الأنيميا, بسبب نقص نشاط نازعة الجلوكوز 6 فوسفات

النشاط العجز جلوكوزو-6-فوسفاتديجيدروجينازا (زاي-6-PD) هو الشذوذ الوراثي الأكثر شيوعاً من خلايا الدم الحمراء, تسبب كريزام الانحلالي, ترتبط باقتناء عدد من الطبية الوسائل. ما وراء الأزمات في الغالبية العظمى من المرضى لديهم حالة من التعويض الكامل, على الرغم من أن الفرد له مكان دائم من فقر الدم الانحلالي.

وقد تم وصف أول من نقص في نشاط G-6-PD في 1956 ز. بالأشخاص, أخذ وقائي بريماكين الأدوية المضادة للملاريا. بغض النظر عن هذه الدراسات 1957 ز. تم اكتشاف نقص G-6-PD في خلايا الدم الحمراء للمريض, الذي لوحظ بشكل دوري الأزمات الحالة للدم من دون أخذ أي أدوية.

وصف حاليا أكثر 250 مختلف أشكال متحولة من G-6-PD. وهي تختلف عن بعضها البعض في الحراك الكهربي للانزيم, تقارب لركائز - الجلوكوز 6 فوسفات ونيكوتيناميد الأدينين ثنائي النوكليوتيد الفوسفات (NADf) ونتيجة لانخفاض تقارب هو النشاط غير كافية انزيم تحت, عندما تركيز ركائز يقتصر بدقة نسبة تكونها في ردود الفعل ما سبق. وقلة النشاط لا يعني أكثر من فقدان هذا الإنزيم على هذا النحو، على الرغم من أنها قد تحدث، ومثل هذه الحالات لا. في معظم الحالات، وغياب أو الحد من نشاط انزيم - نتيجة وجودها في شكل غير نشط المرضية للمريض.

الجينات الهيكلي والجينات منظم, مشروطا تركيب G-6-PD, وتقع على الصبغي X-, وبالتالي، ترث نشاط هذا الإنزيم نقص في كريات الدم الحمراء التزمت دائما إلى X-كروموسوم.

هناك شكلين رئيسيين من متحولة, التي استبدال حمض أميني لا تتصل المواقع المفعلة, وذلك على حد سواء هذه الطفرات واسعة النطاق طبيعية. وهي تختلف في التنقل الكهربي, ومع ذلك، فإن التقارب إلى الركيزة أنهم على قدم المساواة. وفقا لتسمية الحديثة, واحدة من هذه الأشكال, شيوعا في أوروبا, ودعا شكل BB, والآخر, وجدت في أفريقيا - نموذج A. حاليا، وصفت وأشكال متحولة أخرى, الذي أيضا لم تختلف عن بعضها البعض في المعلمات الحركية, ولكن لديها التنقل الكهربي مختلفة.

تشابك الانزيم مع الكلمة يعطي غلبة كبيرة من الرجال بين الأشخاص الذين يعانون من مرض أعراض. لوحظ في الرجال متماثل, هذا علم الأمراض الموروثة من الأم معها X كروموسوم, النساء متماثل (ورث المرض من كلا الوالدين) وفي بعض الإناث متخالف, وراثة المرض من أحد الوالدين مع النمط الظاهري متحولة أعرب.

تم العثور على نقص الأكثر شيوعا لنشاط G-6-PD في أوروبا, وتقع على ساحل البحر الأبيض المتوسط, يونان, إيطاليا, وكذلك في بعض بلدان أمريكا اللاتينية, افريقيا الخ..

ربما, أن تراكم عال جدا من هذا الجين غير طبيعي في عدد من المستوطنات يسهم الحفاظ على عادة زواج الأقارب, الأمر الذي يؤدي إلى تراكم في عدد السكان من النساء متماثل, إعطاء المظاهر السريرية الشديدة من المرض في كثير من الأحيان, من ناقلات متخالف, ويزيد من احتمال ميلاد الذكور متماثل, وكذلك على نطاق واسع في الماضي في هذه الأماكن الملاريا المنجلية.

