Els mètodes per a la detecció de Leishmania en el raspat dels teixits afectats per l'aïllament de cultiu pur

Quan la sembra raspant el teixit afectat del pacient a un mitjà nutrient específic Leishmania multiplicar i poden ser detectats per microscòpia.

Reactiu

Среда W.W.W. per al cultiu de Leishmania (14 g d'agar, 6 g de clorur de sodi, sobre 150 ml de sang de conill desfibrinada, presa directament del cor abans de preparar mig, 900 ml d'aigua destil·lada). En aigua destil·lada es va afegir clorur de sodi i agar. El matràs que conté el medi es va escalfar fins fusió completa de l'agar, i 20-30 min esterilitzat en un esterilitzador de vapor d'aigua a 147,1 kPa (15 en).

Es va refredar a 56 ° C afegir agar sang de conill desfibrinada estèril, agitada girant el matràs i s'introdueixen en pipeta estèril 4 tubs ml. Agar sang durant Flascó dispensador és un bany d'aigua a una temperatura 58 ° C. Els tubs amb les puntes mitjanes.

Després de la solidificació de l'agar, es col·loquen en una incubadora durant un dia en 37 ° C per al control de l'esterilitat i de rebre el condensat líquid. Si s'ha produït no és suficient, abans de la sembra en vials estèrils, pot afegir sobre 1 Un ml de les següents solucions: 0,85 % clorur de sodi, 1 % solució de peptona, Solució de Hanks, hidrolitzat de lactoalbúmina o altres mitjans de nutrients en concentracions isotòniques.

Els mètodes de detecció de Leishmania en els raspats de teixits afectats per l'aïllament del cultiu pur

En seleccionar una cultura seguiu acuradament les normes d'esterilitat. L'àrea d'assaig de la pell es neteja amb un cotó, humitejat 70 % alcohol.

Després de l'evaporació de l'alcohol l'extrem afilat d'una incisió amb bisturí oftàlmica estèril tubercle longitud de 2-3 mm. Des del fons de la ferida amb una pipeta Pasteur estèril no raspar el teixit. La caiguda resultant de líquid serós-sagnant es va transferir a un tub d'assaig amb el medi ambient. La manipulació es porta a terme diverses vegades, material de sembra cada vegada que un nou tub. Taps per les orelles embeguts en parafina o posar-los taps de goma i es col·loquen en una incubadora a 22-24 ° C.

Avaluació dels resultats

Els cultius s'examinen sota un microscopi sobre una base diària per identificar l'agent causal. Explorar les drogues natives, preparat pel mètode de gotes triturades, la lent 40×40. Els resultats es consideren sembra negatiu, si en 40 no es va trobar dia patogen. Els cultius són allargades Leishmania (10-12 Micres amb cablejat).

Aplicació del mètode de cultiu és més útil quan tuberculoide forma de leishmaniosi, diagnòstics que altres mètodes poden ser menys eficaços.