Estudi de coagulació de la sang

Mètodes d'investigació de coagulació de sang inclouen els següents grups:

1. indicatiu (General), proporcionen idea l'estatus de coagulació tots cascada conjunt i els seus escenaris (inscripció pot ser fet visualment o utilitzant diferent dispositius-koagulografa, tromboèlastografa, etc.);
2. diferenciar factors dèficit-correcció de proves de coagulació, barreja proves investigats sang plasma plasma sanguini de pacients amb conegut notòriament dèficit d'aquestes o altres factors;
3. Quantificació dels components individuals del sistema i la seva activitat funcional (mostres de coagulació, estudi sobre cromogènic i altres substrats) i (o) en Marcadors immunològics;
4. detecció de coagulació intravascular procés d'activació i fibrinolysis per característiques funcionals o marcadors moleculars per a aquesta activació és la identificació en la circulació dels factors de coagulació activat, Productes de degranulació de plaquetes, separació de components de la coagulació o els seus metabòlits, l'aparició de nous marcadors antigèniques del factor activat i els seus complexos, metabolization accelerada etiquetada components de la coagulació (escurçar la seva vida mitjana en circulació).

Així, en l'avaluació de l'estat de sang la coagulació és utilitzat tant mètodes de coagulació (laboratori i instrumental), formant la base del procés diagnòstic, i immunològica, radionúclid i altres tipus d'investigació. En molts casos els components de sistema es pot definir com a l'activitat funcional, i immunologically sobre el contingut de l'Antigen corresponent a la sang. Ús concurrent de tècniques permet diferenciar patologies, associades a la manca de síntesi del factor de coagulació respectius (en aquest cas, igualment reduït com seva activitat funcional, i el nombre d'Antigen), i formes, en el qual la molècula és sintetitzada factor, però és una anomalia i nepolnocenna funcional.

Per referir-se a les primeres formes del nombre del factor corresponent s'afegeix "—" (per exemple,, VIII-, IX- I t. d.), i el segon és un signe "+" (per exemple,, VIII +, IX +).

Indicatiu (General) proves de coagulació

Definició de temps de coagulació

Definició de temps de coagulació (preferible tècnica Lee-blanc) — molt utilitzat bystrovypolnimyj (directament a la capçalera) prova indicatiu, identificació de problemes de coagulació significativa, associada amb la deficiència de factors de coagulació (excepte factor VII) o amb l'efecte dels anticoagulants i fibrinolitikov. S'utilitza com una prova orientativa i controlar geparinoterapiej, eliminació de l'acció d'heparina protaminsul′fatom. Analitzar comparativament nizkočuvstvitel′nyj, seu només violat quan expressa contingut reducció dels factors de la coagulació de plasma (per sota de 4-5 %), per tant no és adequat per a la detecció de formes lleus de l'hemofília A i B, així com violacions de coagulability de sang quan angiogemofilii, deficiència de factor XI, prekallikreina i kininogena d'alta. Per aquests motius, la prova no es pot utilitzar per a pacients preoperatori: sota prova normal indicadors (5-10 min) Pot experimentar un o més d'hemorràgia postoperatòria profuzhnykh.

Plasma de temps rekal′cifikacii

Durada de la prova rekal′cifikacii nizkočuvstvitel′nyj de plasma-no-estandarditzat, menys fiables d'identificació de gipokoagulyatsii, que el temps de coagulació de sang total. No es recomana per al diagnòstic de trastorns de l'hemostàsia.

Activat de plasma de temps parcial thromboplastin

Activat de plasma de temps parcial thromboplastin (APTT, prova de caolí-kefalinovyj) -mètode de sensibilitat alta, detecta coagulació problemes quan s'inicia un flux de treball, mecanisme intern. Selectivament sensible a la deficiència de factors de la coagulació de plasma (a causa de la manca de plaquetes i factors 3 plaquetes compensat aportacions externes kefalinom o èritrofosfatidom).

Utilitzat per controlar geparinoterapiej, Examen preoperatori dels pacients i t. d. Normatives indicadors depenen de mostres kefalina utilitzats, en molts casos comprenen 37-50 º c (òptimament-37-45 amb).

