Metody pro detekci Leishmania v nátěru kostní dřeně

Reagencie pro detekci Leishmania

• Metylalkohol, nebo absolutní ethylalkohol, nebo směs Nikiforov (směs stejných množství etheru a absolutního ethanolu).
• Фосфатный буфер pH 6,9-7,1, pro přípravu, z nichž je smíšený 40 ml KH₂RO₄ (9,078 g sušiny KH₂RO₄ v 1 litr roztoku) a 60 ml Na₂PHO₄ (11,876 g sušiny 1 litr roztoku).
• Azureozin Romanovský.

Metody detekce Leishmania v nátěru kostní dřeně

Od punktátu kostní dřeně ihned po péči, Není rozdrtit nebo deformovat buňky,příprava tenkých stěry. Pokud hustou punktátu, aby otisk. Když významný krev v punktátu z něj izolovaných na skle trochu bělavé kusy tuku, v případě, že jsou odlišitelné, a připravit je šmouhy.

Připravená stěr se suší na vzduchu, potom připevní, jako krevních nátěrů. Suché fixovaných skvrn mohou být skladovány po dobu několika dní.

V stěru lité ředí vyrovnávací barvení Romanovský (asi 3-5 ml) a odešel do 30. 50 m. Po barvení opláchnuty destilovanou vodou, suší a zkoumal pod mikroskopem s ponorným systémem.

Vyhodnocení výsledků detekce Leishmania v nátěru kostní dřeně

Uprostřed Leishmania onemocnění obvykle nachází v punktátu kostní dřeně ve významném množství, a proto, že jsou snadno k nalezení. Nicméně, v raném stadiu onemocnění au pacientů léčených pro, identifikovat původce, To vyžaduje dlouhou pohled na všech stěru (Neméně 40 m).

Leishmania nalezen v makrofázích nebo extracelulárně jako zaoblenými nebo risovidnyh buněk 3-5 mikronů v průměru. Cytoplazma je zbarven šedomodré barvy, a jádro - v červeno-fialové. V cytoplasmě, umístěné kinetoplasts - tyče ve tvaru nebo zaoblené vzdělání, intenzivně barevné jádro.

Pro Leishmania někdy trvat destiček nebo "střepy" buněk (Komocki citoplazmy, obsahující jaderný materiál), nalezený v nátěrech kostní dřeně, cizí mikroorganismy (např, jednobuněčné řasy), uvězněni v nátěru během malování. Mořený stěr jsou těžší, než Leishmania (tmavě modrá cytoplazma a jádro zářivě rudé), kinetoplasts chybějící.