Medul·la òssia – Preparació de material i la formulació dels preparatius per a l'examen microscòpic de la medul·la òssia

Un estudi detallat de la composició i estructura de la medul·la òssia mòbil ha començat amb la introducció en la pràctica clínica mètode de punció esternal, proposat M. I. Arinkin en 1927 ciutat, i després prïjïznennogo gïstologïçeskogo Recerca puntejada ilium utilitzant trepanobiopsy.

El mètode de la punció esternal

Per realitzar la punció esternal per M. I. Biòpsia amb agulla de punció Arinkin-utilitzada, que té un escut de seguretat, que es pot establir a una profunditat desitjada d'acord amb el gruix de la pell i el greix subcutani, assegurant la punció la placa posterior de l'estern.

La medul·la òssia nasasyvayut xeringa 10 a 20 ml d'ajust del pistó per proporcionar el buit necessari. Punxada produït en la posició de prova estirat sobre l'esquena al nivell d'unió de III-IV costelles línia mitjana, com la paret frontal del cos de l'estern és més prima i té una superfície plana o lleugerament còncava, més convenient per a la punció. A més, en el camp de cèl·lules de medul·la òssia que conté un gran nombre de.

Pot punxat costelles i vèrtebres apòfisi espinoses (sovint - III i IV lumbar). En punxar de les apòfisis espinoses de les vèrtebres del pacient se senti, inclinant cap endavant. En els nens, el risc de punció esternal causa de la seva major elasticitat, i les diferències individuals en l'espessor de l'os. Per tant nens, especialment els nounats i els nadons, preferible fer una punció en el terç superior de la tíbia al costat interior de l'epífisi femoral distal o calcani. La punció de ilíaca produir 10-20 mm posterior a la columna vertebral anterior.

El mètode d'obtenció d'estudi de la medul·la òssia per punció esternal

El lloc de punció es desinfecta amb alcohol i una solució d'alcohol de iode. Llavors la pell, el greix subcutani i el periosti es van infiltrar amb agulla fina 2 ml 2.1 % Novocaína. Potser la perforació sense analgèsia o anestèsia de la pell utilitzant cloroetil.

L'agulla de la xeringa i la punció s'esterilitza pel mètode sec o per ebullició, es va assecar a fons amb alcohol, després amb èter.

Abans de realitzar una punció, l'ús d'una rosca de cargol, un escut de seguretat fins a la profunditat desitjada i el mandril de punció inserit. Dades indicatius, que s'han de seguir durant la instal·lació de l'escut de seguretat en una punció de l'estern, es mostren a la Taula.

Dirigir l'agulla perpendicular a l'estèrnum de la seva línia mitjana, ràpid moviment perforar la pell, greix subcutani i una placa exterior de l'estern. En aquest punt, la resistència disminueix i l'agulla, com si s'enfonsa, inclòs en la medul·la òssia. Per tant, es fixa verticalment, immòbil. Si l'agulla no està en una posició vertical, després, sense treure-, empènyer el fusible és lleugerament superior i tornar a la promoció de l'agulla.

Cal tenir en compte, que el càncer, dolors mielomnoy, osteomielitis i una altra agulla procés osteolítica, entrar a la lesió, compleix amb menys resistència i no es fixa a l'os.

Després que l'agulla ha entrat en la medul·la òssia, estilet es retira i la xeringa s'empeny fermament. Addicional, tirant de l'èmbol de la xeringa, nasasyvayut no més 0,5 ml de medul·la òssia (quan més puntejada es pot obtenir una gran quantitat de sang perifèrica).

Si vostè rep una medul·la òssia falla, després, sense retirar l'agulla, retiri la xeringa, reintroduït en l'estilet de l'agulla i transferit a una altra posició - per sobre de, per sota o al costat. Llavors xeringa nou nasasyvayut lleugerament puntejada. Després de l'agulla d'extracció de medul·la òssia, sense desconnectar la xeringa, eliminat des de l'estèrnum, i el lloc de punció es va tancar adhesiu estèril.

El material resultant es va transferir a un vidre de rellotge i ràpidament en el mesclador nasasyvayut leucòcits o cèl·lules vermelles de la sang a la marca 0,5 (amb el nombre normal o elevat de leucòcits en sang perifèrica, es recomana utilitzar un mesclador d'eritròcits melanzhera, i si --mixer leucopènia per mélanger leykotsytov).

Després, en una etiqueta "11" per als leucòcits a la taula de mescles o una etiqueta de "101" a la taula de mescles per eritròcits guanyant 3-5 % àcid acètic. El contingut de la mescladora es barregen a fons, donats d'alta de la part capil·lar del líquid, i caigudes posteriors i omplir la cambra de recompte es van explicar com cèl·lules leucòcits de sang, tenint en compte la dilució en un mesclador adequat. Myelokaryocytes totals (cèl·lules amb nuclis) que van des 50 Per G 250 Estany 1 l, aparentment, a causa de la medul·la òssia composició diferent en les seves diferents àrees.

