Definició de les característiques quantitatives i qualitatives d'esperma

Determinació de la motilitat espermatozoides

Determinació de la motilitat espermatozoides és un paràmetre imprescindible, Caracterització de la qualitat de l'ejaculació. Esperma, capaç de fertilització, tenen mobilitat — cometre moció rectilínia amb velocitat 50 µm/s. Es poden trobar en l'òvul espermatozoides mobilitat-alteració-diskinospermiej en forma de oscil. lant, doma i altres tipus de trànsit, que normalment no.

Motilitat espermatozoides en producte natiu de l'ejaculació amb un camp de visió limitat (utilitzant la finestra Fonio), utilitzant la ocular i lents x 40 7 x, Quan poluopuŝennom condensador. Comptant 100 cèl·lula, Tingueu en compte el nombre d'entre ells de mobles, espermatozoides sedentari i immòbil. Espermatozoides activament moviment correcte conformen 80-90 %, és sedentari 10-12, encara — 6 — 10 %. Només pren en consideració els espermatozoides moviment activament i sedentàries, que cometre moviment translacional.

Vostè pot utilitzar més detallada punt avaluació de escala de qualificació:

• «4» és una excel·lent mobilitat (tots els espermatozoides tenen una mobilitat endavant recta amb velocitat significatives);
• «3» és una bona mobilitat (diversos reduït);
• "2" és una mobilitat mediocre (encara una gran quantitat d'esperma, però amb les cues que vibra);
• "1"-mala mobilitat (la manca d'impuls, Mobilitat de cues d'esperma només);
• "0" és que un moviment d'esperma es troba.

Fertilitat d'ejaculació depèn de la durada de la motilitat espermatozoides, Per tant, és necessari determinar motilitat espermatozoides en la dinàmica (kinezisgramma dinàmic).

Ejaculació deixar anar posar en un coverslip, Girar-la i posar en una diapositiva amb lunočkoj per penjar gotes tan, que la caiguda va ser al Centre d'un aprofundiment. Vora tapa vidre untat amb parafina líquida i sota el microscopi determinar el percentatge de moviment activament, sedentaris i estacionàries espermatozoides a través de la 1, 3, 6, 12 i 24 hores després de l'ejaculació. La recerca es realitza a temperatura ambient. Normalment, el nombre d'espermatozoides activament mòtils disminueix cada 2-3 h 20 % ,

• Nota. Examen microscòpic de l'ejaculat hauria efectuat en un laboratori per una persona, que tenia la suficient experiència en el camp del diagnòstic de laboratori, com a resultats de Motilitat espermatozoides per diferents investigadors varien a ± 40 % i depèn en gran mesura l'experiència amb èâkulâtom.

El "revitalització" de la Mostra de semen

El "revitalització" de la Mostra de semen basada en la recuperació de la mobilitat encara, però viure esperma utilitzant solucions incentius:

1) solució Becker (glucosa- 3 g, En₂HPO₄ - 0,6 g, NaCl- 0,2 g, KH₂PO₄ -0.01 g, aigua destil·lada a 100 ml; PH- 7,8);

2) 0,1 % solució de cafeïna (no només de segellat!) - 10 % del volum de la ejaculació;

3) 0,1 Solució M de l'arginina.

Mètode. Mesurar la capacitat de la pipeta 1 ml nasasyvaût 0,1 ml d'ejaculació (ben barrejats) i la mateixa pipeta guanyant 0,9 ml solució estimulant. El contingut de la pipeta es bufa en un vidre de rellotge, barrejar bé per aspiració repetida i fluid de bufat en un vidre de rellotge, i després el producte acabat gota penjant. A través de 5 10 min fix, però espermatozoides vius comencen a moure.

El percentatge d'espermatozoides mòbils determinada immediatament en restaurar la mobilitat i després 3, 6, 12 i 24 no. Per obtenir resultats més fiables, es porta a terme en paral·lel a la mostra amb dues solucions desafiants. Només quan la impossibilitat de "reactivar" els espermatozoides immòbils pot parlar de nekrospermii.

