Anèmia, associat amb la deficiència d'àcid fòlic

Sigui quina sigui la raó per la deficiència d'àcid fòlic anèmia es caracteritza per l'aparició en els megaloblastos de medul·la òssia, destrucció intramedul·lar erythrokaryocytes, patsitopeniey, macrocitosi i hipercromia glòbuls vermells i, de vegades - els trastorns mentals.

Folievaya (pteroilglutaminovaya) àcid (vitamina B₉) Consta de tres components:

• anell de pteridina;
• Àcid p-aminobenzoico (en conjunt constitueixen l'àcid pteroievuyu);
• àcid glutàmic.

El pes molecular de l'àcid fòlic - 441. L'àcid fòlic és actiu en la forma de derivats d'àcid tetrahidrofólico. Contingut d'àcid fòlic en diferents formes en el cos humà és aproximadament 5-10 mg. Les accions en violació del seu ingrés en el cos poden esgotar més 4 del mes.

El requeriment diari d'àcid fòlic és de 100-200 micrograms, Embaràs, anèmia hemolítica, augmenta moltes vegades.

La quantitat total d'àcid fòlic en la dieta amb tota la potència de 500-600 micrograms per dia. Folato - folats continguda en quantitats considerables en el fetge, llevat, espinela, carn. Més 50 % àcid fòlic, en els aliments, Pot ser destruït quan es cuina.

L'àcid fòlic s'absorbeix en l'intestí prim superior. La capacitat dels intestins per absorbir l'àcid fòlic és molt més gran que el seu requeriment diari.

L'àcid fòlic participa en la síntesi de bases de purina i pirimidina, juntament amb metilcobalamina - la síntesi de nofosfata timidinm uridinmonofosfata. Coenzims folat Més involucrat en una sèrie de reaccions. En particular, tetrahidrofolato participa en la síntesi d'histidina àcid glutàmic.

Etiologia i patogènia de l'anèmia durant la deficiència d'àcid fòlic

Deficiència d'àcid fòlic, així com dèficit de cobalamina, Això condueix al desenvolupament d'anèmia megaloblàstica.

La malabsorció de folat observat en individus, la resecció de l'intestí prim, especialment el jejú, així com en el llarg termini prenent anticonvulsius com la difenilhidantoína (difenina) i el fenobarbital (luminal). La ingesta d'àcid fòlic es trenca quan l'abeurador i la malaltia celíaca. Deficiència d'àcid fòlic, així com dèficit de cobalamina, observat en síndrome de nansa cega. Descrit casos rars de trastorns hereditaris de transport àcid fòlic a través de la paret intestinal i en el líquid cefaloraquidi. L'absorció d'altres substàncies sense patir.

Deficiència d'àcid fòlic en els nadons observat en la prematuritat, violació de l'absorció intestinal, La llet de cabra alimentats, que conté una petita quantitat d'àcid fòlic.

Una mala absorció significativa d'àcid fòlic pot ocórrer en pacients, alcohòlics.

L'augment del consum d'àcid fòlic durant l'embaràs Pot conduir a una deficiència d'àcid fòlic, No obstant això, en els països desenvolupats avui dia és estrany. Deficiència d'àcid fòlic en dones embarassades es troba a baixa potència, la presència d'anèmia hemolítica, utilitzar abans de l'embaràs un gran nombre de begudes alcohòliques.

Les manifestacions clíniques de la deficiència de folat

Deficiència d'àcid fòlic en els nens i les dones joves. Al mateix temps, els pacients es queixen de debilitat general, mareig. A diferència de la deficiència de cobalamina dolor en la llengua observa rarament. Parestèsies, i altres signes de mielosis funicular que falten. Escleròtica sovint ikterichnost.

En contrast amb el dèficit de la deficiència de cobalamina d'àcid fòlic és gistaminoupornaya rarament observada Akhil, gastratrophia, tot i que la disminució de la secreció gàstrica és sovint.

