Fremgangsmåder til påvisning af Leishmania i skrabning af det påvirkede væv efter isolering af ren kultur

Ved såning skrabe det påvirkede væv af patienten til et specifikt næringsmedium Leishmania multiplicere og de kan påvises ved mikroskopi.

Reagens

Среда W.W.W. til dyrkning af Leishmania (14 g agar, 6 g natriumchlorid, om 150 ml defibrineret kaninblod, taget direkte fra hjertet, før forberede medium, 900 ml destilleret vand). I destilleret vand blev tilsat natriumchlorid og agar. Kolben indeholdende mediet blev opvarmet indtil fuldstændig smeltning af agaren, og 20-30 min steriliseret i en damp sterilisator ved 147,1 kPa (15 på).

Afkølet til 56 ° C agar tilsat steril defibrineret kaninblod, omrørt ved at rotere kolben og fyldes i steril pipette 4 ml-rør. Kolbe blodagar under dispensering er et vandbad ved en temperatur 58 ° C. Rørene med mediet tips.

Efter størkning af agaren, placeres de i en inkubator for en dag på 37 ° C for sterilitet kontrol og modtager det flydende kondensat. Hvis det er fremstillet, ikke er nok, før såning i sterile hætteglas, kan du tilføje om 1 En ml af følgende løsninger: 0,85 % natriumchlorid, 1 % pepton løsning, Hanks løsning, lactalbuminhydrolysat eller andet næringsstof medier i isotoniske koncentrationer.

Metoder til påvisning af Leishmania i afskrab af berørte væv ved isolering af ren kultur

Når du vælger en kultur nøje følge reglerne for sterilitet. Testområdet af huden aftørres med en vatpind, fugtet 70 % alkohol.

Efter afdampning af alkoholen den skarpe ende af en steril ophthalmisk skalpel indsnit tuberkelbakterier længde på 2-3 mm. Fra bunden af ​​snittet med steril Pasteur-pipette do skrabning væv. Den resulterende dråbe serøs-blodig væske blev overført til et reagensglas med miljøet. Manipulation udføres flere gange, udsæd materiale hver gang et nyt rør. Ørepropper indlejret i paraffin eller sætte dem gummi caps og placeret i en inkubator ved 22-24 ° C.

Evaluering af resultaterne

Afgrøder undersøges under et mikroskop på daglig basis for at identificere den udløsende agens. Udforsk indfødte lægemidler, fremstillet ved fremgangsmåden ifølge knuste dråber, linsen 40×40. Resultaterne betragtes som negative såning, hvis i 40 dage patogen blev ikke fundet. Kulturer er aflange Leishmania (10-12 Mikron med ledninger).

Anvendelse af kulturen metoden er mest nyttig, når tuberculoid form for leishmaniasis, diagnostik, at andre metoder kan være mindre effektive.