Verfahren zum Nachweis von Leishmania in der Schaben der betroffenen Gewebe durch Isolierung des reinen Kultur

Bei der Aussaat von Schaben der betroffenen Gewebe des Patienten zu einer bestimmten Nährmedium Leishmania multiplizieren und sie können durch Mikroskopie erkannt werden.

Reagens

Среда W.W.W. für den Anbau von Leishmania (14 g Agar, 6 g Natriumchlorid, über 150 ml defibriniertem Kaninchenblut, direkt aus dem Herzen vor der Zubereitung Medium aufgenommen, 900 ml destilliertem Wasser). In destilliertem Wasser wurde das Natriumchlorid und Agar. Der Kolben, der das Medium bis zum vollständigen Schmelzen des Agars erwärmt und 20-30 min in einem Dampfsterilisator sterilisiert zumin 147,1 kPa (15 beim).

Gekühlt 56 ° C Agar sterile defibriniertem Kaninchenblut, Durch Drehen des Kolbens gerührt und in sterilen Pipette gefüllt 4 ml-Röhrchen. Flask Blutagar bei der Abgabe ist ein Wasserbad bei einer Temperatur 58 ° C. Die Rohre mit den mittel-Tipps.

Nach dem Erstarren des Agars, wurden sie in einem Brutschrank für einen Tag bei platziert 37 ° C für Sterilitätskontrolle und Aufnahme des flüssigen Kondensats. Wenn es hergestellt wird, ist nicht genug, vor der Saat in sterile Fläschchen, können Sie fügen zu 1 Ein ml der folgenden Lösungen: 0,85 % Kochsalz, 1 % Peptonlösung, Hanks-Lösung, Lactalbuminhydrolysat oder andere Nährmedien in isotonischen Konzentrationen.

Verfahren zum Nachweis von Leishmania in scrapings der betroffenen Gewebe durch Isolierung von Reinkultur

Wenn Sie eine Kultur wählen Sie sorgfältig die Regeln der Sterilität. Die Testfläche der Haut wird mit einem Wattestäbchen abgewischt, befeuchtet 70 % Alkohol.

Nach Verdampfung des Alkohols das scharfe Ende einer sterilen ophthalmischen Skalpell Einschnitt Tuberkel Länge von 2-3 mm. Von der Unterseite der Schnitt mit steriler Pasteurpipette weiß kratzen Gewebe. Der daraus resultierende Rückgang seröser-blutige Flüssigkeit mit der Umgebung in einem Teströhrchen über. Manipulation wird mehrmals durchgeführt, Aussaat Material jedes Mal eine neue Röhre. Ohrstöpsel in Paraffin eingebettet oder legte sie Gummikappen und in einem Brutschrank bei 22 bis 24 ° C gestellt.

Auswertung der Ergebnisse

Kulturen unter dem Mikroskop täglich geprüft, um die Erreger zu identifizieren. Entdecken einheimischen Drogen, nach der Methode von zerkleinertem Tropfen zubereitet, die Linse 40×40. Die Ergebnisse werden als negativ Aussaat, wenn in 40 Tage Erreger wurde nicht gefunden. Kulturen sind länglich Leishmania (10-12 Microns mit Verkabelung).

Anwendung der Kultur-Methode ist besonders nützlich, wenn tuberculoid Form der Leishmaniose, Diagnose, dass andere Verfahren weniger wirksam sein.