Per a la deficiència d'àcid fòlic, així com per a la deficiència de la cobalamina, caracteritzat per l'aparició a la sang perifèrica macrocitosi, megalocitov i megaloblastos, la presència d'anèmia hipercrómica, reduint el nombre de reticulòcits, plaquetes i leucopènia amb canvi neutrofílica a l'esquerra i dreta. A la medul·la òssia - megaloblastos.

Els canvis en el sistema nerviós són diferents de les manifestacions a B₁₂-L'anèmia per deficiència.

Provades, que les persones amb epilèpsia, Deficiència d'àcid fòlic condueix a freqüents atacs, al seu major severitat. Això és particularment important a causa del fet, que prenent anticonvulsius pot causar la mala absorció de folat. Segons la literatura, en individus amb deficiència d'àcid fòlic esquizofrènia condueix a un empitjorament de la malaltia, símptomes més severs i tractament menys eficaç.

El diagnòstic diferencial de la deficiència de cobalamina i àcid fòlic

Per al diagnòstic diferencial de la deficiència de cobalamina i àcid fòlic s'utilitza mètode de radioimmunoassaig per a la determinació d'àcid fòlic en el sèrum i en particular en els eritròcits. El contingut de cobalamina es determina pel mètode microbiològic. Com a organisme de prova utilitzat com Streptococcus faecalis i Lactobacillis casei. Normalment, el contingut d'àcid fòlic en els rangs de sèrum sanguini, Segons els autors, utilitzant diferents mètodes d'investigació, de 3 a 25 ng / ml, i eritròcits - a partir de 100 a 425 ng / ml.

En la deficiència d'àcid fòlic disminueix a mesura que el nivell de sèrum, i en els eritròcits. Contingut d'àcid fòlic en la deficiència kolabaminov en el sèrum de la sang sovint s'eleva, i els eritròcits de vegades poden reduir, encara que el descens, normalment, una petita.

Per al diagnòstic de deficiència d'àcid fòlic també s'utilitza Mètode Load histidina (15 g), a continuació, definir el contingut d'àcid en l'orina formiminglutaminovoy. Normalment, la major part de les formes d'histidina àcid glutàmic. Amb la producció d'orina àcida formiminglutaminovoy 18.1 mg. En la deficiència d'àcid fòlic per a les 8 hores després de la seva introducció en el cos s'allibera de l'orina 20 a 1500 àcid formiminglutaminovoy mg. Un nombre significatiu d'àcid formiminglutaminovoy excretada en l'orina després de l'administració de la histidina en persones, tractats amb metotrexat. En la deficiència de la cobalamina, cirrosi del fetge l'excreció urinària d'àcid augmenta formiminglutaminovoy, en menor mesura, que amb un dèficit d'àcid fòlic. Els nivells normals de l'orina de contingut d'àcid metilmalónico augments formiminglutaminovoy histidina àcid després de rebre proves de la deficiència d'àcid fòlic, en lloc de cobalamina.

Ajuda a diferenciar aquests dos estats i l'estudi amb radionúclids. En la deficiència de la cobalamina, associat amb la violació de la secreció de factor intrínsec, mala absorció de cianocobalamina marcada, una deficiència d'àcid fòlic, s'absorbeix correctament.

En la deficiència d'àcid fòlic, la seva introducció en el cos condueix a un major contingut de reticulòcits, mentre que la injecció de cianocobalamina (derivats) ineficaç. Metilcobalamina deficiència d'àcid fòlic augmenta el nivell de reticulòcits.

Definició dels neutròfils de segmentació índex

Compti el nombre de neutròfils, amb 4 segment i més (Total 200 cèl·lula). Determinar el percentatge de cèl·lules, amb 5 segments i més en relació amb la quantitat de cèl·lules, amb 4 segment. L'índex es determina per la fórmula:

IS =(Kansas (5 i mes))/Kansas(4);

on IC - segmentació índex;

Kansas (5 i mes) - El nombre de neutròfils segmentats (en 200 cèl·lula), en el qual el nombre de segments és igual a 5 o més;

Kansas (4) - El nombre de neutròfils segmentats, en el qual el nombre de segments és igual a 4.

