Исследование кислотообразующей функции желудка — Химическое исследование содержимого желудка

Под исследованием кислотообразующей функции желудка подразумевается определение общей кислотности, свободной и связанной соляной кислоты, кислотного остатка, дебита соляной кислоты за 1 ч, кислого и щелочного компонентов секреции, истинного дебита соляной кислоты, протеолитической активности и содержания молочной кислоты.

Общую кислотность следует определять в свежеполученном желудочном содержимом, так как при стоянии его свойства изменяются. Желудочное содержимое титруется 0,1 н. раствором едкого натра в присутствии индикаторов. Для определения общей кислотности в качестве индикатора применяется фенолфталеин, который в кислой среде остается бесцветным, а в щелочной (при pH 8,2—10) становится красным.

Свободную соляную кислоту определяют в присутствии индикатора диметиламидоазобензола: красный цвет, появившийся при титровании желудочного содержимого едким натром, переходит в кирпично-желтый (желтовато-розовый или цвет семги) при pH 2,4—4,0.

При определении связанной соляной кислоты индикатором служит ализаринсульфоновокислый натрий, который при pH 4,3—6,2 изменяет цвет от желтого до фиолетового. В этом случае происходит нейтрализация всех кислых валентностей, кроме связанной соляной кислоты.

Определение кислотности содержимого желудка

Реактивы: 1 % спиртовой раствор фенолфталеина, 0,5 % спиртовой раствор диметиламидоазобензола (метиловый желтый, диметиловый желтый), 1 % водный раствор ализаринсульфоновокислого натрия (ализариновый красный S), 0,1 н. раствор едкого натра. Все эти растворы постоянны при комнатной температуре.

Метод Тепфера. В две колбы наливают по 5 мл профильтрованного желудочного содержимого. В первую добавляют 1—2 капли 1 % спиртового раствора диметиламидоазобензола и 1—2 капли спиртового раствора фенолфталеина. Во вторую — 1—2 капли ализаринсульфоновокислого натрия. Титруют 0,1 н. раствором едкого натра при постоянном помешивании. В процессе титрования желудочное содержимое изменяет окраску.

В первой порции желудочного содержимого отмечают количество щелочи, необходимой для титрования до перехода первоначального красного цвета в желтовато-розовый, что соответствует количеству свободной соляной кислоты и выявляется диметиламидоазобензолом, а также общее количество щелочи, использованной на титрование до перехода желтовато-розовой окраски в стойкий красный цвет, что соответствует общей кислотности и выявляется фенолфталеином.

Во второй порции желудочного содержимого отмечают количество щелочи, использованной на титрование от момента перехода первоначальной желтой окраски в фиолетовую (соответствует сумме всех кислореагирующих веществ, кроме связанной соляной кислоты, и выявляется ализаринсульфоновокислым натрием).

Общую кислотность определяют по количеству миллилитров 0,1 н. раствора едкого натра, израсходованного на титрование 100 мл желудочного содержимого (условная титрационная единица). Поскольку для титрования берут 5 мл желудочного содержимого, а расчет ведут на 100 мл, то количество использованной щелочи умножают на 20. Одна условная титрационная единица соответствует концентрации соляной кислоты 1 ммоль/л.

Метод Михаэлиса. С помощью этого метода титрометрически определяют общую кислотность, свободную и связанную соляную кислоту; определение последней условное.

При отсутствии в желудочном содержимом свободной соляной кислоты связанная соляная кислота может быть в пределах нормы или повышенной. Об отсутствии не только свободной, но и связанной соляной кислоты свидетельствует появление фиолетовой окраски при добавлении к желудочному содержимому индикатора ализаринсульфоновокислого натрия.

Ввиду того что фенолфталеин изменяет свой цвет не в нейтральной, а в щелочной среде (pH 8,2—10,0), показатели общей кислотности несколько завышены. Поэтому рекомендуется использование в качестве индикатора фенолрота (фенолового красного), окраска которого изменяется при pH 7,9.

Титрование с помощью индикаторов не отличается точностью, так как изменение их окраски наступает в довольно широких пределах pH и оценивается субъективно. Индикаторный метод можно контролировать pH-метрией.

Определение кислотности титрометрическим методом с контрольным исследованием pH желудочного содержимого. С помощью pH-метрии устанавливают конец титрования. Отмечают объем 0,1 н. едкого натра, затраченного на титрование 5 мл желудочного содержимого до pH 3,0 в присутствии диметиламилоазобензола для расчета количества свободной соляной кислоты и до pH 8,2 в присутствии фенолфталеина или до pH 7.9 при наличии фенолрота для определения общей кислотности.