Comptar el nombre absolut no és myelokaryocytes essencials. En la majoria dels casos, limitat a comptar el percentatge de varietat puntejada frotis de cèl·lules nucleades. Alhora, el nombre de cèl·lules jutjat frotis estimada.

Per a la preparació de medicaments de la puntiforme estern en una medul·la òssia partícules de vidre de rellotge recollit i preparar-los traços primes, barreja s'extreu sang a través d'un paper de filtre o una pipeta Pasteur.

De gran importància pràctica és la preparació adequada d'un frotis de teixit de la medul·la òssia, com una barreja de sang perifèrica distorsiona la composició de les seves cèl·lules. En una mostra degudament preparades cèl·lules són densament, però per separat, i la seva estructura és clarament visible. Es recomana preparar una sèrie de cops, usant tot el material s'obté en la punció. Els frotis han de preparar-se ràpidament, ja que el plegat de la medul·la òssia es produeix abans, que la coagulació de la sang perifèrica, i les cèl·lules poden ser danyats com, que no poden diferenciar.

Quan els Estats medul·la òssia aplàstica frotis revelar un petit nombre de cèl·lules, de vegades no hi. Per aclarir, Això és una conseqüència del procés de la malaltia o punció realitzat incorrectament, requerida de punció repetida i puntiforme investigació.

Fixació i pintura traços realitzen en el mateix puntiforme, així com frotis de sang perifèrica, el millor de tot que estan pintats en Pappenheim-Kryukov.

Biòpsia de l'os ilíac

La necessitat d'un estudi in vivo dels preparats histològics de la medul·la òssia, obtingut per trepanobiopsii, sorgeix, quan la punció no és possible obtenir suficient material per confirmar la presència d'un procés patològic.

Particularment important adquireix mètodes histològics per malalties tals, Com leucèmia, policitèmia vera (eritremia), osteomielofibrosis, anèmia gipoplasticheskaya.

Per perforar i es proposa l'extracció de teixit ossi per utilitzar una agulla de baratar, construït sobre el principi de l'agulla de punció-biòpsia. El gruix de l'agulla de baratar 3 mm, el diàmetre interior 2 mm, longitud 40 mm. L'extrem distal de l'agulla com un tallador, espiral, la qual cosa és possible durant la rotació per tallar el teixit ossi. L'agulla es compon d'un mandril (estilet amb un extrem punxegut) i manetes.

El mètode d'obtenció d'estudi de la medul·la òssia per trepanobiopsy

Punxada produït a la cresta ilíaca, a certa distància de 20-30 mm posterior a la columna vertebral frontal superior. Tècnicament, és més convenient fer una biòpsia de l'ala esquerra.

El lloc de punció es desinfecta amb alcohol i una solució alcohòlica de iode. L'agulla es pre-esterilitzat per ebullició o mètode sec, i després es va assecar amb alcohol i èter. Amb rosca de cargol, una protecció d'agulla de seguretat a la profunditat de punció desitjada, tenint en compte el gruix del greix subcutani.

Abans de la introducció de l'agulla trocar produir una anestèsia de la pell, el teixit subcutani i el periosti 2 % solució de novocaína.

Penetrant agulla baratar en el teixit tou, el mandril llança sent per un lloc en l'os, en la qual desitja fer una punció. L'agulla és llavors moviments rotatius sota certa pressió s'introdueix en l'os. Quan vostè se sent forta fixació de l'estilet de l'agulla es retira. Desconnectar el mandril i el mànec, Aquest últim es cargola sobre l'agulla, fixa a l'os. Els moviments circulars de l'agulla cap a la dreta s'insereix en l'os. Llavors, com el moviment de rotació es va recuperar. Òssia de columna cilíndrica, en passadors de sol·licitud, empènyer l'estilet des del lumen de l'agulla en un portaobjectes, i des d'allà es transfereix a un flascó amb formalina i enviat per al seu examen histològic.

Del vidre restant, agulla i l'estilet de la medul·la òssia fan frotis. Molt sovint aconsegueixen tallar i extreure un tros d'os en longitud 6 a 10 mm, i de vegades més.

A la medul·la òssia d'éssers humans sans i pacients amb processos hiperplàstics revela moltes cèl·lules diferents. En hipoplàsia severa (aplasticheskogo) procés trepanat és groc, causa de la falta gairebé completa de la medul·la òssia i la seva substitució pel teixit gras.

En totes les formes de mielofibrosi osteomielofibrosis i es va extreure un tros d'os es veu "sec" i d'ella és possible extreure només una molt petita quantitat de medul·la òssia per a la preparació de frotis.