Normalment, els rangs d'aquest índex 2,5 a 25 %. On, quan excedeix 30 % (oscil·lacions 120%), Es pot parlar de neutròfils hipersegmentació. Es va observar la deficiència d'àcid fòlic, metilkoʙalamina, i la urèmia.

Determinació d'àcid metilmalónico en l'orina per Giordio i Plaud

Reactius.

1. La resina d'intercanvi iònic Dowex-Zx4 (forma de clorur, 200-400 Malla). La resina es va rentar amb cinc volums d'aigua destil·lada 3 vegades, es va suspendre en dos volums d'aigua destil·lada i s'emmagatzema en un plat foscor a 4 ° C.

2. Una solució de para-nitroanilina 0,075 % preparada dissolent 37,5 reactiu mg 500 ml 0,2 Solució M d'àcid clorhídric. Emmagatzemar en una olla fosca, Es va mantenir estable durant diversos mesos a temperatura ambient.

3.Tampó d'acetat (pH 4,3) a partir de 1 M acetat de sodi i 1 Solució M d'àcid acètic.

4.Diazoreaktiv: 4 ml 0,5 % solució de nitrat de sodi es va barrejar amb 15 per-nitroanilina ml. La barreja es va col·locar en un refrigerador a 4 ° C i es va afegir la solució refredada 4 ml 0,2 M acetat de sodi. Reactiu estable a temperatures 4 ° C durant un dia.

5.Normalitat 0,05 Solució M d'àcid metilmalónico: 295 àcid metilmalónico mg es dissolen en 50 ml d'aigua.

Mètode

L'orina es va recollir en una ampolla de vidre i es va congelar fins que l'estudi. Per estudiar la part de càrrega de l'orina (20- 25 ml), descongelat, tsentrifugiruyut, i el sobrenedant es va recollir usant una solució feble de hidròxid de sodi o àcid clorhídric per ajustar el pH 6,5.

Alçada de la columna cromatogràfica 20 cm i un diàmetre 1 cm es va omplir amb resina Dowex-Zx4. La capa de resina ha d'estar dins de 3 cm. Es fa passar a través de la resina 5 ml d'orina, renta amb aigua destil·lada (2 × 50 ml a una velocitat de no més de 15 ml 1 de). Àcid metilmalónico es pot eluir de la resina 20 ml 0,1 Solució M d'àcid clorhídric. Addicional 2 ml de eluït es van barrejar amb 3 ml 1 M tampó d'acetat pH 4,3 en un tub d'assaig amb un tap de vidre (15×2cm). S'afegeix a la barreja 3 diazoreaktiva freda ml, en el qual el pH s'eleva fins 4,0. La barreja es va escalfar en un bany d'aigua a una temperatura 94 ° C. 3 min i 2 ml 3 Solució d'hidròxid sòdic M. El tub es retira llavors del bany d'aigua, tapar i els continguts es van agitar. La barreja es va refredar a temperatura ambient durant 10 min i al fotometriruyut 620 nm en una cubeta amb una longitud de trajectòria 1 cm.

Com a control, una barreja de, que consisteix en 2 ml 0,1 Solució M d'àcid clorhídric, 3 ml i diazoreaktiva 3 tampó d'acetat ml. Solució patró d'àcid metilmalónico consta dels mateixos components i 0,02 ml 0,05 Solució M d'àcid metilmalónico. L'absorbància d'aquestes solucions van ser mesurats en les mateixes condicions.

Contingut d'àcid metilmalónico (mg) per unitat de volum de l'orina (1 l) definit per la fórmula:

(ÉS_Mostra-ÉS_control)/(ÉS_estàndard-ÉS_control)*A *((1000*T)/M)

on E - absorbància de diverses mostres;

A - la quantitat d'àcid metilmalónico en un tub d'assaig estàndard, ml;

1000 - La quantitat d'orina, adoptat per a la investigació, ml;

T - la quantitat d'àcid clorhídric, pres per elució, ml;

M - el número del eluat, adoptat per a la investigació, ml.