При определении связанной соляной кислоты с индикатором ализаринсульфоновокислым натрием конец титрования с появлением фиолетовой окраски соответствует pH 6,2 (диапазон колебаний pH от 4,3 до 6,2).

Таким образом, контрольная pH-метрия исключает субъективную оценку изменения окраски титруемого желудочного содержимого при наличии индикаторов и этим увеличивает точность исследования. Расчет количества свободной и связанной соляной кислоту и общей кислотности проводится вышеуказанным способом с учетом количества едкого натра, затраченного на титрование.

При небольшом количестве извлеченного желудочного содержимого или необычной его окраске из-за примесей крови, желчи, пищи можно попытаться определить кислотность микрохимически. Исследование проводится с разведенным желудочным содержимым. В стаканчик помещают 1 мл желудочного сока и 5 мл дистиллированной воды. Определяют кислотность в присутствии индикаторов, титруя из микробюретки или пипетки 0,1 н. раствором едкой щелочи. Содержание свободной соляной кислоты равно количеству щелочи, использованному на титрование желудочного содержимого до кирпично-желтого цвета, умноженному на 100. Общая кислотность определяется по количеству щелочи, израсходованному на титрование желудочного содержимого до появления красной окраски (в присутствии фенолфталеина), уменьшенному на 0,05 (число индикаторной поправки) и умноженному на 100 (при резко сниженной кислотности рекомендуется индикаторная поправка 0,03).

Определять кислотность следует в каждой 15-минутной порции базальной и стимулированной секреции, что позволяет установить тип кислотной кривой, имеющий важное значение в диагностике заболеваний желудка.

У здоровых людей и у лиц с нормацидным гастритом в стимулированную гистамином фазу секреции уровень свободной соляной кислоты повышается на 30-й минуте и снижается к концу первого часа исследования. При гастрите с секреторной недостаточностью наблюдается запаздывающая кислотная кривая, когда уровень свободной соляной кислоты повышается только на 60-й минуте. В этих случаях необходимо продолжить зондирование, так как максимальная кислотная продукция может наблюдаться на 90-й или 115-й минуте (уровень свободной соляной кислоты может быть в пределах нормы) и снижается к концу второго часа.

При секреторной недостаточности возможны также низкая кислотная кривая или ложная ахлоргидрия, при которой на фоне анацидного состояния свободная соляная кислота появляется только к концу второго часа исследования и не достигает нормального уровня. На секреторную недостаточность, обусловленную воспалительным процессом, указывает также астенический тип секреции, т. е. медленное нарастание уровня свободной соляной кислоты к 45-й минуте и снижение ее ниже нормы к концу первого часа.

При язвенной болезни желудка в период обострения заболевания наблюдается удлиненная кислотная кривая с медленным нарастанием до высоких показателей свободной соляной кислоты в конце второго часа исследования.

О наличии язвенной болезни двенадцатиперстной кишки или синдроме Золингера—Эллисона свидетельствует высокая или ступенчатая кислотная кривая с повышением уровня соляной кислоты по сравнению с нормальным. В тех случаях, когда имеются только функциональные нарушения в органах пищеварения, кислотная кривая характеризуется незакономерными колебаниями.

Определение дебита соляной кислоты

Для более объективной оценки кислотообразующей функции желудка введено понятие дебита соляной кислоты, которое характеризует ее количество, выделившееся за единицу времени (1 ч) и выраженное в миллимолях. Для определения дебит-часа соляной кислоты предложена следующая формула:

Dч=V1*E1*0,001+V2*E2*0,001+V3*E3*0,001+V4*E4*0,001

где Dч — дебит-час соляной кислоты, ммоль; V — объем порции желудочного содержимого, мл; E — концентрация соляной кислоты той же порции, титрационных единиц; 0,001 — количество соляной кислоты в 1 мл желудочного содержимого при концентрации ее, равной 1 ммоль/л.

Поскольку величина дебит-часа зависит от часового напряжения секреции, то следует стремиться к наиболее полному извлечению желудочного содержимого.

