Knoglemarv – Udarbejdelse af materiale og madlavning forberedelser til mikroskopisk undersøgelse af knoglemarv

En detaljeret undersøgelse af den cellulære sammensætning og struktur af knoglemarven er begyndt med indførelsen til klinisk praksis brystbenslymfeknuderne punktering metode, foreslåede M. OG. Arinkin i 1927 by, og så intravital histologiske Forskning punktat ilium hjælp trepanobiopsy.

Metoden til brystbenet punktering

For at udføre brystbenet punktering til M. OG. Arinkin anvendte punktur nålebiopsi, der har en beskyttende plade, som kan indstilles til den ønskede dybde, afhængigt af tykkelsen af ​​huden og subkutant fedt, sikre punktering bagpladen af ​​brystbenet.

Knoglemarv nasasyvayut sprøjte 10-20 ml-montering stempel til at levere den nødvendige vakuum. Punktere produceret i testen position liggende på ryggen på niveauet for binding af III-IV ribber midterlinjen, som den forreste væg af legemet af brystbenet er tyndere og har en flad eller let konkav overflade, mest praktisk for punktering. Udover, inden for knoglemarvsceller det indeholder et stort antal.

Kan ribben og punkteret torntappene af hvirvlerne (ofte - III og IV lumbal). Når punktere af torntappene i hvirvlerne patienten sidder, lænede sig frem. Hos børn er risikoen for punktering brystbenet på grund af sin større elasticitet og individuelle forskelle i tykkelsen af ​​knoglen. Derfor børn, især nyfødte og spædbørn, foretrukket at fremstille en punktering i den øverste tredjedel af skinnebenet på indersiden af ​​den distale femorale epifysen eller calcaneus. Punktur af iliaca producere 10-20 mm posteriort for den forreste rygsøjlen.

Fremgangsmåden til opnåelse af knoglemarv undersøgelse af brystbenet punktering

Indstiksstedet desinficeres med alkohol og en alkohol opløsning af jod. Derefter huden, spæk og periosteum infiltreret fin nål 2 ml 1-2 % Novocaine. Måske punktering uden analgesi eller anæstesi af huden ved hjælp chlorethyl.

Sprøjten og punkturnålen steriliseres ved tørmetoden eller dampkogte, tørres grundigt med alkohol, derefter ether.

Før du foretager en punktering, ved hjælp af et skruegevind, et sikkerhedsskjold til den ønskede dybde og punktering indsat dorn. Vejledende data, der skal følges under installationen af ​​sikkerheden skjold ved en punktering af brystbenet, er vist i tabel.

Kanylen vinkelret på brystbenet for midterlinjen, hurtige bevægelser gennembore huden, spæk og en ydre plade af brystbenet. På dette tidspunkt modstanden falder, og nålen, som om at synke, inkluderet i knoglemarven. Det er således lodret indstillet, motionlessly. Hvis nålen ikke er i en lodret stilling, derefter, uden at fjerne det, skubbe sikringen er lidt højere og re-fremmende nålen.

Det bør tages i betragtning, at kræft, myelomatose, osteomyelitis og andre osteolytisk proces nål, at komme ind i læsionen, møder mindre modstand og er ikke fastgjort til knoglen.

Efter at nålen er trængt ind i knoglemarven, stilet fjernes, og sprøjten hviler fast. Yderligere, trække stemplet af sprøjten, nasasyvayut ikke mere 0,5 ml knoglemarv (når mere punktat det kan få en masse af perifert blod).

Hvis du får en knoglemarvstransplantation svigter, derefter, uden at fjerne kanylen, fjern sprøjten, genindført i nålen stiletten og overføres til en anden stilling - over, under eller ved siden. Så igen nasasyvayut sprøjte lidt punktformet. Efter knoglemarven høst nål, uden at afbryde sprøjten, fjernet fra brystbenet, og indstiksstedet er lukket sterilt mærkat.

Det resulterende materiale blev overført til et urglas og hurtigt i blanderen nasasyvayut leukocytter eller røde blodlegemer til mærket 0,5 (anbefales at bruge en mixer-melanzhera erythrocytter ved normal eller forhøjet antal leukocytter i perifert blod, og hvis leukopeni --mixer for leykotsytov Melanger).

Derefter, på en etiket "11" for leukocytter i blanderen eller på en etiket "101" til blanderen for erythrocyt vinder 3-5 % eddikesyre. Indholdet af blanderen blandes grundigt, udledes fra den kapillære del af væsken, og de efterfølgende dråber og fylde optælling kammer blev talt som leukocytter blodlegemer, overvejer fortynding i en egnet blander. Total myelokaryocytes (celler med kerner) der spænder fra 50 Til G 250 T i 1 l, tilsyneladende, på grund af knoglemarv uens sammensætning på forskellige områder.