ووفقا لهذه الفرضية الحالية, شخص, مع عجز قدره G-6-PD, أسهل على تحمل الملاريا الاستوائية ونادرا ما يموتون من هذا المرض. لصالح من هذه الفرضية هو حقيقة انتشار غير المتكافئ للطفيل بين خلايا الدم الحمراء للنساء متخالف. لقد وجدت, أن الخلايا الطبيعية تحتوي على عدد أكبر بكثير من الطفيليات, من نادرة. هناك تفسيران لهذا الواقع المزعوم. وأول هذه: العجز كرات الدم الحمراء من G-6-PD ليست قادرة على تحمل آثار الطفيل وعلى الفور يكسر نظام الضامة أكلة, حيث قتل المتصورة. ويشير رأي آخر neobhodmost لتطوير الطفيلي الجلوتاثيون المختزل, يتم تخفيض المبلغ الذي في كريات الدم الحمراء تعاني من نقص G-6-PD.

المسببات المرضية

المرحلة الأولى من التعرض للدواء - تحويل وجودها في الجسم, الانتقال إلى النموذج النشط, والتي يمكن أن تسبب تغيرات في بنية الغشاء من كرات الدم الحمراء. النموذج النشط من الدواء يتفاعل مع الأوكسي هيموغلوبين. وهذا يخلق قدرا معينا من بيروكسيد الهيدروجين.

الجلوتاثيون المختزل البيروكسيديز باستخدام نظام يحيد بعض من بيروكسيد, خلال رد فعل يتأكسد الجلوتاثيون المختزل.

في الأشخاص الأصحاء، أزمة الانحلالي الحادة تتطور مع إدخال كمية كبيرة من المخدرات (جرعة سامة). أزمة يمكن أن تنشأ عندما, عندما تعجز أنظمة التعافي من الجلوتاثيون للتعامل مع الزيادة في مجمع شكلت وأكسدة الجلوتاثيون. في نقص نازعة الجلوكوز 6 فوسفات وNADP استعادة بالانزعاج, على الرغم من النشاط الطبيعي للاختزال الجلوتاثيون, انتهكت شفائه, حيث لا يوجد مصدر الهيدروجين العادي. الجلوتاثيون المختزل لا يمكن أن تصمد أمام عمل مؤكسد للجرعات العلاجية التقليدية من المخدرات. وهذا يؤدي إلى أكسدة الهيموغلوبين, فقدان الهيم من جزيئات الهيموغلوبين, هطول الأمطار من سلاسل الغلوبين. الطحال النشرات خلايا الدم الحمراء من خلايا هاينز. عند فقدان هذا الجزء سطح كرات الدم الحمراء, الذي يؤدي إلى وفاتهم.

في التسبب في فقر الدم الانحلالي, يرتبط استهلاك الفاصوليا الحصان, لا يزال كثير غير واضح. فقر الدم Primahinovaya (favizm) وهي تتطور إلا في بعض الأفراد الذين يعانون من نقص في نشاط G-6-PD. ربما, يحمل هذا فقر الدم يتطلب مزيج من اثنين من العيوب انزيم. ربما, أننا نتحدث عن عدم وجود تحييد بعض الأشخاص مادة سامة, الواردة في الفول البلدى, أو على تشكيل المستقلب, مما تسبب في اضطرابات في المجموعات سلفهيدريل من خلايا الدم الحمراء. في الاشخاص الاصحاء تلقي كمية صغيرة من الفول لا يسبب فقر دم انحلالي شديد, منذ ذلك الحين في وجود الجلوتاثيون المختزل في خلايا الدم الحمراء قادرة على مواجهة تأثير سام من المستقلب. الميراث من هذا العجز, كما يبدو, autosomnoe المهيمنة. عندما يقترن تحول غير عادي في الجسم من المواد السامة, الواردة في الفول البلدى, النشاط نقص من G-6-PD واضح علامات سريرية فوال.

المظاهر السريرية

ومنظمة الصحة العالمية ينقسم الخبراء إصدارات G-6-PD وفقا للالمظاهر السريرية في المرضى الذين يعانون من مستويات متماثل والنشاط في خلايا الدم الحمراء إلى أربع فئات.

الدرجة الأولى - خيارات, والتي يرافقه فقر الدم الانحلالي المزمن.

