Anæmi, forbundet med folinsyre-mangel

Uanset grunden folinsyre mangel anæmi er karakteriseret ved fremkomsten i knoglemarven megaloblasts, intramedullære ødelæggelse erythrokaryocytes, patsitopeniey, makrocytose og hyperchromia røde blodlegemer og til tider - psykiske lidelser.

Folievaya (pteroilglutaminovaya) syre (vitamin B₉) Den består af tre komponenter:

• pteridinringen;
• P-aminobenzoesyre (tilsammen udgør pteroievuyu syre);
• glutaminsyre.

Molekylvægten af ​​folinsyre - 441. Folinsyre er aktiv i form af tetrahydrofolsyre-derivater. Folinsyre indhold i forskellige former i den menneskelige krop er ca. 5-10 mg. Bestande i strid med dets optagelse i kroppen kan være udtømt i løbet 4 Månedens.

Det daglige behov for folinsyre er 100-200 mikrogram, Graviditet, hæmolytisk anæmi, det øger mange gange.

Den totale mængde af folinsyre i kosten med den fulde effekt af 500-600 mikrogram per dag. Folat - folater indeholdt i betydelige mængder i leveren, gær, spinat, kød. Mere 50 % folsyre, i fødevarer, Det kan blive ødelagt, når kogt.

Folinsyre absorberes i øvre tyndtarm. Evnen af ​​tarmene til at absorbere folinsyre er langt større end dens daglige behov.

Folinsyre deltager i syntesen af ​​pyrimidin- og purinbaser, sammen med methylcobalamin - syntesen af ​​uridinmonofosfata timidinm nofosfata. Folat coenzymer Mere involveret i en række reaktioner. Specielt, tetrahydrofolat deltager i syntesen af ​​glutaminsyre histidin.

Ætiologi og patogenese anæmi under folinsyremangel

Folinsyremangel, samt underskud på cobalamin, Det fører til udvikling af megaloblastær anæmi.

Malabsorption af folat observeret i individer, resektion af tyndtarmen, især jejunum, samt på længere sigt tager antikonvulsiva såsom diphenylhydantoin (difenina) og phenobarbital (luminale). Indtagelse af folinsyre er brudt, når sprue og cøliaki. Folinsyremangel, samt underskud på cobalamin, observeret ved blind loop syndrom. Beskrevet sjældne tilfælde af arvelige sygdomme i folinsyre transport over tarmvæggen og ind i cerebrospinalvæsken. Absorption af andre stoffer uden at lide.

Folinsyremangel hos nyfødte observeret i præmaturitet, overtrædelse af intestinal absorption, Fed gedemælk, indeholdende en lille mængde af folinsyre.

En væsentlig malabsorption af folinsyre kan forekomme hos patienter, alkoholikere.

Øget forbrug af folinsyre under graviditet Det kan føre til en mangel på folinsyre, Men i de udviklede lande i dag er det sjældent. Folinsyremangel hos gravide kvinder findes i lav effekt, tilstedeværelsen af ​​hæmolytisk anæmi, brug før graviditeten et stort antal alkoholholdige drikkevarer.

Kliniske manifestationer af folatmangel

Folinsyre mangel hos børn og unge kvinder. Samtidig, patienter klager over generel svaghed, svimmelhed. I modsætning til cobalaminmangel ømme tungen sjældent observeret. Paræstesier, og andre tegn på kabelbane Myelose mangler. Sclera ofte ikterichnost.

I modsætning til underskuddet af cobalaminmangel af folinsyre er sjældent observeret gistaminoupornaya Akhil, gastratrophia, selvom faldet i gastrisk sekretion er ofte.

For folatmangel, samt for mangel på cobalamin, kendetegnet ved fremkomsten i det perifere blod makrocytose, megalocitov og megaloblasts, tilstedeværelsen af ​​hyperchromic anæmi, reducere antallet af reticulocytter, blodplader og leukopeni med neutrofil skift til venstre og højre. I knoglemarven - megaloblasts.

Ændringerne i nervesystemet er forskellige fra manifestationerne på B₁₂-anæmi.

Bevist, at personer med epilepsi, Folinsyre-mangel fører til hyppige anfald, til deres større sværhedsgrad. Dette er særlig vigtigt på grund af det faktum,, at tage antikonvulsiva kan forårsage malabsorption af folat. Ifølge litteraturen, hos personer med skizofreni folinsyre mangel fører til forværring af sygdommen, mere alvorlige symptomer og mindre effektiv behandling.

Differential diagnose af cobalaminmangel og folinsyre

For differentialdiagnose af cobalaminmangel og folinsyre bruges radioimmunassay metode til bestemmelse af folinsyre i serum og især i erytrocytter. Indholdet af cobalamin bestemmes ved mikrobiologiske metode. Som testorganisme anvendes som Streptococcus faecalis og Lactobacillis casei. Normalt indholdet af folinsyre i blodserum intervaller, Ifølge forfatterne, ved hjælp af forskellige forskningsmetoder, fra 3 til 25 ng / ml, og erythrocyt - fra 100 til 425 ng / ml.

