Metody pro detekci Leishmania v škrábání postižené tkáně podle izolace čisté kultury

Při výsevu škrábání postižené tkáně pacienta na konkrétní živného média Leishmania množí a mohou být detekovány pomocí mikroskopie.

Činidlo

Среда W.W.W. pro pěstování Leishmania (14 g agaru, 6 g chloridu sodného, o 150 ml defibrinované králičí krve, převzata přímo ze srdce před přípravou média, 900 ml destilované vody). V destilované vodě byl přidán chlorid sodný a agar. Baňka obsahující médium se zahřívá až do úplného roztavení agaru, a 20 až 30 min sterilizuje v parním sterilizátoru při 147,1 kPa (15 na).

Ochladí se na 56 ° C agar přidán sterilní defibrinované králičí krev, míchá otáčením baňky a plní se do sterilní pipetou 4 ml zkumavky. Baňka krevní agar během dávkování je ve vodní lázni při teplotě 58 ° C. Zkumavky s tipy středních.

Po ztuhnutí agaru, jsou umístěny v inkubátoru po dobu jednoho dne při 37 ° C pro kontrolu sterility a příjem kapalného kondenzátu. Pokud se vyrábí nestačí, před setím ve sterilních lahvičkách, můžete přidat o 1 Jeden ml těchto roztoků: 0,85 % chlorid sodný, 1 % pepton řešení, Hanks řešení, laktalbuminu hydrolyzát nebo jiných živin média v isotonických koncentracích.

Způsoby detekce Leishmania v stěry z postižených tkání izolace čisté kultury

Když vyberete kulturu pečlivě dodržovat pravidla sterility. Zkušební plocha kůže je otřít s vatovým tamponem, navlhčený 70 % alkohol.

Po odpaření alkoholu ostrý konec sterilní oční skalpel incizi délce tuberkulózních 2-3 mm. Ze dna řez sterilní Pasteurovy pipety do škrábání tkáň. Výsledný pokles serózní-krvavé tekutiny byla přenesena do zkumavky s prostředím. Manipulace se provádí několikrát, setí na Materiál pokaždé, když nový trubka. Špunty do uší vložené do parafínu nebo dát je gumové krytky a umístěné v inkubátoru při 22-24 ° C.

Vyhodnocení výsledků

Plodiny jsou zkoumány pod mikroskopem na denní bázi k identifikaci původce. Prozkoumejte nativní léky, připravený podle postupu popsaného v drcených kapek, čočka 40×40. Výsledky jsou považovány za negativní setí, pokud v 40 dny patogen nebyl nalezen. Kultury jsou protáhlé Leishmania (10-12 Microns s kabeláží).

Aplikace metody kultury, je nejužitečnější, když Tuberkuloidní formou leishmaniózy, diagnostika, že jiné metody mohou být méně účinná.