Identificació d'espermatozoides en directe entre fixa

Principi del mètode es basa en la, Quins enzims de viure eosina Blanch de espermatozous. Com utilitzen reactius 5 % solució aquosa eosina de potassi i 10 % solució aquosa nigrozina.

Mètode. En la diapositiva posar un petit toc de l'ejaculació, a continuació posar dues vegades la gota 5 % eosina solució potassi i gota 10 % solució nigrozina, que també és dues vegades la eosina gotes de potassi. Primera ejaculació es barreja amb eosina de potassi, Espereu uns segons, i llavors barrejat amb palla nigrozina, una altra vegada, esperar uns quants segons i fer el prims frotis raspallat vidre significativa.

Mitjançant sistema de microscopi immersionnuû, anormals comte no menys de 200 esperma, assignació de vida (Incolor) i els morts (pintat amb eosina en vermell). Nombre d'espermatozoides vius i morts, expressat en percentatge. En absència de nigrozina una gota de semen barrejat amb palla 5 % potassi de solució eosina i preparar frotis prims per a microscòpia. Nigrozin colorizes la droga només de fons, on s'assignen esperma més contrasten. Espermatozoide normal estar conformen 80-90 % del nombre total de.

Recompte d'esperma 1 ML i tot el volum de la ejaculació

El nombre d'espermatozoides en 1 ML i al llarg de l'òvul es calcula en la Gorâeva de cambra de comptabilitat.

Determinar el nombre d'espermatozoides en l'ejaculat tot multiplicant el nombre d'espermatozoides en 1 nombre de ml d'ejaculació (en lilitres).

• Nota. Cambra comptable també pot determinar el nombre d'espermatozoides mòtils, Per què ejaculació ha de diluir la solució izotoniceski càlid de sodi hloridz i comptar el nombre d'espermatozoides immòbils, i llavors restar-los el nombre total de.

Normalment, en el 1 ml d'ejaculació conté 60-120 milions. esperma, Quan la giperspermii és més 120 milions., Quan Oligospèrmia — de 30 a 60 milions., què, normalment, fa impossible la fecundació. Tanmateix, casos, Quan es produeix la fecundació i en 1 ml d'ejacular des 5 a 30 milió. esperma.

En qualsevol cas, Quan identifiquis Oligospèrmia requereix el control de 2-3 de comptar el nombre d'espermatozoides en intervals de temps de 3-4 setmanes per establir el seu màxim nombre de. El mateix Comte d'esperma masculí està subjecta a la important fluctuació fisiològica.

Correcte al llarg de l'òvul conté més 150 milió. esperma.

Comptar spermatogrammy

Spermatogramma és el percentatge de formes morfològiques d'espermatozous i les cèl·lules de l'espermatogènesi.

A la biòpsia, color amb hematoxylin o Pappengejmu, compta com a mínim 200 esperma, el nombre de formes normals i patològics de, així com les cèl·lules de l'espermatogènesi és expressat com a percentatge. Recompte es realitza mitjançant immersió microscopi sistemes i màquines per comptar els leukogram amb clau de noms canviats.

En una ejaculació normal formes normals d'esperma conformen 80-85 %, algunes vegades 100 %, Aquests inclouen les variants fisiològics, caracteritza per o inusualment guant, o reducció, o el cap augment.

Joves, immadurs o, la forma de la esperma són al voltant cap i del coll de la resta del citoplasma ("collar"), Hi ha relacions sexuals freqüents i no és capaç de fertilitzar.

Formes antigues de esperma (giperhromiâ, ahromiâ, responsable de vakuolizaciâ) apareixen en l'òvul després de l'abstinència prolongada i no és adequat per a la fertilització.

A les manifestacions patològiques inclouen espermatozoide amb malformacions del capçal: megalospermatozoidy (gigantospermatozoidy), macro-, mikrospermatozoidy, cònica, Doble espermatozoides amb un coll i una cua, colls amb un o més cues, sense una cua, amb una cua sense un responsable, etc..