Plasma de temps Kaolinovoe

Prova de temps de Kaolinovoe de plasma, similar a l'anterior, però sense afegir kefalina de plasma (èritrofosfatida), pel que és sensible no només a una deficiència de factors de coagulació plasmàtics, sinó també a la falta de factor plaquetari 3 Plaqueta. Avaluació de l'activitat prevista d'aquest factor es pot realitzar comparant el temps de la prova de plasma caolí amb alt i baix contingut de plaquetes (norma - 57-70 amb).

No es recomana l'ús de components de fosfolípids, cedir TTPa temps de coagulació igual a 55 s i més, ja que això redueix en gran mesura la precisió i la reproductibilitat de la prova, incloent-hi la quantificació dels factors VIII i IX.

Plasma de temps de silicona

Temps de silicona, plasma, és un temps de rekal′cifikacii de plasma, rebut en condicions d'agulles silikonirovaniâ, tubs, pipetes, t. és. com a mínim l'activació de contacte. El test és sensible a contacte fase intravascular gallet activada de coagulació (factor XII i XI), No obstant això, aquesta violació és revelat més clarament per definir el conjunt de coagulació temps de silicona (segons si el mètode és blanc o tromboèlastografičeskoj procés de registre en OS rasa).

Normatives indicadors depenen de silicona i estan determinats per un estudi de la sang de persones sanes per a cada Mostra per separat. Hora d'escollir la silicona és el millor, que millor s'estén temps de coagulació (plasma).

Protrombina (thromboplastin) plasma de temps

Protrombina (thromboplastin) plasma de temps (Temps de ràpid pol, Índex de protrombina) caracteritza el plasma sanguini col·lapse velocitat rekal′cificirovannoj durant el procés de posada en marxa el mecanisme extern, t. és. Quan afegeixes el thromboplastin cervell humà (o conill).

Activitat thromboplastin standartiziruetsâ en mostres mixtes de normal (control) plasma. Tromboplastiny són l'activitat més comunament utilitzat 12-18, amb (en tècnica clàssica és 12-13 pol ràpid amb). La tromboplastin més feble, el mètode d'error més.

Al temps normal protrombinovom de plasma prova permet identificació de factors de dèficit acumulatiu o aïllats protrombinovogo complexos — VII, X, (V) i (II), de quins tres factors ((VII), X i (II)) K-vitaminozavisimy i la seva activitat disminueix sota la influència de lluita contra les accions indirectes. En aquest sentit, la prova de protrombina és imprescindible quan es monitoritza la dosi de cumarines (neodikumarin, o pelentan, sinkumar, etc.) i altres productes d'aquest grup (fenilin).

Temps de protrombina segueix sent normal en la deficiència de mecanisme intern de factors d'activació del factor XII-protrombinazy, XI, IX, VIII (t. és. per a tot tipus de l'hemofília i defecte Hageman), com també amb prekallikreina i kininogena d'alta (VM kininogena)

Acceptat en la literatura Misc designació dels resultats de prova de protrombina. És el més convenient especificar el temps de protrombina estudi i control de plasma sanguini en segons (que dóna informació sobre l'activitat de la thromboplastin utilitzat). Vegades utilitza aquests valors de relació dos entre, t. és. índex (ISL investigat plasma, de ,)/(Plasma de control de PV, de), (Norma 0,9-1,1).

L'altra forma d'avaluació d'aquest indicador, el més àmpliament utilitzat en laboratoris, Càlcul d'índex de protrombina és el percentatge fent proporcions aritmètiques invers (norma és de 90-110%), No obstant això, aquest càlcul és erroni, entre la concentració de factors de la coagulació i coagulació temps no és aritmètica, una dependència logarítmica. A més, Prova de protrombina només era sensible a una disminució en els factors de la coagulació sota 50 % seus valors normals. Per aquest motiu, és aconsellable utilitzar corba de dilució de percentatge de índex de protrombinovogo (1:2, 1:4, 1:8 I t. d.) mixta Mostra de normal plasma. Aquesta corba es construeix una vegada per a activitat de font diferent tromboplastinov (de 12 a 18 de) Es determina per índex de protrombina de pacients estudiats. L'avantatge d'aquesta tècnica és que la, que els resultats de tots els estudis, incloent-hi i diverses dinàmiques en dies diferents, relacionar no varietat fortuït de mostres de plasma normal, però a la mitjana i la mateixa configuració estàndard, ocasionant significativament reduït mètode d'error. Índexs, obtinguts per la corba de dilució i normal plasma, absolutament no corresponen a l'altre. Això cal tenir en compte quan anticoagulants de proximitat de l'activitat de Monitorització, per a la reducció d'un índex regular per 50 % correspon aproximadament a la corba inferior a cria índex 25-30% • en aquest sentit, les anàlisis que sempre ha d'especificar, índex de protrombina calculat com, Quines són les normes per a l'activitat thromboplastin.

