderte neutrophilen Granulozyten im Liquor cerebrospinalis mit frischem Blut Unreinheit erscheinen, in solchen Fällen müssen Sie eine korrigierende Citoza definieren..
Eosinophilen Granulozyten
Eosinophilen Granulozyten im Liquor cerebrospinalis Exemplare von Native differenzieren mit anderen Zellen durch die Anwesenheit von einer charakteristischen glänzende große Flecken, füllt das Zytoplasma. Zellen mit zwei-Blatt-Kern sind selten, Es gibt mehr als oft nicht Mononukleäre Formen. In farbigen Muster Morphologie der Èozinofil′nyh entspricht granulozitov, wie im Blut. In die Rückenmarksflüssigkeit erkannt in den meisten Fällen zerstört eosinophilen Granulozyten.
Der Inhalt der Èozinofil′nyh Granulozyten im Liquor cerebrospinalis in Cisticerkoze reicht von 1 bis 46%.
Die Entstehung der Meningitis als Komplikationen Cisticerkoznogo Arachnoiditis, begleitet von der Entstehung des Nejtrofil′nogo Pleocitoza und Reduktion der Èozinofil′nyh granulozitov. Für Abscedirovaniâ Èhinokokkovogo zeichnet sich die Blase im Gehirn durch die Präsenz in ihren Inhalten und Èozinofil′nyh neutrophilen Granulozyten, Das dient als ein zusätzlichen Zeichen unterscheiden es von durch. Manchmal kann eine große Anzahl von Èozinofil′nyh Granulozitov im Inhaltsverzeichnis die Zysten Tumoren des Gehirns und des Rückenmarks gefunden werden (nevrinome, kraniofaringiome, èpendimome, Krebsmetastasen im Gehirn). Ausgedrückt durch eine Erhöhung der Anzahl der Èozinofil′nyh Granulozyten im Liquor cerebrospinalis nach ventrikulären Cisternoskopii beobachtet werden.
Nach die Entfernung von Hirntumoren mit der aktiven heilende Wunde erhöht die Anzahl der Èozinofil′nyh granulozitov, Was kann als eine lokale allergische Reaktion auf Trauma und Hirnhäute Induktion Verfall von Gewebe-Produkte.
Die veränderten Zellen und Schatten
Dank der Citolitičeskim Eigenschaften von Liquor cerebrospinalis Zellen, in ihm eine lange Zeit, halten Sie nur die Konturen des Zytoplasmas und die Reste der Kerne. Bestimmen Sie ihre morphologischen Accessoire nicht möglich. In den meisten Fällen unterliegen solche Änderungen neutrophilen Granulozyten, Manchmal ist es die Zellen von bösartigen Tumoren. Leicht Zitolizu Zellen und Arachnoidea Èpendimy Ventrikel des Gehirns ausgesetzt.
Gewebe Basophils sind nach neurochirurgischen Eingriffen im Liquor gefunden..
Zellen der Arachnoidea Mater in der Rückenmarksflüssigkeit
Zellen der Arachnoidea mater (arahnoèndoteliâ) ist eine einzelne Schicht aus Epithelzellen, Sie können beide unterscheiden, bei der Berechnung der Citoza in der Kamera, und im gefärbten Präparate, hergestellt aus Schlamm des Liquor cerebrospinalis. Dies ist eine ziemlich große Zellen unregelmäßig geformte oder gerundet, mit relativ kleinen runden oder ovalen Kern, ein zentral gelegenes.
Die Kerne sind Gipohromno gemalt., und das Zytoplasma ist blass- oder grau-blaue Farbe, Es hat gezackte Kanten und enthält oft Einschlüsse phagozytiert Partikel (Fett-Tröpfchen, zelluläre Elemente, Vakuolen). Das Zytoplasma der Zellen der Arachnoidea Mater wird oft zerstört, in solchen Fällen erkannt die charakteristischen Kern und Zytoplasma Fetzen. Chromatins der Kerne ist Melkopetlistuû oder körnige Struktur, Manchmal spürbar einen blauen Kern. Die Höhe der Kerne von 5 bis 19 m.
Anwesenheit von einzelnen Zellen in der Zerebrospinalflüssigkeit noch Arachnoidea ist bezeichnend für Pathologie, weil diese Zellen den Podpautinnoe Raum Linie und, sluŝivaâs′, in der zerebrospinalen Flüssigkeit bekommen. Die Erhöhung der Anzahl der Zellen der Arachnoidea wird bei Arahnoidite beobachtet., Gehirn cisticerkoze. In den Inhalt des Arahnoidal′noj befindet sich Zysten erkannt separat Arachnoidea Zellen und ihre Simplasty in Form von Gruppen der Kerne von unterschiedlicher Größe und Intensität der Färbung, umgeben von hellen Zytoplasma ohne klare Grenzen zwischen Zellen.
Choroid Plexus Zellen
Die ventrikuläre choroid Plexus im Liquor können polygonale eingeben, abgerundet, manchmal große zylindrische (15— 19 µm) Zelle. Klein (4— 5 μm) befindet sich im Zentrum von dem Kern oder èkscentričeski, hyperchromatische, Eosinophilen Zytoplasma, intensiv gefärbte. Im Zytoplasma der Zellen von choroid Plexus hat eine Korngröße, manchmal in Form von Glybok und Einschlüsse, Größe 1 bis 3 µm, abgerundete oder unregelmäßige Form, grünliche oder bläuliche Farbe. Einige Zellen können erkannte Vakuolen oder Gefangenen Erythrozyten werden..
Zellen choroid Plexus, die am häufigsten in Flüssigkeit aus den Ventrikeln des Gehirns.
Èpendimy Zellen der Ventrikel des Gehirns in den Liquor cerebrospinalis
Èpendimy Zellen der Ventrikel des Gehirns in den Liquor cerebrospinalis, durch Lumbalpunktion erhalten, leicht zerstört Kochen und malen Vorbereitung. In einem farbigen Abstrich haben sie Art von Entitäten, bestehend aus einem ovalen Kerne mit weichen Struktur. In einigen Zellen erhalten Zytoplasma umgibt den Kern wie einen schmalen Rand.
In Flüssigkeit aus den Ventrikeln des Gehirns sind am häufigsten vorkommenden Zellen Èpendimy mit erhaltenen Struktur, morphologisch ähneln Sie Zellen der Arachnoidea mater, aber der Kern der ihre bemalten blasser und haben eine weitere sanfte, homogene Verteilung des Chromatins. Ovale Zellen oft Èpendimy Polen darauf hingewiesen, Das Zytoplasma hat eine gräuliche Farbe. Es werden separat gelegen und große Gruppen von Zellen, die nicht durch die Grenzen der einzelnen Zellen festgestellt werden kann.