I folinsyremangel falder, når niveauet af serum, og i erytrocytter. Ved mangel kolabaminov folinsyre indhold i blodet serum ofte stiger, og erythrocytter kan undertiden reduceres, selv om faldet, normalt, en lille.

Til diagnosticering af folinsyre-mangel er også brugt Load metoden histidin (15 g), derefter definere indholdet af syre i urinen formiminglutaminovoy. Normalt hovedparten af ​​de former for glutaminsyre histidin. Med urinproduktion 1-18 mg formiminglutaminovoy syre. Ved mangel på folinsyre til 8 timer efter dens indførelse i kroppen frigives fra urin 20 til 1500 mg formiminglutaminovoy syre. Et betydeligt antal formiminglutaminovoy syre udskilles i urinen efter administration af histidin i personer, behandlet med methotrexat. Ved mangel på cobalamin, skrumpelever urinudskillelsen af ​​syre øger formiminglutaminovoy, i mindre grad, end med et underskud af folinsyre. Normale niveauer af urin methylmalonsyre indhold stiger formiminglutaminovoy syre histidin efter at have modtaget dokumentation for mangel på folinsyre, i stedet for cobalamin.

Det hjælper til at skelne mellem disse to stater og radionuklid undersøgelse. Ved mangel på cobalamin, i forbindelse med overtrædelse af sekretion af intrinsic factor, nedsat absorption af mærket cyanocobalamin, en mangel på folinsyre, absorberes det korrekt.

Ved mangel på folinsyre, dens indføring i kroppen fører til et højere indhold af reticulocytter, henviser injektion af cyanocobalamin (derivater) ineffektive. Folinsyremangel methylcobalamin øger niveauet af reticulocytter.

Definition indeks segmentering neutrofiler

Tæl antallet af neutrofiler, med 4 segment og mere (Total 200 celle). Bestem procentdelen af ​​celler, med 5 segmenter og mere i forhold til mængden af ​​celler, med 4 segment. Indekset er bestemt af formlen:

IS =(KS (5 og mere))/KS(4);

hvor IC - index segmentering;

KS (5 og mere) - Antallet af segmenterede neutrofiler (på 200 celle), hvor antallet af segmenter er lig med 5 eller mere;

KS (4) - Antallet af segmenterede neutrofiler, hvor antallet af segmenter er lig med 4.

Normalt, dette indeks intervaller 2,5 til 25 %. Hvor, når den overstiger 30 % (svingninger 120%), Du kan tale om hypersegmentation neutrofiler. Det observerede mangel på folinsyre, metilkoʙalamina, og uræmi.

Bestemmelse af methylmalonsyre i urin ved Giordio og Plaud

Reagenser.

1. Ionbytterharpiksen Dowex-Zx4 (chloridform, 200-400 Mesh). Harpiksen blev vasket med fem volumener destilleret vand 3 gange, blev suspenderet i to volumener destilleret vand og opbevaret i et mørkt skål ved 4 ° C.

2. En opløsning af para-nitroanilin 0,075 % fremstillet ved at opløse 37,5 mg reagens 500 ml 0,2 M opløsning af saltsyre. Opbevares i en mørk gryde, Det forblev stabile i adskillige måneder ved stuetemperatur.

3.Acetatbuffer (pH 4,3) fremstillet af 1 M natriumacetat og 1 M opløsning af eddikesyre.

4.Diazoreaktiv: 4 ml 0,5 % natriumnitrat opløsning blev blandet med 15 ml para-nitroanilin. Blandingen blev anbragt i et køleskab ved 4 ° C, og den afkølede opløsning blev tilsat 4 ml 0,2 M natriumacetat. Reagens stabile ved temperaturer 4 ° C for en dag.

5.Normal 0,05 M opløsning af methylmalonsyre: 295 mg methylmalonsyresænkende opløses i 50 ml vand.

Metode

Urin blev opsamlet i en glasflaske og frosset indtil undersøgelse. For at undersøge ladningen del af urin (20- 25 ml), optøet, tsentrifugiruyut, og supernatanten blev opsamlet under anvendelse af en svag opløsning af natriumhydroxid eller saltsyre til justering af pH 6,5.

Søjlehøjde Kromatografisk 20 cm og en diameter 1 cm blev fyldt med Dowex-Zx4. Harpikslaget skal være inden 3 cm. Ledes gennem harpiksen 5 ml urin, vasket med destilleret vand (2 × 50 ml ved en hastighed på ikke mere end 15 ml 1 fra). Methylmalonsyresænkende kan elueres fra harpiksen 20 ml 0,1 M opløsning af saltsyre. Yderligere 2 ml eluat blev blandet med 3 ml 1 M acetatpuffer pH 4,3 i et reagensglas med en glasprop (15×2cm). Til blandingen tilsættes 3 ml kold diazoreaktiva, hvor pH hæves til 4,0. Blandingen blev opvarmet i et vandbad ved en temperatur 94 ° C. 3 min og 2 ml 3 M natriumhydroxidopløsning. Røret blev derefter fjernet fra vandbadet, tilproppet og indholdet omrøres. Blandingen blev afkølet ved stuetemperatur i 10 min og ved fotometriruyut 620 nm i en kuvette med en banelængde 1 cm.