En les condicions anteriors, la fórmula es pot simplificar com segueix::

(ÉS_Mostra-ÉS_control)/(ÉS_estàndard-ÉS_control)*236

On, quan la quantitat d'àcid metilmalónico en l'orina és més gran que 300 mg / l, ha de ser re-barrejat amb eluat tampó d'acetat i diazoreaktivom, però en comptes 2 ml de eluït és convenient prendre 4- 10 vegades menor i portar el volum a 2 ml 0,1 Solució d'àcid clorhídric M. El càlcul ha de tenir en compte la dilució.

Normalment per dia, amb la producció d'orina 0,6-4,7 mg d'àcid metilmalónico. A la deficiència de cobalamina excreció diària d'abastos d'àcid metilmalónico 294 mg. Normalment, la recepció 10 g valina no augmenta aclariment d'àcid metilmalónico, deficiència de cobalamina augmenta l'excreció d'àcid metilmalónico.

Determinació d'àcid metilmalónico en l'orina per Green

Reactius.

1. Èter.
2. Etanol.
3. Una solució d'àcid clorhídric 0,1 M.
4. El sulfat d'amoni.
5. Fort deatsidit resina base FF (200 malla, forma de clorur).
6. Una solució de nitrat de sodi 0,5 % (pes / volum).
7. Una solució de para-nitroanilina (750 mg dissoldre en 1 l 0,2 Solució M d'àcid clorhídric).
8. El acetat de sodi 0,2 M.
9. Tampó d'acetat 1 M, pH 4,3: mixt 1 Solució d'acetat de sodi i M 1 Solució M d'àcid acètic en la proporció 16,35:33,9.
10. Una solució aquosa d'hidròxid de sodi 3 M.

LA. Àcid metilmalónico Solució estàndard: 100 mg dissoldre en 100 ml d'aigua, emmagatzemat a la nevera.

B. Treballar àcid metilmalónico estàndard: solució estàndard diluïda en 20 temps 0,1 Solució d'àcid clorhídric M (1 ml de la norma i 19 ml d'àcid clorhídric). Aquesta quantitat d'equivalent d'àcid metilmalónico 100 àcid metilmalónico mg 1 condicions de prova d'orina l.

Per a la preparació de diazoreaktiva mixta 4 ml 0,5 % solució de nitrat de sodi i 15 per-nitroanilina ml. La barreja es va col·locar en un bany de gel i afegir 4 ml 0,2 M acetat de sodi.

Mètode.

Es va recollir l'orina durant un dia, mesurat el seu volum i 10 ml podkislyayut 1 Solució d'àcid sulfúric M a pH 2,0 o lleugerament per sota. Es va afegir sulfat amònic a una saturació. La barreja es va col·locar en un embut de separació i es va extreure tres vegades amb èter i etanol en una proporció de 3:1. Per evitar la formació d'emulsions barreja extractant s'usa en excés.

L'extracte es passa a través d'una cromatografia en columna petita (1 – 1,5 cm de diàmetre), acabat 5 ml de resina. La columna es va rentar 50 ml d'aigua destil·lada. Àcid metilmalónico eluye 0,1 Solució d'àcid clorhídric M. Després de la elució seleccionat 2 ml eluat, W s'afegeix ml de la solució tampó d'acetat, i 3 ml diazoreaktiva.

Després de barrejar, el tub es va col·locar en un bany d'aigua a una temperatura 95 ° C 3 m. Llavors afegit 2 ml 3 M d'hidròxid de sodi i un cop tap de tub tancat per minimitzar el contacte amb l'aire. Després de refredar, l'absorbància es va mesurar a la longitud d'ona 620 ells. Per al blanc en lloc d'utilitzar l'eluat 2 ml 0,1 Solució M d'àcid clorhídric, i per a la solució estàndard - 2 ml de patró de treball.