En homes sans en la normal ejacular esperma do normalment no es troben forma patològica, però de vegades pot arribar a seva nombre durant normal capacitat fecundant d'ejaculació 20 %, d'aquests, aproximadament 15 % és la patologia del responsable, 3-5 % -el cos, 2-5 % -cua.

L'espermatogènesi patològica, forma secretora d'esperma infertilitat s'identifiquen amb la patologia cap i coll. Patologia de la cua normalment èkskretornogo d'origen, es produeix quan els espermatozoides passa en semâvynosâŝim camins.

En preparacions tacats, també clarament visible per separat situat germinativnye cèl·lules en diferents estadis de diferenciació i maduració, que és essencial de diferenciació i azoospèrmia Comte i azoospèrmia baix d'esperma.

Spermatogonii una ronda, Vegades forma ovalada, seu diàmetre és de 5-12 µm. El nucli pren aproximadament un terç de les cèl·lules, Fosc- o svetlookrašennoe, amb 1-2-3 Nucleo- Lamy, sovint situat a prop de kariolemmy (Sobre nuclear), estructura de la cromatina fina. El uzkaya citoplasma, basòfil, Homogeni. Quota de mitotičeski diverses vegades Spermatogonii. Trobat cèl·lules amb etapes ben definides de la mitosi.

Part de les cèl·lules, format com a resultat de la mitosi, diferenciades en spermatotsity (I), i llavors l'ordre (II). Spermatotsity que puc demanar -cèl·lules rodones o poligonals amb diàmetre 17-19 micres amb un gran nucli rodó i un llum citoplasma molt específics. En preparacions tacats visibles clar perinuklearnaâ zona.

Ordre de Spermatotsity II format com a resultat de la meiosi. Són menys, que spermatotsity demanar (diàmetre 15 m), Morfologia però gairebé idèntica. Són comuns en l'òvul, que spermatotsity demanar, però molt menys, que spermatidy.

Spermatydы -petit, cel·les de forma rodona o allargada amb un diàmetre de 12-15 micres al voltant de nuclis giperhromnymi, situat centralment o eccentrically. És possible tenir multicor spermatids. Citoplasma pàl·lid, bazafil′naâ, sovint vacuolado.

Torn spermatidy en espermatozoides.

Les cèl·lules de l'espermatogènesi en normal spermatogramme són no més de 2 %. Un gran nombre d'ells quan la infertilitat de la naturalesa secretora de la.

Per a microscopi de contrast de fase ejaculació es dilueix amb solució isotònica clorur de sodi amb addició d'una petita quantitat de 1 % una solució aquosa de rivanola o l'àcid carbolic reduir motilitat espermatozoides.

En microscòpia de fluorescència la diapositiva és posar una gota de l'ejaculació i una gota de taronja akridinovogo en cria 1:20000. Gotes es barregen i es cobreixen amb coberta de vidre. Per a microscòpia utilitza 7 x 40 ocular i lents. Cèl·lules de sement viu tacats verd, els morts — en taronja. Forma d'espermatozous normals i anormals fàcilment distingible per les seves característiques morfològiques.

Normes de treball en contrast de fases i fluorescència microscopis estan descrits en les instruccions per a aquests dispositius. Quan utilitzant spermatogramma microscopi de contrast de fases i fluorescència es calcula segons les regles generals.

Basat en un examen microscòpic d'ejaculació pot revelar diverses alteracions patològiques.

• Aspermia -l'absència d'espermatozoides en l'ejaculació i immadura de les cèl·lules germinals.
• Azoospèrmia -absència d'espermatozoides en presència de les cèl·lules germinals immadurs.
• Astenospermiâ -reduir el nombre de cèl·lules mòtils i un augment en el nombre de formes patològics amb nombre total normal d'esperma.
• Oligoastenspermia -reduir el nombre d'espermatozoides i les seves formes mòbils i augmentar el nombre de formes patològics.
• Nekrospermiâ -rigidesa de tots els espermatozoides en el producte fins i tot després de la "dinamització".
• Akinospermiâ -Estat de, que, a diferència de prèviament immòbil nekrospermii amenitzar esperma després de començar a moure's activament.