Som kontrol blev en blanding af, bestående af 2 ml 0,1 M opløsning af saltsyre, 3 ml og diazoreaktiva 3 ml acetatbuffer. Methylmalonsyresænkende standardopløsning består af de samme komponenter, og 0,02 ml 0,05 M opløsning af methylmalonsyre. Absorbansen af ​​disse løsninger blev målt under de samme betingelser.

Indhold methylmalonsyresænkende (mg) enhedsvolumen af ​​urin (1 l) defineret ved formlen:

(IS_Prøve-IS_kontrol)/(IS_standard-IS_kontrol)*EN*((1000*T)/M)

hvor E - absorbansen af ​​forskellige prøver;

A - mængden af ​​methylmalonsyre i en standard reagensglas, ml;

1000 - Mængden af ​​urin, taget til forskning, ml;

T - mængden af ​​saltsyre, taget til eluering, ml;

M - antallet af eluatet, taget til forskning, ml.

Under de ovennævnte betingelser, kan formlen forenkles som følger::

(IS_Prøve-IS_kontrol)/(IS_standard-IS_kontrol)*236

Hvor, når mængden af ​​methylmalonsyre i urinen er større end 300 mg / l, bør være re-blandes med acetatbuffer eluat og diazoreaktivom, men i stedet 2 ml eluat hensigtsmæssigt at gribe 4- 10 gange lavere og bringe lydstyrken til 2 ml 0,1 M saltsyreopløsning. Beregningen skal tage hensyn til fortynding.

Normalt per dag med urinproduktion 0,6-4,7 mg methylmalonsyre. Ved mangel på cobalamin daglige udskillelse af sure strækninger methylmalonsyre 294 mg. Normalt modtagelse 10 g valin ikke øge clearance af methylmalonsyre, cobalaminmangel øger udskillelsen af ​​methylmalonsyre.

Bestemmelse af methylmalonsyre i urin ved Green

Reagenser.

1. Ether.
2. Ethanol.
3. En opløsning af saltsyre 0,1 M.
4. Ammoniumsulfat.
5. Stærk base harpiks deatsidit FF (200 mesh, chloridform).
6. En opløsning af natriumnitrat 0,5 % (vægt / volumen).
7. En opløsning af para-nitroanilin (750 mg opløst i 1 l 0,2 M opløsning af saltsyre).
8. Natriumacetat 0,2 M.
9. Acetatbuffer 1 M, pH 4,3: blandet 1 M natriumacetatopløsning og 1 M opløsning af eddikesyre i forholdet 16,35:33,9.
10. En vandig opløsning af natriumhydroxid 3 M.

En. Standardopløsning methylmalonsyresænkende: 100 mg opløst i 100 ml vand, opbevares i køleskab.

B. Arbejdsnormal methylmalonsyresænkende: standardopløsning fortyndet i 20 tid 0,1 M saltsyreopløsning (1 ml standard og 19 ml saltsyre). Denne mængde svarer methylmalonsyre 100 mg methylmalonsyresænkende 1 l urin testbetingelser.

Til fremstilling af blandet diazoreaktiva 4 ml 0,5 % natriumnitrat-opløsning og 15 ml para-nitroanilin. Blandingen blev anbragt i et isbad, og der tilsættes 4 ml 0,2 M natriumacetat.

Metode.

Urin blev opsamlet i en dag, målt sin volumen og 10 ml podkislyayut 1 M svovlsyreopløsning til pH 2,0 eller lidt under. Ammoniumsulfat blev tilsat til mætning. Blandingen blev anbragt i en skilletragt og ekstraheret tre gange med ether og ethanol i et forhold på 3:1. For at forhindre dannelsen af ​​emulsioner ekstraktionsmiddel blandingen anvendes i overskud.

Ekstrakten blev ledt gennem en lille søjle kromatografi (1 – 1,5 cm i diameter), afsluttet 5 ml harpiks. Søjlen blev vasket 50 ml destilleret vand. Methylmalonsyresænkende eluerede 0,1 M saltsyreopløsning. Efter eluering valgt 2 ml eluat, W sættes ml af acetat-buffer, og 3 ml diazoreaktiva.

Efter blanding blev røret anbragt i et vandbad ved en temperatur 95 ° C 3 m. Så tilføjede 2 ml 3 M natriumhydroxid og én gang lukkede rør proppen for at minimere kontakten med luft. Efter afkøling blev absorbansen målt ved bølgelængden 620 dem. Til blindprøven stedet for at bruge eluatet 2 ml 0,1 M opløsning af saltsyre, og for den standard løsning - 2 ml arbejdsstandard.