Tælle det absolutte antal er ikke afgørende myelokaryocytes. I de fleste tilfælde begrænset til at tælle procentdelen af ​​smear punktformig række kerneholdige celler. Samtidig antallet af celler bedømmes forventede udstrygning.

Til fremstilling af narkotika fra brystbenet punktformig på en vagt glaspartikler indsamlet knoglemarv og forberede dem tynde streger, blod blanding fjernes via et filtrerpapir eller en Pasteur-pipette.

Af stor praktisk betydning er den korrekte udarbejdelse af en udstrygning af knoglemarv væv, som en blanding af perifert blod fordrejer sammensætningen af ​​dens celler. I et ordentligt forberedt eksemplar celler er tæt, men hver for sig, og deres struktur er klart synlig. Det anbefales at udarbejde en række slag, bruge hele materialet opnås i punkteringen. Udstrygninger bør være forberedt hurtigt, idet foldningen af ​​knoglemarven sker tidligere, end den perifere blodpropper, og cellerne kan blive beskadiget som, at de ikke kan skelne.

Når hedder aplastisk knoglemarv smears viste et lille antal celler, nogle gange er der ingen. For at tydeliggøre, Dette er en konsekvens af sygdommen proces eller forkert udført punktering, kræves gentagen punktering og forskning punktformig.

Fastsættelse og maleri slag udføres i samme punktformig, samt de perifere blodtal, bedst af alt de er malet på Pappenheim-Kryukov.

Biopsi af ilium

Behovet for in vivo-undersøgelse af histologiske præparater af knoglemarv, opnås ved trepanobiopsii, opstår, når punktering er ikke muligt at få nok materiale til at bekræfte tilstedeværelsen af ​​en patologisk proces.

Særligt vigtigt erhverver histologiske metoder for sygdomme, Leukæmi, polycytæmi vera (erythremia), osteomyelofibrosis, gipoplasticheskaya anæmi.

At punktere og udvinding af knoglevæv er foreslået at anvende en nål-trokar, bygget på princippet om punktering-biopsi nål. Tykkelsen af ​​nålen-trokar 3 mm, den indvendige diameter 2 mm, længde 40 mm. Den distale ende af nålen som en kutter, spiral, hvorved det er muligt under rotation til at skære knoglevævet. Nålen består af en dorn (stilet med en spids ende) og håndtag.

Fremgangsmåden til opnåelse af knoglemarv undersøgelse af trepanobiopsy

Punktere produceret i hoftebenskammen, vis afstand 20-30 mm posteriort for den øverste forreste rygsøjlen. Teknisk set er det mere praktisk at gøre en biopsi af den venstre-fløj.

Indstiksstedet desinficeres med alkohol og en alkoholisk opløsning af jod. Nålen er præ-steriliseret ved kogning eller tørmetoden, og derefter tørret med alkohol og ether. Med gevind, en sikkerhed nålekappe til den ønskede punktere dybde, under hensyntagen til tykkelsen af ​​det subkutane fedt.

Før indførelsen af ​​trokaren nålen producere anæstesi af huden, subkutant væv og periosteum 2 % opløsning af Novocaine.

Indtrængende nåle-trokar i det bløde væv, lansen dorn føler efter et sted på knoglen, hvor du ønsker at gøre en punktering. Nålen bliver så drejebevægelser under pres indføres i knoglen. Når du føler dig stærk fiksering af nålen stiletten fjernes. Afbryd dornen og håndtaget, Sidstnævnte er skruet på nålen, fast i knoglen. Cirkulære bevægelser med uret nål indsættes i knoglen. Så, som den roterende bevægelse udvindes det. Cylindrisk kolonne knogle, i anmodning pins, skubbe stiletten fra lumen af ​​nålen på et dias, og derfra overført til en krukke med formalin og sendt til histologisk undersøgelse.

Af de resterende glas, nål og stilet af knoglemarv udstrygninger gøre. Oftere end ikke umuligt at skære og fjerne et stykke af knogle i længde 6 til 10 mm, og undertiden mere.

I knoglemarv hos raske mennesker og patienter med hyperplastiske processer afslører mange forskellige celler. Ved svær hypoplastisk (aplastisk) trepanat proces er gul, på grund af den næsten fuldstændige mangel på knoglemarv og erstatte den med fedtvævet.

I alle former for osteomyelofibrosis myelofibrose og ekstraheret et stykke knogle ser "tørre" og fra er det muligt at udtrække kun en meget lille mængde knoglemarv udstrygninger til madlavning.