الدرجة الثانية - الخيارات مع مستوى نشاط G-6-PD كرات الدم الحمراء 0- 10 % من القاعدة, الأمر الذي يؤدي إلى عدم وجود الناقل الانحلالي أزمة فقر الدم, والأزمات, يرتبط تناول الأدوية أو استخدام horsebean.

من الدرجة الثالثة - المتغيرات مع مستويات النشاط في خلايا الدم الحمراء 10-60 % من القاعدة, التي قد تحدث المظاهر السريرية خفيفة, المرتبطة بكمية الأدوية.

الصف الرابع - خيارات لمستويات النشاط الطبيعية العادية أو بالقرب منها, لم يكن مصحوبا علم الأمراض السريرية.

عند الولادة، الطفل لديه فقر الدم الانحلالي, فيما يتعلق بكل من أول, والطبقة الثانية من نقص G-6-PD.

مستوى النشاط من G-6-PD كرات الدم الحمراء لا تتطابق دائما مع شدة المظاهر السريرية لل. في كثير من تجسيدات، يتم تحديد الدرجة الأولى 20-30 % مستوى نشاط إنزيم. من ناحية أخرى, في مستوى الصفر من النشاط في بعض المرضى لا تظهر أي أعراض سريرية. ويرجع ذلك, في البداية, الانزيمات مع خصائص lutantnyh, ثانيا, على الأرجح, بمعدل التعطيل من جهاز المخدرات السيتوكروم مريض الكبد.

نقص الأكثر شيوعا لنشاط G-6-PD لا يوفر المظاهر السريرية دون أزمة الانحلالي استفزاز خاص. في معظم الحالات، تبدأ أزمة الانحلالي بعد تلقي السلفوناميدات (norsulfazola, stryeptotsida, sulfadimetoksina, sulfatsil الصوديوم, etazola, biseptola), الأدوية المضادة للملاريا (بريماكين, xinina, كيناكرين), المخدرات نتروفوران (furazolidona, فورادونينا, furagina, 5-NOK, nevigramona), المخدرات من حمض isonicotinic (tuʙazida, ftivazida), PAS-الصوديوم, وكذلك النتروجليسرين.

من الأدوية المضادة للملاريا في النشاط نقص G-6-PD قد يتم تعيين delagil, من السلفا - ftalazol. وهناك عدد من الأدوية, تسبب الجرعات الكبيرة أزمة الانحلالي, في جرعات صغيرة يمكن استخدامه مع النشاط العجز من G-6-PD. وتشمل هذه الأسبرين, amidopirin, fenacitin, levomicetin, الستربتومايسين عقار طبي, عقاقير السلفا المضادة لمرض السكر.

جميع الأدوية, يمكن أن يسبب أزمات الانحلالي, تمسخ الهيموجلوبين حفز الأكسدة مع الأكسجين الجزيئي.

قد تحدث المظاهر السريرية للمرض في اليوم الثاني أو الثالث من بداية الدواء. أولا، هناك اصفرار الصلبة طفيفة, البول الداكن. عند انتهاء المخدرات خلال هذه الفترة أزمة الانحلالي الثقيل لا تتطور. إذا استمرت المعاملة, قد يحدث يوم 4-5-التاسع من أزمة الانحلالي مع الافراج عن البول الأسود أو البني أحيانا, الذي يرتبط مع انحلال الكريات الحمر داخل الأوعية الدموية. ويمكن خفض الهيموجلوبين بنسبة 2-3 %.

في زيادة المرض الشديد درجة حرارة الجسم, هناك صداع حاد, ألم في الأطراف, قيء, في بعض الأحيان - الإسهال. هناك ضيق في التنفس, يقلل ضغط الدم. في كثير من الأحيان زيادة الطحال, في بعض الأحيان - الكبد.

في حالات نادرة من قصور كلوي يتطور, ويرجع ذلك إلى انخفاض حاد في الترشيح الكلوي والانسداد الأنبوبي الكلوي عن طريق تجلط الدم.