Temps de trombina de plasma

Temps de trombina de plasma, t. és. citratnoj plasma coagulació temps mentre afegint-hi una activitat estàndard de trombina, és una prova important per a l'avaluació de la fase final de la coagulació. Aquest indicador és important per a la correcta interpretació de totes les altres proves de coagulació, per violació de la fase final de sang coagulació cal conduir inevitablement a un allargament del temps en totes les tècniques anteriors.

En molts casos, al realitzar una concentració de prova de trombina solució 821-828, que quan es barreja amb un volum igual de plasma sanguini dóna col·lapse per 12 - 18 de, però quan disfibrinogenemij són concentracions utilitzades i més febles (resultant en reducció per a 30-35 amb).

Temps de trombina és un indicador important de diagnòstic, violació de la seva tendència de congènita, i quan va adquirir comú (secundari) gipoprotrombinemiâh, més disfibrinogenemij, així com sota la influència de l'heparina, productes de fibrinolysis (PDF) i una sèrie d'altres antitrombinov i inhibidors de l'autoensemblatge de monòmers de fibrina. Per això, el temps de trombina principalment i cada vegada més és pertorbada durant síndromes de coagulació intravascular disseminada aguda i subaguda, que juga un paper important per exprés-diagnòstic d'aquesta patologia.

Prova Autokoagulâcionnyj

Prova Autokoagulâcionnyj (ACTE) -alta-sensibilitat dues etapes, Descriu el procés de coagulació en córrer el seu mecanisme intern. Com APTT, la prova no és sensible a la deficiència del factor VII, però el seu testimoni no va fer dependre el contingut de Fibrinogen (factor I) en plasma investigat, Com és diferent de tots els altre coagulació Mostra indicatiu.

És una altra dignitat ACT, que explora la sang divorciat, realçarà la sensibilitat de la prova a la deficiència de factors de coagulació i, A més, l'execució de l'acte no requereix la utilització de caolí i kefalina, Ja que l'estandardització de contacte i fosfolipidnoj gemolizatom d'activació s'aconsegueix en el seu propi examinats de glòbuls vermells.

És l'essència de la Llei, que a 2 solució de gipotoničeskogo ml (0,222 %) s'afegeix el clorur de calci 0,1 sang ml investigat.

En aquest barreges gemolizat-calcària de protrombinazy i la formació de trombina, l'activitat de les quals està determinada per la constant incorporació de 0,2 ml de la mescla a 0,2 ml de plasma investigat (tots 2 m durant el primer 10 m, i llavors cada 10 min per 1 no).

Plasma és investigar l'origen de Fibrinogen, on l'activitat és prova d'una barreja de trombina. Nombrosos estudis han demostrat, Això podria ser substituït per plasma sanguini d'humans sans o solució Fibrinogen. En aquest cas, es redueix el flux sanguini del pacient a 0,1-0, 2 ml (pot ser extreta del dit!), què transforma la prova de autokoagulâcionnyj a mikrokoagulâcionnyj (MKT) i fa molt còmode per a ús en Pediatria, inclou l'estudi de l'hemostàsia en els nadons.

Activitat Koagulâcionnaâ de l'ACP i MKT en primer lloc és creixent i sa gent normalment assoleix el seu màxim a 10-th minut, incubació de barreges de sang-calci (KKS), Quan el col. lapse passa darrere de plasma substrat 10 ± 1 amb. Llavors koagulâcionnaâ KKS ' activitat comença a declinar, reflexionant sobre la inactivació de trombina en el mateix format. A gemofiliâh, efectes d'heparina i altres violacions de la coagulació coagulació activitat CAC reduït dràsticament, i el màxim és passar de 10 minuts a una data posterior. Si hi ha un hypercoagulation anterior i més significatiu augment d'activitat trombinovoj en CCS.

En un tub d'assaig (definició només a incubació 10 minuts KKS) Es pot utilitzar per controlar geparinoterapiej. És l'avantatge d'aquesta tècnica abans de la prova del temps thromboplastin parcial activada, Això va arrasar l'impacte diferencial de diferent kefalinov al geparinovoe temps de coagulació.