В зависимости от того, какой показатель кислотности желудочного содержимого используется при вычислении, различают дебит свободной и связанной соляной кислоты, а также общей кислотности (кислотная продукция), который определяют исходя из величины общей кислотности. Принято определять дебит свободной соляной кислоты. Дебит-час соляной кислоты базальной секреции обозначают BAO (basal acid output — базальная кислотная продукция), а при максимальной гистаминовой стимуляции— MAO (maximal acid output — максимальная кислотная продукция). Дебит порции, полученной натощак, обозначают как голодный дебит соляной кислоты. Дебит-час соляной кислоты при субмаксимальной гистаминовой стимуляции обозначают SAO (submaximal acid output — субмаксимальная кислотная продукция).

В лабораторной практике для облегчения определения дебит-часа соляной кислоты используется номограмма В. В. Калиниченко и др.. При этом цифры, обозначающие объем и кислотность данной порции желудочного содержимого, расположенные на противоположных ветвях кривой, соединяют линейкой. В месте пересечения линейки с центральной вертикальной осью находят значение дебита.

Определение дебита соляной кислоты

Нормальные показатели желудочной секреции приведены в таблице.

Нормальные показатели секреторной функции желудка

Показатели Натощак(максимальные величины) Базальная секреция Последовательная реакция на гистамин
субмаксимальная максимальная
Объем, мл 50 50— 100 110—140 150—200
Общая кислотность, ммоль/л 40 40-60

 

90—100 100—200
Свободная HCl, ммоль/л 20 20—40 65—85 90—100
Связанная HCl, ммоль/л 10 10—15 12—15 14—16

 

Дебит-час общей кислотности, ммоль/ч 2 1,5—5,4 8—14 18—26
Дебит-час свободной HCl, ммоль/ч 1 1—4 6,5—12 16—24
Дебит-час связанной HCl, ммоль/ч 0,5 0,5—1,5 0,6—1,5 0,7—1,6
Объем кислого секрета компонента, мл

 

21 21—51 68—90 90,5—112
Истинный дебит-час HCl, ммоль/ч

 

2,3

 

3,3—8,2 10,5—14,5 18,5—26,5
Объем щелочного компонента, мл

 

29 29—49 30—50 50—60
Дебит-час гидрокарбоната, ммоль/ч 1,3 1,3—2,2 1,3—4,0 1,8—2,0

Примечание. Дебит-час секреция натощак рассчитан по отношению к объему соответствующей порции желудочного сока.

Определение дефицита соляной кислоты

Отсутствие в желудочном содержимом свободной соляной кислоты указывает на угнетение кислотообразования, которое оценивается по дефициту соляной кислоты. Определяется дефицит соляной кислоты путем титрования желудочного содержимого 0,1 н. раствором соляной кислоты в присутствии индикатора (1 % спиртового раствора диметиламидоазобензола) до появления свободной соляной кислоты.

Дефицит соляной кислоты указывает на содержание щелочных компонентов, не связанных кислотой. Принято считать, что максимальный дефицит соляной кислоты, равный 40 титр ед, указывает на прекращение секреции соляной кислоты (абсолютная ахлоргидрия). При меньшей величине дефицита соляная кислота выделяется париетальными клетками, но из-за связывания щелочными компонентами в свободном виде не выявляется (относительная ахлоргидрия).

Относительная ахлоргидрия может также наблюдаться при отсутствии как свободной, так и связанной соляной кислоты. Такой вариант возможен в тех случаях, когда вся соляная кислота нейтрализуется гидрокарбонатом натрия.

О наличии абсолютной ахлоргидрии можно судить только после проведения максимальной гистаминовой стимуляции. Такая ахлоргидрия наблюдается в основном при B12-дефицитной анемии. При абсолютной ахлоргидрии внутрижелудочная pH под влиянием гистамина не снижается. Поскольку максимальная гистаминовая стимуляция может использоваться лишь в исключительных случаях, желательно применять для диагностики внутрижелудочную pH-метрию.

Значительный дефицит соляной кислоты указывает на наличие в желудочном содержимом продуктов тканевого распада (гноя, крови).

Оценка базальной секреции

Величина базальной секреции свободной соляной кислоты у лиц с анацидным и гипоанацидным гастритом, раком желудка составляет 0—1 ммоль/ч, у здоровых людей и страдающих нормацидным гастритом — 1—4 ммоль/ч, язвой желудка или двенадцатиперстной кишки — 4—5 ммоль/ч (более 5 мм/ч обычно характерно для язвы двенадцатиперстной кишки), синдромом Золингера—Эллисона — 10— 20 ммоль/ч.

