Els mètodes per a la detecció de Leishmania en frotis de medul·la òssia
Els reactius per a la detecció de Leishmania
- L'alcohol metílic, o alcohol etílic absolut, o una barreja de Nikiforov (barreja de quantitats iguals d'èter i etanol absolut).
- Фосфатный буфер pH 6,9-7,1, per a la preparació dels quals és mixta 40 ml KH2RO4 (9,078 g de matèria seca KH2RO4 en 1 litre de solució) i 60 ml de Na2PHO4 (11,876 g de matèria seca 1 litre de solució).
- Azureozin Romanovsky.
Els mètodes de detecció de Leishmania en frotis de medul·la òssia
De puntejada de medul·la òssia immediatament després de prendre la cura, no aixafar o deformar les cèl·lules,la preparació de frotis fins. Si puntejada densa, fer empremta. Quan la sang significativa en puntejada d'ella aïllat al vidre una mica embalums blanquinosos de greix, si són distingibles, i preparar-frotis.
El frotis preparat s'asseca a l'aire, llavors fix, com els frotis de sang. Frotis fixos secs es poden emmagatzemar durant diversos dies.
En frotis aboca diluït en tampó pintar Romanovsky (uns 3-5 ml) i se'n va anar a 30 50 m. Després de la tinció es va rentar amb aigua destil·lada, s'asseca i s'examinen sota un microscopi amb sistema d'immersió.
Avaluació dels resultats de la detecció de Leishmania en frotis de medul·la òssia
Enmig de la malaltia de Leishmania generalment es troben a la medul·la òssia puntejada en una quantitat significativa i, per tant, són fàcils de trobar. No obstant això, en l'etapa primerenca de la malaltia i en els pacients tractats per, per identificar l'agent causant, Es requereix una visió a llarg termini de tots els frotis (no menys 40 m).
Leishmania trobat en els macròfags o extracelularmente com a cèl·lules arrodonides o risovidnyh 3-5 micres de diàmetre. El citoplasma és de color de color gris-blau, i el nucli - en un color vermellós-púrpura. En el citoplasma, situades kinetoplasts - en forma de vareta o arrodonits educació, nucli intensament acolorida.
Per Leishmania vegades prendre les plaquetes o "fragments" de les cèl·lules (Komocki citoplazmy, que conté material nuclear), trobat en els frotis de medul·la òssia, microorganismes estranys (per exemple,, algues unicel·lulars), atrapat en una taca a la pintura. El frotis tenyit són més difícils, de Leishmania (citoplasma blau fosc i nucli de color carmesí brillant), kinetoplasts desapareguts.