Sobre la base d'ACT (MKT) desenvolupat una tècnica precisa i senzilla per al diagnòstic diferencial de gemofilij.

Utilitzant les figures en el testimoni de les factures ACT de taula de referències (MKT) pot ser expressat com a percentatge i són representats en forma de gràfics-autokoagulogrammy.

Per valorar alguns paràmetres generals de coagulability de sang són mètodes de recerca d'àmpliament utilitzat i instrumental, principalment utilitzant diversos koagulografov i tromboèlastografov.

Thromboelastography dóna una impressió no només en el cronometratge de la coagulació de la sang o plasma, sinó també en l'estructura i les propietats mecàniques de les resultants coàguls de. En els darrers anys i el registre de maquinari mètodes introduïts estandardització contacte i fosfolipidnoj d'activació del procés de la coagulació. Es crea també el diagrama de coagulació proves de coagulació massa General, APTT, Protrombina, Acció de la trombina i altra amb gravació automàtica dels resultats.

Mètodes de diferenciar entre els diferents factors de coagulació dèficit i la seva quantificació

La següent taula Mostra, que un estudi provisional de la coagulability de sang que utilitzant les tres proves bàsiques permet al grup de plasma diferents factor deficiència diferenciació hemocoagulation. Així, la prova de protrombinovom alentiment coagulability només ((I) el tipus d'infracció) sota normal testimoni tota altra característica del factor hereditari deficiència VII o per reduir aquest factor en les primeres etapes del desenvolupament d'icterícia obstructiva o els primers 1-2 dies d'acció indirecta de tractament antikoagulyantami, Quan la inhibició del factor síntesi VII avança en el seu desenvolupament d'una reducció en el nivell de tots els altres factors de coagulació de k-vitaminozavisimyh.

Mecanisme intern només violació de coagulació, t. és. temps thromboplastin parcial activada i acte (Tipus II), Quan la deficiència factor XII, XI, IX, VIII, Von Willebrand (no totes les formes), prekallikreina i kininogena VM. La deficiència hereditari de coagulació factor XII defectes, prekallikreina i kininogena VM allà és extremadament rar i no s'acompanya de qualsevol sagnat, Mentre que la deficiència factor VIII (L'hemofília un), IX (hemofília a) i factor de von Willebrand és molt sovint (és més gran que 96 % tot heretat Coagulopaties) i acompanyats d'un hemofília pronunciada. Entre ells en primer lloc i dur a terme més diagnòstic diferencial.

Deficiència de factor XI acudeix relativament poques vegades (aproximadament 0.5-1.0 % tots els gemofilij), fluxos amb l'hemofília molt lleu (sobretot després de les lesions i les operacions) i ocupa una posició intermèdia entre el primer subconjunt de violacions asimptomàtics i malalties gemofiliâmi i von Willebrand.

Un altre tipus d'infracció es caracteritza per l'elongació com a temps parcial thromboplastin i la Llei, i el temps de protrombina. Va caracteritzar el factor deficiència V, X o (II) per integrar tots els factors de dèficit-vitaminozavisimyh ((VII), X, IX, II), Què s'observa quan mecànica icterícia i altres tipus d'una deficiència de vitamina k, com quan es pren el lluita contra l'acció indirecta.

I, finalment,, com es pot veure des de la mateixa taula, Potser el testimoni de totes tres proves ((IV) tipus), que s'observa en coixins hereditària i adquirida- i disfibrinogenemiâh (no tots els), Quan es pren l'acció directa amb anticoagulants (geparina, geparinoidov, girudina, etc.), tractament de drogues defibriniruûŝimi fibrinolysis i activadors (estreptoquinasa, urokinaza etc..), sang apareix, patològica i substàncies antitrombinov, prevenció de connexió (Assemblea) fibrina-monòmer-per -, krioglobulinov, immunitaris complexos, així com en complexos infraccions de coagulability, causada per la síndrome de coagulació intravascular disseminada. Quan el temps de trombina sovint és violat en major i anteriors, que altres proves.

Si es té en limitacions de compte de la malaltia i les seves possibles polypus o connexió secundari amb altres tipus de patologia i medicinals o altres influències, la presència o absència d'hemorràgia i el seu tipus capaç d'identificar correctament l'origen d'aquests incompliments profunds de coagulació de la sang.