Оценка максимальной секреции

Максимальная секреция, равная нулю — истинная ахлоргидрия наблюдается при атрофическом гастрите, раке желудка (в этих случаях нужно исключить рефлюкс дуоденального содержимого). Величина МАО от 1 до 18 ммоль/ч указывает на недостаточную кислотную продукцию при гастрите или раке желудка; 18 — 20 ммоль/ч — на нормальную продукцию (у здоровых людей или у лиц с нормацидным гастритом); 20—26 — на повышенную кислотную продукцию у страдающих язвенной болезнью двенадцатиперстной кишки, синдромом Золингера—Эллисона.

Оценка кислотной продукции по соотношению ВАО и МАО

У здоровых людей соотношение ВАО:МАО равно 1:6.

При функциональном торможении и снижении реактивности париетальных клеток наблюдается уменьшение базальной секреции, максимальная кислотная продукция нормальная, ВАО:МАО — 1:10 или 1:12.

При атрофии или повреждении париетальных клеток снижена как базальная, так и максимальная кислотная продукция. Соотношение ВАО:МАО может быть как увеличенным (если преобладает функциональное торможение), так и уменьшенным (при выраженной атрофии париетальных клеток).

При повышенной нейрогуморальной стимуляции париетальных клеток (гиперреактивное состояние) наблюдается увеличение ВАО при нормальном или несколько повышенном МАО; ВАО:МАО= 1:2 или 1:3.

При гиперплазии желез желудка с увеличением количества париетальных клеток повышается как максимальная, так и базальная секреция.

Определение кислого и щелочного компонентов секреции желудка

При исследовании дебита соляной кислоты не определяется часть соляной кислоты, нейтрализующаяся в желудке гидрокарбонатом. Для учета нейтрализованной части соляной кислоты определяется объем кислого и щелочного компонентов и истинный дебит соляной кислоты.

Кислый компонент вычисляется по формуле Томсона—Вейна

P=V*(0,219+4,88*Н+),

где P — объем кислого компонента, мл; V — объем желудочного сока в исследуемой порции, мл; Н+ — общая кислотность в данной порции, ммоль/л; 0,219 и 4,88—постоянные величины.

Щелочной компонент определяют по формуле:

NP=V—P,

где NP — объем щелочного компонента, мл; V — объем порции желудочного сока, мл; P — объем кислого компонента в данной порции, мл.

Зная объем кислого компонента, можно вычислить истинный дебит соляной кислоты по следующей формуле:

D=З*160*0,001

где D — истинный дебит-час соляной кислоты, ммоль; P — объем кислого компонента, мл; 160 — величина постоянной концентрации соляной кислоты, выделяемой париетальными клетками желудка; 0,001—количество соляной кислоты в 1 мл желудочного содержимого при концентрации ее, равной 1 ммоль/л.

На практике объем кислого компонента и истинный дебит соляной кислоты определяются по следующей номограмме.

Объем кислого компонента и истинный дебит соляной кислоты

Показатели истинного дебита соляной кислоты включают всю кислую продукцию, в том числе то количество соляной кислоты, которое нейтрализуется гидрокарбонатом желудочного сока. Истинный дебит соляной кислоты выше, чем МАО.

Щелочные свойства секрета желез желудка зависят от присутствия слизи и гидрокарбоната. Концентрацию гидрокарбоната в щелочном секрете большинство авторов считают постоянной. По данным литературы, она составляет 20—45 ммоль/л. Следовательно, зная объем щелочного компонента, определяют дебит-час гидрокарбоната по формуле Ю. И. Фиш- зон-Рысса:

Dгидр=N*P*C*0,001,

где Dгидр.— дебит гидрокарбоната, ммоль/ч; C — концентрация гидрокарбоната, принятая за постоянную величину,— 45 ммоль/л; NP — объем щелочного компонента, мл.

У больных язвенной болезнью двенадцатиперстной кишки увеличивается не только кислый, но и щелочной компонент секреции.

Оценка щелочного компонента секреции и истинного дебит-часа соляной кислоты

По величине секреции щелочного компонента можно судить о тяжести заболевания и степени компенсации секреторной функции желудка при гиперацидных состояниях.

