Fremgangsmåder til påvisning af Leishmania i knoglemarv smear
Reagenserne til påvisning af Leishmania
- Methylalkohol, eller absolut ethylalkohol, eller en blanding af Nikiforov (blanding af lige mængder af ether og absolut ethanol).
- Фосфатный буфер pH 6,9-7,1, til fremstilling af som er blandet 40 ml KH2RO4 (9,078 g tørstof KH2RO4 i 1 liter opløsning) og 60 ml Na2FO4 (11,876 g tørstof 1 liter opløsning).
- Azureozin Romanovsky.
Metoder til påvisning af Leishmania i knoglemarv smøre
Fra knoglemarv punktformig umiddelbart efter at tage sig, ikke at knuse eller deformere celler,forberede tynde udstrygninger. Hvis tætte punktformet, gøre aftryk. Når betydelig blod i punktformig fra det isoleret på glasset lidt hvidlige klumper af fedt, hvis de adskiller sig, og forberede dem udstrygninger.
Det fremstillede smear lufttørres, derefter fikseret, som blodudstrygninger. Tørre faste udstrygninger kan opbevares i flere dage.
I smear hældt fortyndet i puffer farve Romanovsky (omkring 3-5 ml) og efterladt i 30 50 m. Efter farvning skyllet med destilleret vand, tørret og undersøges under et mikroskop med nedsænkning systemet.
Evaluering af resultaterne af påvisning af Leishmania i knoglemarv smear
Midt i Leishmania sygdom normalt findes i knoglemarven punktformig i en betydelig mængde, og derfor er de lette at finde. Men på det tidlige stadie af sygdommen og hos patienter behandlet for, at identificere den forårsagende middel, Det kræver en lang visning af alle smear (ikke mindre 40 m).
Leishmania fundet i makrofager eller ekstracellulært som afrundede eller risovidnyh celler 3-5 mikron i diameter. Den cytoplasma er farvet grå-blå farve, og kernen - i en rødlig-lilla. I cytoplasmaet, som ligger kinetoplasts - stavformede eller afrundet uddannelse, intenst farvet kerne.
For Leishmania nogle gange tage blodplader eller "skårene" af celler (Komocki citoplazmy, indeholdende nukleart materiale), findes i knoglemarv udstrygninger, udenlandske mikroorganismer (f.eks, encellede alger), fanget i en smear under maling. Det farvede udstrygningspræparat er sværere, end Leishmania (mørkeblå cytoplasmaet og kernen af lyse Crimson), kinetoplasts mangler.