Tot diferenciadors proves es basen en el principi de correcció, t. és. la definició de, la mesura a la qual va revelar un trastorn per sagnant elimina o, al revés, mostres de plasma sanguini no eliminats o sang artificialment derivats preparats amb deficiència notòriament conegut d'un factor de coagulació.

Laboratoris especialitzats per a aquesta finalitat crear per si mateixos una col·lecció de faktorodeficitnyh Plasmas de sang, perquè facin dels pacients amb profunditat sabent instal·lats (Menys 1 %) deficiència de cadascun dels factors i mantenir-los en un paquet petit (per 0,5 ml) Quan la temperatura és 30 ° C. Si cal, aquestes mostres són refrozen i utilitzar proves diagnòstiques.

Plasma, sotmesos a l'atzar unfreezing o restants sense utilitzar, Re-glacé no serà. Les proves correctores no ha de ser utilitzat amb inhibidors immunes de plasma d'un factor. Un nombre d'empreses en kits de diagnòstic liofilitzat conté mostres seques de sang de plasma amb deficiència de definit per factors de coagulació (substrat de plasma). No obstant això, molts coagulability, poques vegades vist en la pràctica clínica, en aquest sentit, utilitza preparats artificialment amb components de la sang normal amb escassetat de certs factors de la coagulació, més heterogènies de plasma (pollets, ànecs, etc.).

La taula proporciona informació sobre el contingut de la factors de coagulació en components sanguinis, utilitzat per a la correcció de proves de coagulació depenent de la data del seu emmagatzematge. Utilitzant aquesta taula, fàcil de desxifrar el testimoni de qualsevol de les tres proves de coagulació primària. En correccionals tècniques s'utilitzen aquests tipus de proves, contacte-estandarditzats i d'activació fosfolipidnoj, t. és. Caolí-kefalinovye o gemolizata (en un acte de).

Proves de mescla de plasma de sang del pacient amb plasma, notòriament ha conegut la deficiència d'aquest o aquell factor

Definir el temps thromboplastin parcial activada en plasma investigat, normal plasma (control) i en plasma amb deficiència notòriament conegut dels factors VIII (des de l'hemofília un pacient), IX (pacient de l'hemofília a), XI i XII. Preparar una barreja de mostres investigats de plasma citratnoj (7/10 volum) i coherents amb cada una de les escasses Plasmas (3/10 volum), Des del dèficit factor VIII i IX (les formes més freqüents d'Anatomia Patològica!).

A la barreja afegir caolí i kefalin, i per 2 minuts exposar el seu rekal′cifikacii (a una temperatura de 37 ° C). A la barreja, on el temps thromboplastin parcial activada no normalitzat, Hi ha defectes de la coagulació i la mateixa.

Així, Si el pacient tema activat temps thromboplastin parcial no afegint al plasma sanguini normal pacient amb deficiència notòriament conegut de factor VIII, però korrigiruetsâ de sang de plasma d'un pacient amb deficiència de factor IX, Disposa d'un L'hemofília un.

De la mateixa manera,, però basat en protrombina prova diferencia dèficit factors protrombinovogo complex (X, V, (VII) i (II)).

Prova de generació de thromboplastin

Per diferenciar entre violacions del mecanisme intern de sang la coagulació és sovint utilitzat clàssic prova de generació de thromboplastin amb la substitució de la component de plaquetes, preparació dels quals requereix temps considerable i sang, kefalinom prova generació thromboplastin deficiències els seus unwieldiness, la necessitat de cuina de gran nombre de reactius, una despesa significativa de temps en execució.

Prova de correcció, basat sobre la base de prova autokoagulâcionnogo.

Tasques del exprés-diagnòstic compleix una altra prova de correcció, basat en una correcció dels mateixos components de la sang normal autokoagulâcionnogo basat en.

Aquesta prova és altament fiable, velocitat i facilitat d'implementació i requereix un petit (no més 0,5 ml) quantitat de sang de la estudiada, Es pot utilitzar en la pràctica pediàtrica.

Que, com prova de generació de thromboplastin, utilitzat per a la correcció de adsorbirovannuû de sèrum i de plasma, que una vegada més estat tractat amb centrifuga abans de realitzar estudis. Tres copes s'aboquen 2 ml 0,222 % solució de clorur de calci i a dos d'ells afegiu 0,1 ml adsorbit normal plasma sanguini (1-M tub) i 0,1 sèrum normal vell ml (2-M tub). En els altres tres tubs de 0,2 ml de plasma normal citratnoj. Llavors a tots els tubs amb una solució de clorur de calci és afegit a 0,1 sang de citratnoj ml investigat.