النتائج المخبرية

في الدم وكشف فحص فقر الدم مع زيادة كميات الشبكيات. زيادة في عدد الكريات البيض مع التحول إلى myelocytes. في بعض المرضى،, خاصة عند الأطفال, قد يرتفع عدد الكريات البيض في بعض الأحيان إلى أعداد كبيرة (100 T في 1 لتر وأكثر من ذلك). عدد الصفائح الدموية دون تغيير. عندما ملطخة الكريات الحمراء وضوح الشمس فوق البنفسجية أثناء الأزمات انحلال الدم الشديد كشفت عن وجود عدد كبير من أجسام هاينز.

كشفت عن وجود التحفيز حاد في نخاع العظام الأحمر. زيادة محتوى المصل من الهيموغلوبين مجانا, في كثير من الأحيان ارتفاع مستويات البيليروبين بسبب غير مباشر. مع عينة بنزيدين كشفت وجود الهيموجلوبين في البول دون خلايا الدم الحمراء, الكشف عن بعض الأحيان هيموسيديرين.

في بعض أشكال نقص نازعة الجلوكوز 6 فوسفات احظ ضبط النفس انحلال الدم, تي. إنها. فواصل أزمة الانحلالي, على الرغم من, أن المريض يستمر بتناول الدواء, أن أزمة الانحلالي الناجم. القدرة على الحد الذاتي للانحلال الدم الناجم عن زيادة تقريبا إلى القيم الطبيعية في مستوى الشبكيات نشاط انزيم. في معظم أشكال وتقلص إلى حد كبير.

في الأطفال، تحدث الأزمات الدم الانحلالي الشديدة على نحو أكثر تواترا, من البالغين. في نقص ملحوظ في نشاط G-6-PD حدوثها أحيانا بعد ولادته فورا. هذا المرض الانحلالي عند الوليد, لا ترتبط مع الصراع المناعية. يمكن أن يحدث مثلما من الصعب, كما فقر الدم الانحلالي, rezusnesovmestimostyu بسبب للأم والجنين. ولعل وجود اليرقان مع أعراض عصبية شديدة.

لم تتم دراسته التسبب في هذه الأزمات. لم يتم العثور حتى الآن, سواء تحدث هذه الأزمات بشكل عفوي بسبب نقص الفسيولوجية للنشاط أنزيم الجلوتاثيون عند الولادة أو تسبب لهم هو استخدام بعض المطهرات في علاج الحبل السري للطفل. ربما, أحيانا الأزمات المرتبطة تعاطي المخدرات معينة الأم.

في بعض الحالات أزمة الانحلالي مع وجود عجز النشاط من G-6-PD تنشأ ضد الأمراض المعدية: أنفلونزا, salmonelleza, التهاب الكبد الفيروسي. يمكن أثار الأزمات الحماض أيضا، مرض السكري أو قصور كلوي.

لاحظت وهناك نسبة صغيرة من المرضى الذين يعانون من نقص في نشاط G-6-PD فقر الدم الانحلالي المستمر, المرتبطة تعاطي المخدرات. في هذه الحالات، وهناك توسع طفيف في الطحال, فقر الدم السوي الصباغ المعتدل مع محتوى متزايد من الشبكيات, erythrokaryocytes في نخاع العظام والبيليروبين. تفاقم هذا المرض من الممكن إما بعد تناول الأدوية المذكورة أعلاه, أو على خلفية العدوى.

التشخيص

الأساس لتشخيص هذا المرض هو تحديد كرات الدم الحمراء نشاط انزيم G-6-PD في المستلفت وعائلته. من الطرق النوعية, تستخدم لهذا الغرض, ينبغي أن يوصي اثنين من الأساليب الأكثر بسيطة.

طريقة بيرنشتاين فإنه يجعل من الممكن ليس فقط لتشخيص نقص نشاط G-6-PD في جميع الرجال فرداني الزيجوت, النساء متماثل, ولكن بعض تقدير درجة نقص انزيم في الإناث متخالف. هذه الطريقة من الممكن التعرف على بعض 50 % الإناث متخالف. وميزة هذه الطريقة هي مدى ملاءمتها للاستخدام في فحص الجماعي للسكان في الظروف الميدانية.