Если при высоких показателях истинного дебит-часа соляной кислоты уровень щелочного компонента также высокий, имеет место компенсированное гиперацидное состояние. В случаях, когда при высоком истинном дебит-часе соляной кислоты содержание щелочного компонента незначительно повышено, можно говорить о субкомпенсации. Снижение продукции щелочного компонента при гиперацидном состоянии указывает на декомпенсацию и возможность развития пептической язвы желудка или двенадцатиперстной кишки.

Таким образом, повышенный уровень щелочных веществ в желудочном содержимом указывает на более легкое течение заболеваний, сопровождающихся повышенной кислотностью, и, наоборот, низкий уровень щелочного компонента свидетельствует о более тяжелом течении заболевания.

Определение темпа секреции ионов водорода

Одним из методов изучения желудочной секреции является определение темпа секреции ионов водорода с применением максимального гистаминового или пентагастринового теста.

Исследование проводится следующим образом. Больной проглатывает натощак желудочный зонд, конец которого должен располагаться в самом нижнем отделе желудка (положение его контролируют рентгеноскопически), что позволяет максимально отсасывать желудочный сок. Порцию секреции натощак отсасывают в течение 5 мин и выбрасывают. Желудочный сок часовой базальной секреции больной получает самостоятельно путем регулярного отсасывания его шприцем. Через 30 мин от начала сбора желудочного сока вводят внутримышечно I мл 1 % раствора димедрола.

После получения часовой базальной секреции подкожно вводят 0,1 % раствор гистамина дигидрохлорида из расчета 0,025 мг/кг массы тела. Спустя 10 мин начинают собирать на протяжении 1 ч порцию максимальной желудочной секреции. Измеряют объем двух полученных часовых порций, набирают по 20 мл каждой порции в стаканчики, погружают электрод pH-зонда и определяют pH. В дальнейшем, пользуясь данными объема часовых порций секреции и pH, определяют по номограмме темп секреции ионов водорода (Н+).

Определение темпа секреции ионов водорода

Практически при pH =3,15 темп секреции H+=0. При внутрижелудочном рН от 0,7 до 2,0 темп секреции H+ определяют по номограмме, соединив линейкой показатели объема и pH желудочного сока. Пересечение линейки со шкалой темпа секреции H+ указывает соответствующую величину в миллимолях в час. При значениях pH от 2,0 до 3,15 определение темпа секреции H+ проводят таким же образом, но величину pH уменьшают на 1,0, а результат уменьшают в 10 раз (запятую переносят влево на один знак).

Нормальный темп секреции ионов водорода в порции базальной секреции колеблется от 0 до 5 ммоль/ч, максимальной гистаминовой стимуляции — от 5 до 20 ммоль/ч, при применении пентагастрина — от 9 до 22 ммоль/ч.

Приведенный способ определения кислотности желудочного сока не отличается точностью, так как исследование кислотности аспирированного желудочного сока, в котором происходит нейтрализация кислого компонента щелочным, дает заведомо заниженные результаты. Ошибки в определении величины продукции соляной кислоты могут быть обусловлены неполным извлечением желудочного сока. Исключить указанные неточности позволяет внутрижелудочная pH-метрия.

Внутрижелудочная pH-метрия производится с помощью pH-зонда. Желательно пользоваться двухканальным pH-зондом, дающим возможность измерять pH непосредственно у стенки желудка, т. е. определять первичную кислотность в области дна желудка, где секрет имеет кислую реакцию, и в области привратника, где его железы выделяют щелочной секрет, который в норме способен нейтрализовать кислоту. Одновременная регистрация величины pH в указанных отделах желудка позволяет изучить кислотовыделительную функцию и ощелачивающую способность желудочного сока.

Внутрижелудочная pH-метрия

Зонд, применяемый для pH-метрии, имеет толщину 5 мм, длину около 1,5 мм, покрыт мягким, гладким, пластмассовым чехлом. На конце зонда имеется металлическая олива, в которую вмонтированы электроды (сурьмяный и каломельный). Вводят pH-зонд натощак, примерно на 0,7 м, при этом один электрод располагается в теле желудка, а другой — в привратниковой пещере. Желательно вводить зонд под рентгенологическим контролем. Его подключают к специальному pH-метру — ацидомеханографу Линара или к переоборудованному лабораторному pH-метру, в который монтируются два диапазона измерения для тела желудка и привратниковой пещеры. В норме натощак pH в теле желудка 5,0— 6,0, в привратниковой пещере — 7,0, что указывает на физиологический покой секреции желудка.