Exactament un 4 min d'incubació de la barreja de la seva activitat svertyvaûŝuû prova en normal plasma.

El declivi de coagulació una activitat només en el primer tub d'assaig (amb normal BaSO₄-plasma) certificar el factor IX de dèficit malalt (hemofília a), només en el segon tub d'assaig (amb sèrum vell) es tracta de la deficiència de factor VIII (L'hemofília un); Si la correcció passa en dos tubs d'assaig (igualment forts), després, òbviament, Hi ha una deficiència de factor XI o XII (cm. Taula. 14).

Aquesta prova és altament sensible, perquè la recerca es realitza diluït en 20 Una vegada factor de compensació de sang 3 gemolizatom plaquetes. Només ús reactiu és una hipotonia solució de clorur de calci, Què fa un judici públic.

Igualment fàcil és una tècnica rehabilitador mostres, realitza sobre la base de prova protrombinovogo per diferenciar la deficiència de factor II, V i VII +, X (en la taula).

Per tal de delimitar el dèficit factors VII i X, prova de funcionament addicionals coagulació amb la incorporació de el gurzy de plasma investigats morter verí de les serps-drogues lebetoks (seleccionat aquesta concentració de verí, que en presència de kefalina i el clorur de calci causes col lapse de 20-25 amb; tots els ingredients són el nombre 0,1 ML i barreja) (la taula següent).

Amb aquest mateix propòsit, utilitzen el verí drogues Viper Russell, viuen a l'Índia (preparació stipven).

Diagnòstic diferencial, si s'escau, la quantificació dels factors escassos o els inhibidors específics immunes, Què són especials altament estandarditzats metodologies. Aquestes tècniques per construir corbes mixtes mostres de plasma sanguini normal amb la correcció del dèficit de cria tots els factors, A més la investigats. En aquestes corbes es determina per l'activitat del factor investigat en plasma de pacients amb.

Especialment Cal quantificar la concentració dels factors VIII i IX, així com la disponibilitat dels seus inhibidors en pacients amb l'hemofília a i b (especialment abans i durant les intervencions quirúrgiques i teràpia intensiva), així com en diferit profuzhnykh postpart sagnat, Quan és necessari diferenciar la lnndsy-DVS i més patologia rara — l'aparició de l'Inhibidor immunes factor VIII (encara molt més rars — factor V).

Un dèficit de factor XIII profund (una patologia molt rar hereditària) totes les mostres de coagulació normal, però els coàguls sanguinis es dissolen en urea 5 m o 7 m.

Ajuda a diferenciar diversos dèficit de factors de coagulació també grau de comptabilitat i, especialment, el calendari de proves lectures després de la injecció de pacients amb productes de la sang de la normalització, t. és. la correcció de comptabilitat en vivo la metodologia de l. 3. Barkahan.

Aquesta tècnica és especialment eficaç quan la gran diferència en l'esperança de vida diferenciables factors en circulació. Així, durada de Half-Life protrombinovogo factors complex varia d'unes quantes hores (factor VII) fins a uns quants dies (factor II). Una posició intermèdia entre ells ocupen factors de X (2-2.5 dies) i (V) (12-18 h).

Per tant, després d'una explosió massiva de transfusió d'índex de protrombina de plasma augmenta en factor VII deficiència molt breument, a la deficiència del factor V és una mica més a llarg termini (aproximadament 4 - 6 vegades), però amb un dèficit de factor X i, especialment, (II) durant un llarg període (més de 1-2 dies). És significatiu, en aquest sentit i l'impacte en l'índex de preparació de protrombin PPSB (un concentrat del factor VII, IX, X i (II)). Ell també breument Normalitza el temps de protrombina a deficiència del factor VII i més a llarg termini (moltes vegades!) a la deficiència de factor X i (II). Des d'aquesta droga no hi ha cap factor V, Aquest dèficit que no korrigiruetsâ.

Una diferència similar es revela en la transfusió i substitució teràpia mecanisme intern dels factors de la coagulació (XII, XI, IX i VIII), que és registrat, activat parcial tromboplastinovym prova.