وتستند هذه الطريقة على إزالة اللون من الصبغة 2،6-dichlorophenolindophenol وعندما أعيد تشكيلها. بحضور G-6-PD أكسدة الجلوكوز 6 فوسفات وNADP إعادة تشكيل NADP-H. هذه المادة تعيد phenazine methosulfate, والذي بدوره يعيد-dichlorophenolindophenol 2.6. methosulfate Phenazine في رد الفعل بمثابة نقل نشطة جدا من الإلكترونات من NADPH للتلوين. من دون رد فعل phenazine methosulfate يستغرق بضع ساعات, وبحضور methosulfate phenazine يحدث تلون في 15- 30 م.

الكواشف.

1. هناك حل من NADP: 23 ملغ NADP الذائبة في 10 مل من الماء.
2. حل الجلوكوز 6 فوسفات (G-6-F): 152 يذوب ملغ من ملح الصوديوم الجلوكوز 6 فوسفات في 10 مل من الماء. الملح الباريوم الجلوكوز 6 فوسفات يجب تحويلها سابقا إلى ملح الصوديوم. لهذا وزنه 265 أملاح barievoy ملغ الجلوكوز 6 فوسفات, الذائبة في 5 مل من الماء, إضافة 0,5 مل 0,01 M محلول حمض الهيدروكلوريك و 1 ملغ من كبريتات الصوديوم الجافة. تم طرد راسب. تم تحييد طاف 0,01 M محلول هيدروكسيد الصوديوم وتعديلها مع الماء المقطر ل 10 مل.
3. حل methosulfate phenazine: 2 ملغ phenazine methosulfate الذائبة في 100 مل تريس العازلة 0,74 M; درجة الحموضة 8,0.
4. محلول الصبغة من 2،6-dichlorophenol (أملاح natrievoy): 14,5 تم حله ملغ من الصبغة في 100 مل حل العازلة حمض الهيدروكلوريك تريس (0,74 M; درجة الحموضة 8,0). يتم تحضير محلول منظم من 1,48 M تريس-hydroxymethylaminomethane الحل (42,27 د من 250 مل من الماء) و 1,43 M حل من حمض الهيدروكلوريك (2 أمبولات fiksanala, يحتوي على 0,1 مكافئ, المياه تعديلها ل 135 مل). K 230 وأضيف مل من تريس-hydroxymethylaminomethane 110 مل من حمض الهيدروكلوريك, تعديل درجة الحموضة ل 8,0 ويضاف إلى الماء 460 مل.

قبل تطبيق الخليط على استعداد الكواشف: 1 لا. حل NADPH (1), 1 لا. حل F-6-P (2), 2 لا. حل methosulfate phenazine (3) و 16 لا. حل 2،6-dihlorfenolinodofenola (4).

طريقة.

في أنبوب الاختبار, يحتوي على 1 مل من الماء المقطر, المساهمة 0,02 مل من الدم.

بعد بداية انحلال الدم بإضافة 0,5 مل الكاشف. قراءة في 30 م. ويعتبر رد فعل كالمعتاد في صبغ تبيض الكامل. أين, عندما لا يحدث تلون صبغ (ويبقى مكثفة الأخضر والأزرق لون I), يتم تقييم استجابة نتيجة إيجابية بشكل حاد. إذا انخفضت شدة اللون, ولكن لا يزال اللون الأخضر والأزرق, يعتبر رد فعل zhitelnoy البولو. أين, عند وجود تلون واضح, ولكن بالمقارنة مع سيطرة يبقى لون مخضر, فيما رد فعل كما زائد ناقص.

Rezkopolozhitelnye رد فعل إيجابي تحدث في الذكور فرداني الزيجوت والنساء متماثل. أحيانا النساء متخالف تعطي رد فعل إيجابي, ولكن معظم زائد ناقص. بالإضافة إلى, زائد ناقص ويلاحظ ردود الفعل أحيانا في الأشخاص الأصحاء تماما مع بعض الانخفاض في نشاط الإنزيم على خلفية المرض أو الدواء. زائد ناقص ينبغي أن تؤخذ في الاعتبار ردود الفعل، والاختيار النشاط من الأسلوب الكمي انزيم إلا إذا كنت تشك في وجود فقر الدم الانحلالي امرأة, الناجمة عن نقص نازعة الجلوكوز 6 فوسفات. لا ينبغي أن تؤخذ في الاعتبار، زائد أو ناقص ردود الفعل على الفحص الشامل.