По некоторым данным, возможны следующие колебания величин pH базальной секреции тела желудка: 0,8— 1,5 — гиперацидность (кислый или раздраженный желудок); 1,6— 2,0 — нормацидность; 2,1—5,9 — гипоацидность; 6,0 и выше — ахлоргидрия.

Установление низкого pH еще не дает полной информации о силе кислотообразующей функции желудка. Для дифференциации низких показателей базальной секреции (гиперацидность, нормацидность) используются не стимуляторы, а суперпрессоры желудочной секреции. В этих случаях применяется атропиновый тест.

Атропиновый тест

После введения в желудок pH -зонда и проведения рентгенологического контроля за правильностью его расположения у больного регистрируют в течение 1 ч фундальный и антральный базальный pH (4—6 определений с интервалами 10— 15 мин).

Атропиновый тест

При выявлении низкого базального pH (менее 2,0) вводят подкожно 1 мл 0,1 % атропина сульфата и в течение следующего часа продолжают таким же образом регистрацию pH (последовательный pH). Результаты атропинового теста оцениваются не только по степени и продолжительности повышения pH, но и по разнице усредненных показателей базального и последовательного рН (кратковременные изменения pH, наблюдающиеся при дуоденогастральном рефлюксе, не учитываются). В тех случаях, когда внутрижелудочная pH при последнем измерении повышается, проводятся добавочно еще два измерения (с интервалами 10—15 мин) для исключения дуоденогастрального рефлюкса.

По степени увеличения pH различают следующие реакции на атропиновый тест:

  • pH свыше 2,0 — сильная;
  • от 1,0 до 2,0 — средняя;
  • от 0,5 до 1,0 — слабая;
  • менее 0,5 — незначительная;
  • отсутствие изменений — отрицательная.

Если разница усредненных показателей базального и последовательного pH составляет 0,6, атропиновый тест считается слабоположительным, 0,02 — отрицательным. При разнице pH более 0,6 — положительным.

Оценка атропинового теста возможна не только по усредненным величинам базального и последовательного pH часового измерения, но и по пиковому значению pH в области дна желудка после введения атропина. Этот способ определения внутрижелудочного pH более информативен, однако при дуодено-гастральном рефлюксе возможны побочные результаты.

По ощелачивающей способности секрета желудка в области привратниковой пещеры различают:

  • компенсированное кислотообразование, когда pH антрального отдела превышает pH тела желудка и близок к нейтральному;
  • декомпенсированное кислотообразование с незначительной разницей между pH антрального отдела (нейтрализующей области) и тела желудка (кислотообразующей области);
  • частично компенсированное кислотообразование с разницей между pH антрального отдела и тела желудка 1,0—1,5.

Таким образом, атропиновый тест позволяет выделить среди больных с низким внутрижелудочным pH натощак группу атропинорезистентных лиц, у которых при фракционном зондировании выявляется большой дебит соляной кислоты за счет ее высокой секреции. У чувствительных к атропину больных объем секреции соляной кислоты менее высокий. Атропиновый тест повышает информативность внутрижелудочной pH -метрии, служит диагностическим и прогностическим тестом при язве двенадцатиперстной кишки и других видах желудочной гиперхлоргидрии. Применяют его для выбора хирургического способа лечения язвенной болезни.

Судить о степени компенсации кислого желудка можно на основании внутрижелудочной pH -метрии с нагрузкой натрия гидрокарбонатом — щелочной тест.

Определение молочной кислоты

Помимо соляной кислоты в содержимом желудка могут находиться другие кислоты, из которых наибольший клинический интерес представляет молочная. Она появляется в результате нарушения обмена веществ в злокачественной опухоли, поражающей желудок, или при застойных процессах в желудке, в случае отсутствия свободной соляной кислоты и наличия палочек молочнокислого брожения.

Качественные пробы для выявления молочной кислоты основаны на появлении при взаимодействии ее с хлоридом железа желто-зеленоватой окраски в результате образования лактата железа.

Определение активности пепсина

Определение активности пепсина основывается на косвенных методах изучения переваривающей способности желудочного содержимого. Предложено несколько методик, которые отличаются друг от друга использованием различных субстратов для переваривания и временем контакта с ферментом. С целью определения суммарной протеолитической активности можно брать нативный желудочный сок или желудочный сок с буфером, обеспечивающим оптимум действия пепсина.