De particular interès és la dinàmica d'ajustar el nivell de factor VIII i testimoni en teràpia de transfusió APTT de l'hemofília un i la malaltia de von Willebrand. La primera d'aquestes malalties identificat immediata millora màxima de coagulació després de transfusió (ruixar, ràpid!) antigemofil′noj plasma o Cryoprecipitate, i llavors bastant ràpid (per a 10-18 h) el constant descens del seu, Mentre que la malaltia de von Willebrand, hi ha hagut un augment d'activitat de coagulació poques hores després de la transfusió, i llavors la seva decadència és molt més lent, que quan. En aquest sentit, en el tractament de la malaltia de von Willebrand més rarament va recórrer a zamestitel′nym transfuziâm, que l'hemofília un.

Estudi sobre l'activitat funcional de coagulació factors i components de kallickrein-kininova i fibrinolític sistemes que utilitzen substrats cromogènic

Mètodes es basen en l'activitat de recerca d'enzims proteolítica i d'inhibidors, participant en sang, fibrinolize i la formació de kinins, la intensitat i la velocitat d'aquest enzims específicament cleaving sensible de pèptids, Quan la degradació que alliberat colorant (Β-nitroanilin).

El grau de barreges de reaccionar de coloració es determina spectrophotometrically, i la intensitat són jutjats activitat rellevant enzims (factors de la coagulació, kallickreina, plasmin, etc.), i a la inhibició procés és sobre l'activitat d'inhibidors enzimàtics.

Així, per exemple,, efecte d'heparina i III de Antithrombin pot ser avaluat per mitigar els substrats cromogènic divisió Factor Xa o trombinom, i l'activitat de α₂-antiplazmina — per reduir l'acció de substrat cromogènic corresponent plasmin. Substrats cromogènic o tenen digital signage (per exemple,, s-2222), tampoc anomenat hromozinami amb un prefix abreujat, que denota l'enzim, a quin substrat sensible (per exemple,, Plasmin PL-substrat Chromozym, Substrat Chromozym TH-trombina, PK-substrat Chromozym prekallikreina/kallickreina i t. d.).

Substrats cromogènic potenciar recerca del sistema hemostàsia, però no estan disponibles per a molts laboratoris. Algunes investigacions, elaborada amb ells, no tenen avantatges sobre proves koagulâcionnymi convencionals i donar-los resultats coincidents; en altres casos el seu ús simplifica i accelera la recerca, fa que sigui més precisa; En tercer lloc, aquests mètodes són independents i no es pot substituir per proves koagulâcionnymi (per exemple,, definició de prekallikreina).

Immunològica identificació dels components del sistema l'hemostàsia

Immunològica identificació dels components del sistema l'hemostàsia executa mètodes:

• Immunoprecipitation;
• Immunoèlektroforeza;
• Radioimmunologičeskimi i altres amb Antisera rellevants

Quan aquest contingut es mesura en plasma Antigen d'un factor de coagulació (o seus fragments), en lloc d'activitat funcional, que es pot reduir dràsticament en els continguts de l'Antigen en plasma normal. Aquesta situació és comuna a tots els casos, on en el cos són anormal (funcionalment defectuós) factors, preservar la seva antigenicity, però privat de la possibilitat de participar en gemostaze.

Això permet distingir entre el cessament complet de la síntesi de factors rellevants i l'educació de les seves formes anormals.

No obstant això, alguns components del sistema l'hemostàsia només pot ser determinat immunologically.

Aquest grup inclou aquestes investigacions importants, com la definició dels components següents::

• Β-tromboglobulina;
• Α2-macroglobulin;
• proteïnes C i S;
• factor VIII Antigen:(C) i (VIII):R_COF;
• productes de fibrinolysis (PDF);
• complexos neoantigenov de trombina-Antithrombin III i plasmin-doesn t;
• un nombre d'altres proves.

Estudi immunològic, per tant, en gran mesura complementa la valoració funcional dels diferents nivells del sistema l'hemostàsia.

Les proves de diagnòstic, basada en l'ús com a preparació de reactius de verins de serp

Es va establir, que verins així serps contenen enzims proteolítica molt actius, causa de la coagulació i afecten a diferents parts de la cascada de coagulació. En conseqüència, les serps i koagulazy d'elles són àmpliament utilitzats per al reconeixement dels trastorns de l'hemostàsia, determinació quantitativa de factors de la coagulació, identificació i determinació quantitativa dels complexos monomèrica de fibrina solubles (RFMK) i diversos altres estudis.

Mostres amb la serp-verins són sovint molt més fàcil i fer més ràpid diagnòstic dels trastorns de l'hemostàsia.