ردود فعل إيجابية كاذبة قد يكون من المرضى الذين يعانون من فقر الدم الحاد يرجع ذلك إلى حقيقة, ماذا 0,02 مل من الدم, قدم في أنبوب, أنها تحتوي على كمية صغيرة من الكريات الحمراء و, بناء على ذلك, كمية صغيرة من انزيم. في هذه الحالة، يجب أن يضاف الأنبوب الذي يحتوي الماء المقطر لاثنين أو ثلاثة ماصة (بواسطة 0,02 مل) دم, للون أنبوب الصبغة قبل الجمع لم تختلف عن السيطرة.

طريقة صمة عار الفلورسنت Beutler и ميتشل على أساس مضان معين من انخفاض NADP في ضوء الأشعة فوق البنفسجية طويلة الموجة (440- 470 نانومتر), تقييم بصريا في فترات محددة.

الكواشف.

1. عازلة تريس، حمض الهيدروكلوريك 0,5 M; درجة الحموضة 8,0: 60,55 تم حل تريس في 800 مل من الماء المقطر, إضافة 20 مل من حمض الهيدروكلوريك المركز, تعديل درجة الحموضة ل 8,0 من خلال 2 M حل حمض الهيدروكلوريك وتتكون بالماء ل 1 مل; يتم تخزين حل حتى 36 أيام في 4 درجات مئوية.
2. حل الجلوكوز 6 فوسفات 20 M: 6 يذوب الملح الصوديوم ملغ من الجلوكوز 6 فوسفات في 1 مل من الماء المقطر; سئمت 2 أيام في 4 درجات مئوية.
3. هناك حل من NADP 10 M: 8 ملغ NADP الذائبة في 1 مل من الماء المقطر; سئمت 10 أيام عند درجة حرارة 4 ° C.
4. الحل سابونين مائي 1 % سئمت 20 أيام عند درجة حرارة 4 ° C.
5. حل الجلوتاثيون المؤكسد (10 مل): 2,4 الجلوتاثيون ملغ الذائبة في 1 مل من الماء المقطر; سئمت 10 أيام في 4 درجات مئوية.

طريقة.

قبل تحديد خليط حضانة أعدت, خلط 1 لا. محلول الجلوكوز 6 فوسفات, 1 لا. حل NAD-F, 2 لا. حل سابونين, 5 لا. العازلة و 1 لا. ببساطة ينطوي الجلوتاثيون. دم (0,01 مل) قدم في أنبوب أو خلية التراص الدموي والبلاك أضاف 0,2 مل حضانة خليط. من خلال 15 دقيقة micropipette اختيار قطرة واحدة حضانة خليط (0,02 مل) من كل عينة ويطبق عليهم على ورقة الكروماتوغرافي في شكل بقعة يبلغ قطرها 10-12 ملم. تم تجفيف بؤر في الهواء عند درجة حرارة الغرفة وتصفح الأشعة فوق البنفسجية لتقييم مضان. عينات السيطرة هي الدم الطبيعي بشكل واضح. السيطرة على نوعية الكواشف لا يحتوي على الدم.

تقييم النتائج.

غياب مضان يتوافق مع قلة النشاط, nalïçïe مضان (توهج الأزرق مكثفة) - هناك نشاطا, توهج خافت - مركب وسطي. وفقا للشروط من طريقة التجربة لا تعطي نتائج سلبية كاذبة. مصدر التشخيص الإيجابي كاذبة يمكن أن يكون فقر الدم الشديد في الاستطلاع, ولكن إلى حد أقل بكثير, من طريقة Berstein. حتى مع فقر الدم لوحظ مركب وسطي شديد, لا نقص في مضان.

باستخدام الأسلوب الكمي لتحديد نشاط G-6-PD يجعل من الممكن تحديد الانخفاض في النشاط ليس فقط في فرداني الزيجوت ومتماثل المرضى, ولكن بين النساء متخالف. بسبب, أن عدد الشبكيات ومؤشر اللون يؤثر على مستوى نشاط إنزيم, فمن المستحسن لتعديل النتائج بناء على هذه المؤشرات.