Наиболее распространенным методом определения активности пепсина является метод Туголукова. С его помощью можно определять пепсин желудочного сока, уропепсиноген и пепсиноген в крови, что позволяет сопоставлять полученные данные. О содержании пепсина в желудочном содержимом судят по количеству переваренного белка сухой плазмы.

При определении дебит-часа (часового напряжения) пепсина его содержание в миллилитрах в данной порции умножают на объем порции желудочного содержимого, затем показатели, полученные в течение 1 ч, складывают.

Второй унифицированный метод определения активности пепсина — метод Ансона в модификации Черникова. Он основан на изучении переваривающей способности пепсина желудочного сока в присутствии гемоглобина в качестве субстрата.

Нормальные величины активности пепсина должны быть выведены при исследовании доноров в каждой лаборатории, так как они зависят от активности кристаллического пепсина, используемого для построения калибровочного графика.

В норме содержание пепсина в желудочном содержимом после капустного пробного завтрака составляет от 0,2 до 0,45 г/л.

Для определения активности пепсина используется также метод Ханта, при котором в качестве субстрата используется белок плазмы крови. Измерение проводят на медицинском колориметре после добавления реактива Фолина, для оценки используют калибровочную таблицу, построенную при исследовании стандартных растворов пепсина. При определении количества пепсина, выделившегося за час, учитывают часовое напряжение.

Содержание пепсина у здоровых людей в порции базальной секреции составляет от 50 до 300 мг/ч, при максимальной гистаминовой стимуляции— от 100 до 900 мг/ч. Отмечается параллелизм между продукцией соляной кислоты и содержанием пепсина. При язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки эти показатели высокие, при хроническом гастрите с секреторной недостаточностью сниженные, однако при ахилии отсутствия пепсина не наблюдается.

Интрагастральное определение протеолитической активности желудочного сока

Для интрагастрального изучения протеолитической активности желудочного сока вводят через зонд полихлорвиниловую трубочку с субстратом (технический альбумин или куриный белок, подвергнутый коагуляции), надетую на металлический цилиндр, припаянный к жесткому стальному тросу. Спустя 1 ч после введения трубочки с субстратом ее извлекают из желудка через зонд, вводят парентерально субмаксимальную или максимальную дозу гистамина и повторно вводят на 1 ч субстрат для оценки выраженности протеолиза в желудке не только в период базальной, но и стимулированной гистамином секреции.

Степень интрагастрального протеолиза оценивается по объему переваренного субстрата и выражается в микрограммах в час. После извлечения трубочки из желудка определяется количество переваренного белка, затем ее помещают в 20 н. раствор соляной кислоты для оценки дополнительного переваривания альбумина, которое происходит за счет пепсина, проникшего в субстрат из желудочного содержимого. Интенсивность дополнительного протеолиза альбумина обусловливается концентрацией пепсина в желудке. Следовательно, по количеству переваренного субстрата, определяемого сразу после его часового пребывания в желудке, судят о степени интрагастрального протеолиза, а данные дополнительного протеолиза субстрата отражают концентрацию пепсина в содержимом желудка.

Как в условиях базальной секреции, так и после субмаксимальной гистаминовой стимуляции у больных, страдающих язвенной болезнью двенадцатиперстной кишки, дополнительный протеолиз выше, чем у здоровых людей.

Интрагастральное исследование протеолитической активности желудочного сока имеет важное диагностическое значение, поскольку отражает функциональное состояние секреторного аппарата желудка в условиях, максимально приближенных к физиологическим.

Суммарную протеолитическую активность желудочного сока можно определять микроэкспресс-методом А. А. Покровского.

Определение внутреннего фактора

Внутренний фактор является компонентом слизи желудка. Определяется он упрощенным способом (по методике Гласса—Бойда), основанным на осаждении белков и действии на осадок соляной кислоты и едкого натра.

Концентрация внутреннего фактора в норме натощак составляет 0—0,2 г/л, после пробного завтрака у здоровых людей обнаруживается — 0,2—0,5 г/л.

Значительно повышается концентрация внутреннего фактора при язвенной болезни двенадцатиперстной кишки, что особенно выражено в межпищеварительном периоде.

Снижение количества внутреннего фактора наблюдается при хроническом гастрите и указывает на атрофию желез желудка. Выраженное уменьшение секреции внутреннего фактора свидетельствует о возможности развития B12-дефицитной анемии.

Полученные данные исследования внутреннего фактора не имеют самостоятельного значения, они лишь дополняют результаты исследования кислотообразующей функции желудка.