Aquesta taula conté dades sobre el mecanisme d'acció de verins en svertawatuyu sang i característiques diagnòstiques de cadascun d'ells.

Aquestes oportunitats han ampliat encara més si utilitza diversos verins i les proves de coagulació comú més simple. Així, per exemple,, l'aplicació simultània de coagulació assajos gurzy verí i EFA permet diferenciar fàcilment factor deficiència VII, X-V II (a la taula següent), i amb una correcció addicional filtrat de plasma normal (font dels factors V i II) — X i V factors de deficiència.

Definició de bàsica amb anticoagulants fisiològics

El més important és l'activitat definitori de la anticoagulant fisiològic bàsic — antitrombina III, reducció que pot ser genètica (thrombophilia primària) o secundària, a causa de consum intensiu (DIC, trombosi massiva) o metabolisme accelerat (tractament d'heparina, L-asparaginazoj, anticoncepció sintètic) i el setge de complexes immunes, paraproteinami, amb fibronectina, proteïnes de fase aguda.

En qualsevol cas, la reduïda activitat antitrombina III per sota de 60-65 % dóna suport a la coagulació intravascular, fa menys pronunciada heparina anticoagulant. No obstant això, molt sovint entre el nivell de sensibilitat i disminuir d'antitrombina III a geparino cap patró coherent de conformitat.

Normalment un debilitament de l'acció antikoagulântnogo d'heparina substancialment preval sobre el grau de reducció activitat antitrombina III. Provades, Aquest dèficit a diferents formes d'antitrombina III la seva afinitat per l'heparina pot variar en diferents graus. A més, diferents faccions d'heparina, la proporció que medicaments molt agitades, també tenen una afinitat diferent a antitrombino III. Per això és pràcticament important explorar com la present activitat antitrombina III, i la seva capacitat per ser influenciat per la heparina en acció ràpida anticoagulant.

Activitat anticoagulant antitrombina III

Activitat anticoagulant antitrombina III està determinada per la capacitat d'analitzar el plasma sanguini (divorciat Copley és un mètode de Vinterštejna o defibrination de la denaturaciei tèrmic a una temperatura de 56 ° С — mètodes Loligera, Abil′dgaarda, etc.) Desactiva dins un període de temps l'aportació externa de trombina. L'activitat residual de trombina en tal un plasma es pot mesurar per la seva activitat de coagulació (en fibrinogene, Sulfat de Bari adsorbit de plasma) ja sigui per separació de substrat hromogennogo, sensible a la trombinu o factor Xa (com Antithrombin III i inactivar factor).

Activitat d'heparina-kofaktornaâ

Heparina-kofaktornaâ activitat contingudes en el plasma sanguini Antithrombin III un període més llarg va determinar mitjançant la prova de tolerància a el geparino de plasma, que es considerin ser indicatiu, perquè dóna un ventall molt ampli d'indicadors normals i no suficientment repetible.

Molt més precisa i manté un izvodimy de proves, que explora els efectes de diferents concentracions d'heparina per temps de trombina investigat de plasma, que contenen una petita quantitat de plaquetes. Comparació amb l'allargament de la trombina temps control plasma sanguini normal, a la qual s'afegeixen les mateixes mostres d'heparina.

Així, en la geparinovom de trombina prova pel plasma investigat afegit aquestes quantitats d'heparina, aquell control estendre el temps d'acció de la trombina amb 15 fins a 32-35 amb (petita concentració) i fins a 95-110 amb (l'alta concentració d'heparina). Aquestes xifres són índexs calculats de plasma de antitrombinov activitat (AARP) i reserva antikoagulântnogo de plasma (ARP).

Tècniques similars són també comunament utilitzats per avaluar tant la humana trombina inactivació de proves de coagulació, i dels substrats cromogènic.

Identificació immunològiques de l'Antigen antitrombina III

Identificació immunològiques de l'Antigen antitrombina III permet diferenciar diferents tipus de thrombophilia:

• Síntesis insuficient d'antitrombina III (nivell marcador antigènica rebaixat adequadament reduir l'activitat);
• amb una síntesi de formes anormals i funcionalment subestàndard salvat (nivell de marcador antigènica és molt més alt, que l'activitat).

Proteïnes C i S, Thrombomodulin i α₂-macroglobulin són defineixen els mètodes immunoènzimatičeskimi.